叶程
- 作品数：9 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 双靶向配体化力达霉素在大鼠体内药动学及组织分布和排泄
- 2019年
- 目的研究双靶向配体化力达霉素(DTLL)在大鼠体内的药动学特征及组织分布和排泄。方法单次iv给予Wistar大鼠[125I]DTLL,给药剂量为2625 kBq·0.05 mg-1·kg-1。分别收集0~6 h内组织样本、0~24 h内血清样本以及0~168 h内尿液、粪便和胆汁样本,用液体闪烁仪分别检测样品放射性浓度,用WinNonlin软件和非房室模型统计矩法计算药动学参数,并分析[125I]DTLL在体内的分布和排泄。结果DTLL原型药物的曲线下面积(AUC0-∞)为(184±33)h·μg·L-1,半衰期(t1/2)为(3.98±0.75)h,清除率(Cl)为(278±41)mL·h-1·kg-1。[125I]DTLL iv给予大鼠后,广泛分布于全身各组织中,在主要脏器中均未发现蓄积现象;给药后0~168 h,粪便和尿液累积排泄分数分别为(10.4±6.6)%和(82.5±2.6)%,经粪尿总排泄量可达给药剂量的(92.9±7.4)%。结论DTLL iv给予健康Wistar大鼠后可迅速分布于全身,可能不能通过血脑屏障,DTLL主要通过粪尿途径排泄。
- 叶程曹睿宋文凭张玉民樊慧蓉刘鉴峰李亮邵荣光
- 关键词：同位素药动学
- 槐定胺类衍生物及其制备方法和用途
- 本发明涉及槐定胺类衍生物及其制备方法和用途，具体涉及式I所示化合物、其光学异构体、其溶剂合物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物结构新颖，并且具有优异的抗肿瘤活性，例如对肝癌、肺腺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、宫颈癌、卵巢癌...
- 宋丹青毕重文李迎红唐胜范田运蒋建东邓洪斌叶程
- 文献传递
- 双靶向配体化力达霉素DTLL的制备优化和稳定性研究被引量：2
- 2018年
- 目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体、宿主菌株、表达温度、诱导剂终浓度、菌体密度和诱导时间进行优化。以高压破碎法提取可溶性目的蛋白,采用Ni+亲和与分子筛层析两步纯化,得到高纯度DTLP,再与力达霉素发色团组装获得DTLL。采用HPLC、MTS、ELISA法进行稳定性试验,分别监测DTLL冻干样品的蛋白纯度、发色团含量、细胞毒和亲和力活性的变化。结果经过发酵提取工艺优化,每升发酵液所得DTLP蛋白约为22 mg,是优化前每升9 mg的2.4倍,其蛋白纯度达到99.7%;DTLL组装效率达到68%;稳定性试验结果显示,DTLL冻干样品对光照敏感,在–80℃低温避光环境下可稳定保存。结论成功优化了双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺,提升了产品纯度和产率,为其后续生产和临床申报提供了实验基础,也为其他抗体偶联药物的制备提供了较成熟完善的技术平台。
- 叶程曹睿宋文凭李良李毅赵春燕李亮邵荣光
- 关键词：重组融合蛋白质类蛋白质稳定性
- 双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺改进和质量标准制定
- 本发明涉及免疫融合蛋白DTLP的和双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺改进和质量标准制定，主要包括：筛选高产的转化宿主菌株、改变发酵菌体起始密度，缩短诱导后发酵时间等表达条件；改用压力破碎法破碎菌体提取总的可溶性蛋白，...
- 邵荣光李亮叶程曹睿宋文凭李良李毅刘秀均甄永苏赵春燕
- 文献传递
- 双靶向配体化力达霉素DTLL联合吉西他滨在胰腺癌治疗中的应用
- 本发明涉及双靶向配体化力达霉素DTLL的单独用药以及与吉西他滨联合给药在胰腺癌治疗中的应用。体内外研究结果表明，我们制备的DTLL能与其受体特异性亲和，同时对高表达EGFR/HER2的胰腺癌细胞MIA‑paca‑2有特异...
- 李亮邵荣光叶程曹睿宋文凭李良李毅刘秀均甄永苏赵春燕姚红娟
- 文献传递
- 双靶向配体化力达霉素的急性和亚急性毒性
- 2020年
- 目的通过观察双靶向配体化力达霉素(DTLL)的急性和亚急性毒性,获得DTLL的半数致死剂量(LD_(50))、最大耐受剂量和相关生理病理等指标,为其安全性评价提供毒理学依据,为其临床应用研究奠定基础。方法①急性毒性试验:60只雌性各半的昆明小鼠按体质量随机分为正常对照组及DTLL 1.44,2.05,2.93,4.19和5.99 mg·m^(-2),24 h内经尾静脉单次注射给予DTLL,分别于第3,7和14天测定小鼠体质量,观察并记录小鼠给药后的毒性反应和死亡情况。②亚急性毒性试验:120只雌性各半的SD大鼠随机分为正常对照组及DTLL 61,122和245μg·m^(-2)组,尾静脉注射给予DTLL,每周给药1次,共给药4周,停药后恢复4周。每周检测大鼠体质量和摄食量。分别于第28和56天取血液、尿液和主要脏器组织,用Konelab PRIME 30全自动生化分析仪和尿液分析质控仪检测血液和尿液生化指标,同时用HE染色组织切片,观察其病理变化。结果①急性毒性试验:DTLL单次给药对昆明小鼠LD_(50)为2.45 mg·m^(-2),DTLL>2.05 mg·m^(-2)组小鼠体质量下降(P<0.05),出现行动迟缓和眼睑闭合等症状,并有小鼠陆续死亡。组织学检查显示,小鼠有不同程度的脾萎缩、髓外造血和肝、肾细胞坏死。②亚急性毒性试验:SD大鼠经尾静脉注射DTLL,28 d重复给药后计算所得最大耐受剂量为122μg·m^(-2),DTLL 61,122和245μg·m^(-2)组大鼠体质量降低(P<0.05)、摄食量减少(P<0.05);245μg·m^(-2)组停药后,谷丙转氨酶(P<0.01)和谷草转氨酶活性升高(P<0.05)。组织病理观察显示,245μg·m^(-2)组大鼠出现肝细胞病变、脾生发中心增大、肺炎症细胞浸润和肾小管嗜酸性病变等。结论DTLL可产生延迟性肝、肾毒性,并可能引起免疫抑制和造血功能障碍,其毒性作用的靶器官主要为肝、肾、脾和肺。
- 曹睿秦秀军魏锦萍叶程宋文凭李亮邵荣光
- 关键词：力达霉素靶向药物急性毒性亚急性毒性
- 槐定胺类衍生物及其制备方法和用途
- 本发明涉及槐定胺类衍生物及其制备方法和用途，具体涉及式I所示化合物、其光学异构体、其溶剂合物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物结构新颖，并且具有优异的抗肿瘤活性，例如对肝癌、肺腺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、宫颈癌、卵巢癌...
- 宋丹青毕重文李迎红唐胜范田运蒋建东邓洪斌叶程
- 文献传递
- 人视网膜母细胞瘤Y79细胞依托泊苷耐药株的建立及其耐药机制初探
- 2017年
- 目的通过构建人视网膜母细胞瘤Y79细胞的依托泊苷耐药株,比较耐药株的药物敏感性和细胞生长情况,观察耐药相关基因及细胞信号通路的变化,从而阐释人视网膜母细胞瘤对依托泊苷的耐药机制。方法以不同浓度梯度的依托泊苷处理Y79细胞,采用浓度递增不间断刺激法构建依托泊苷耐药株,观察耐药株细胞的形态学变化和细胞生长增殖情况以及对依托泊苷细胞毒作用的敏感性;以caspase 3/7酶活性来评估耐药株的细胞凋亡程度,并通过Western blot方法研究与细胞增殖和耐药相关蛋白的表达变化。结果成功构建耐受依托泊苷的人视网膜母细胞瘤耐药株Y79/EDR,最大耐药浓度为500 nmol/L。和亲本细胞相比,耐药细胞具有较强的生长增殖能力,倍增时间缩短14.5 h(P<0.001);且对依托泊苷的敏感性显著下降,耐药指数达29.47。Caspase 3/7活性检测结果显示,给予亲本及耐药细胞不同浓度的依托泊苷后,耐药细胞中caspase 3/7活性明显低于亲本细胞,凋亡减少,且呈药物浓度依赖性。Western blot结果表明,耐药细胞中磷酸化AKT(p-AKT)表达明显高于亲本细胞,提示其p-AKT的活性明显增强,p-AKT促进其下游蛋白MDM2的磷酸化从而抑制p53的磷酸化,而凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的比值明显降低。多药耐药性蛋白P-糖蛋白(P-gp)的表达下调,Rb1蛋白表达水平无明显变化,提示耐药株Y79/EDR的耐药并不依赖于P-gp而产生,且与Rb1蛋白无关,而可能通过增加肿瘤驱动蛋白AKT的磷酸化,激活其所介导的下游信号通路,增加靶蛋白MDM2的表达,从而抑制抑癌蛋白p53的表达;同时增加抗凋亡蛋白Bcl-2和降低抑凋亡蛋白Bax的表达水平;最终导致细胞通过增殖显著增强和凋亡明显减少而产生耐药。结论成功构建依托泊苷耐药株Y79/EDR,初步结果表明,其耐药细胞株可能通过促进细胞生长与增殖,同时抑制细胞凋亡而导致耐药,这将为深入研究人�
- 宋文凭张诚玥张燕李毅曹睿叶程张琳邵荣光李亮赵军阳
- 关键词：视网膜母细胞瘤依托泊苷
- 双靶向配体化力达霉素DTLL联合吉西他滨在胰腺癌治疗中的应用
- 本发明涉及双靶向配体化力达霉素DTLL的单独用药以及与吉西他滨联合给药在胰腺癌治疗中的应用。体内外研究结果表明，我们制备的DTLL能与其受体特异性亲和，同时对高表达EGFR/HER2的胰腺癌细胞MIA‑paca‑2有特异...
- 李亮邵荣光叶程曹睿宋文凭李良李毅刘秀均甄永苏赵春燕姚红娟
