周广运 作品数:7 被引量:26 H指数:3 供职机构: 东北农业大学食品学院 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 理学 更多>>
加工方法对猪肉成分RQ-PCR检测结果影响的研究 被引量:2 2017年 为评价不同加工处理方法对肉制品猪肉成分实时定量PCR(RQ-PCR)检测结果的影响,研究建立混合肉制品标准品(猪肉质量百分比0.05%~20%),采用5种方法(煮制、微波加热、超声波、烤制、高温高压灭菌)对混合肉制品进行处理,提取肉制品总DNA,采用RQ-PCR扩增线粒体细胞色素b(Cytb),以真核生物18S r RNA为内参,通过△Ctt建立标准曲线并进行相对定量,比较△Ct之间的差异,并由此判断不同加工方法对相对定量的影响,结果显示,不同的加工处理方法均能引起DNA的降解。而通过RQ-PCR检测发现,虽然Ct值随DNA降解程度加深而升高,但△Ct变化较小。因此,△Ct法可作为分析肉制品中猪肉成分的可靠定量手段。 杨艳 王桂姬 周广运 任皓威 夏秀芳 刘宁关键词:实时荧光PCR 猪肉 多种绿色DNA嵌入染料实时荧光PCR检测猪DNA效果比较 被引量:3 2018年 实时荧光定量PCR是食品科学领域一种高效、灵敏的研究技术,荧光染料的种类和浓度会对实时PCR反应产生一定影响。以8种绿色荧光DNA嵌入染料SYTO 11~14,SYTO 16,SYTO 21,SYTO 24~25为研究对象,体系选择荧光染料浓度分别为10,5,2,1,0.5μmol/L,以从猪肉中提取的基因组DNA为模板进行扩增,产物长度149 bp。通过分析Ct值和熔解曲线,评价染料浓度对扩增效果的影响,初步筛选出最适染料及相应浓度:SYTO 11(5μmol/L,2μmol/L),SYTO 13(10μmol/L,5μmol/L),SYTO 16(10μmol/L,5μmol/L),SYTO 21(1μmol/L)和SYTO 24(0.5μmol/L)。根据筛选结果自配反应预混液,以2种商业实时荧光PCR预混液为参照,通过模板10倍梯度稀释绘制标准曲线,计算扩增效率,R2均大于0.99,线性范围均在40 ng^0.04 pg之间,其中染料SYTO 13(10μmol/L)和SYTO 16(10μmol/L,5μmol/L)扩增效率分别为99.35%,100.50%和99.71%,接近商业试剂盒2(BYRT染色,扩增效率99.61%),高于商业试剂盒1(Evagreen染色,扩增效率97.80%),具有实际应用价值。 杨艳 王桂姬 周广运 任皓威 夏秀芳 刘宁关键词:实时荧光PCR 液相色谱质谱联用技术在植物蛋白及多肽研究中的应用 被引量:10 2017年 近年来,随着液相色谱质谱联用技术的发展,其在医药、环境和食品安全等领域中已得到广泛应用,目前也成为植物蛋白研究的重要手段。本文将从液相色谱质谱联用技术发展及液相色谱质谱联用技术在谷物蛋白、豆类蛋白及其他作物蛋白中的研究和应用进行归纳和总结,并对液相色谱质谱联用技术在植物蛋白研究中的发展方向和前景进行展望,以期为植物蛋白的深入研究提供最新的基础理论。 许岩 任皓威 周广运 刘宁关键词:液质联用 植物蛋白 超高效液相色谱-串联质谱法鉴定猪肉的特异性肽生物标志物 被引量:7 2017年 以亲缘关系较近的猪、牛和羊3个物种的肌肉组织为研究对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS),筛选并确认了猪物种肉特异性肽生物标志物。3种纯肉样品经蛋白质提取、胰蛋白酶消化和UPLC-Triple TOF-MS分离鉴定,得到的总离子流图谱(TIC)与Uniprot蛋白质数据库对比分析,筛选出3个物种肉的3种高丰度同源蛋白和8种潜在的肽生物标志物;潜在的肽生物标志物经QTRAP-MS质谱的多反应模式(MRM)分析,最终确认了猪物种肉的5种肽生物标志物,其中3种肽生物标志物未见文献报道。 周广运 王桂姬 任皓威 芦乾 杨艳 郭立海 刘宁关键词:猪肉 超高效液相色谱-串联质谱 一种防止乳糖不耐症和蛋白质过敏的0-6个月婴儿配方奶粉 本发明公开了一种防止乳糖不耐症和蛋白质过敏的0-6个月婴儿配方奶粉,属于配方食品技术领域。该婴儿配方粉每100g配方奶粉中含有12g-18g浓缩水解乳清蛋白粉;所述浓缩水解乳清蛋白粉中含有乳糖;所述乳糖含量为0~0.5g... 刘宁 任皓威 周广运文献传递 一种防止乳糖不耐症和蛋白质过敏的12-36个月幼儿配方奶粉 本发明公开了一种防止乳糖不耐症和蛋白质过敏的12‑36个月幼儿配方奶粉,属于配方食品技术领域。该幼儿配方粉每100g配方奶粉中含有18g‑30g浓缩水解乳清蛋白粉;所述浓缩水解乳清蛋白粉中含有乳糖;所述乳糖含量为0~0.... 刘宁 任皓威 周广运文献传递 PCR技术在肉类成分定量分析中的应用研究进展 被引量:5 2016年 PCR技术具有特异性强、灵敏度高、可同时分析大量样本的特点,在鉴别和定量分析食品中肉类成分上应用广泛。本文介绍了PCR扩增产物分析、实时荧光PCR和微滴数字PCR三种应用于肉类定量的技术,通过检出限、定量限和定量范围等数据分析这三种方法在肉类成分定量分析中的应用效果,并对其定量的局限性进行阐述,为进一步完善PCR定量技术提供参考。 杨艳 王桂姬 周广运 任皓威 夏秀芳 刘宁关键词:PCR