杨春晖 作品数:46 被引量:115 H指数:6 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所 更多>> 发文基金: 协和青年科研基金 卫生部部属(管)医院临床学科重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 经济管理 更多>>
一种新的实时荧光定量PCR方法对血小板制品细菌污染检测效果的评价 被引量:4 2015年 目的建立一种自主研发的针对细菌16 S r DNA基因的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法并评价该方法对浓缩血小板制品中细菌污染检测的效果。方法设计16S r DNA基因保守区引物,构建SYBR Green Real-time PCR反应体系;然后分别将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和绿脓杆菌以初始浓度为1CFU/m L、10 CFU/m L和100 CFU/m L接种到浓缩血小板中,经22℃保存7 d后,用实时定量荧光PCR方法进行细菌检测。结果细菌污染后的血小板在常规保存条件下,最长保存期<7 d,不同接种浓度的细菌生长情况的变化趋势基本一致,所有种类的细菌均在d 1、2表现出迅猛的增殖高峰,d 3以后增殖趋于平缓。结论该Real-time PCR检测体系可定量地检测出血小板的细菌污染的情况,可适用于血小板输注前的快速细菌污染检测。 边国慧 杨春晖 高瞻 徐敏 何苗关键词:浓缩血小板 细菌污染 实时荧光定量PCR M007介导的光动力疗法对人成骨肉瘤MG63细胞增殖的影响 2012年 目的观察新型光敏剂M007介导的光动力疗法(PDT)对体外培养人成骨肉瘤MG63细胞增殖能力的影响。方法取1mL含人成骨肉瘤MG63细胞1×106/mL的单细胞悬液加至培养皿中,分为实验组(M007-PDT组)、空白对照组(B组)、光照对照组(L组)和光敏剂对照组(M007组),按分组加入不同浓度M007(0,2,4,8,16μmol/L),分别用多光源红光光照系统或暗反应处理10min。采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色的流式细胞分析法,检测各组的细胞残存率及死亡方式;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验和细胞集落形成实验评估不同组残存细胞的增殖能力。实验组和对照组同步进行,每组重复6次。结果 M007浓度为2~16μmol/L时,其介导的光动力疗法能使超过90%的MG63细胞以晚期凋亡/坏死,或成为裸核的方式被灭活,在4~16μmol/L时,维持残存率小于1%;2~8μmol/L M007-PDT组中的残存细胞生长曲线低平,其光吸收值未随培养时间延长而增加(P>0.05),并且不能形成细胞集落,但2μmol/L M007-PDT组偶见一次16个活细胞。结论 M007浓度大于4μmol/L后,其介导的光动力疗法能完全灭活人成骨肉瘤MG63细胞,该技术应用于肿瘤术野血液回收有着良好的前景。 周裕凯 吴文知 张兰 杨春晖 王艳萍关键词:光敏剂 光动力疗法 人成骨肉瘤 MG63细胞 氯硝柳胺在制备治疗缓解小头症药物中的应用 本发明公开了氯硝柳胺在制备治疗缓解小头症药物中的应用,具体应用为制备减轻寨卡病毒感染所致小头症的药物。本发明实验证明氯硝柳胺抑制寨卡病毒感染的机制之一是激活线粒体吞噬,清除被病毒感染的线粒体,从而抑制ZIKV感染小头畸形... 陈利民 黄怡可 李世林 段晓琼 李玉佳 徐敏 杨春晖一种输血科室用血液冷藏置放架 本实用新型涉及输血科室用具技术领域,具体涉及一种输血科室用血液冷藏置放架。包括箱体,箱体的一侧开口,开口处铰接有箱门,箱体内垂直设置有安装柱,安装柱上水平设置有若干圆形托盘,托盘上设置有若干圈同圆心的轨道,每个轨道内均设... 徐敏 李世林 杨春晖 叶海艳 段晓琼 李玉佳1种新的检测血小板细菌污染的荧光定量PCR方法 2012年 目的建立一种新的16S rDNA实时荧光定量PCR方法,并评价该方法对浓缩血小板制品中细菌污染检测的效果。方法分别将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和绿脓杆菌以初始浓度为1CFU/ml、10CFU/ml和100CFU/ml接种到浓缩血小板中,经22℃保存7天,每天取样1ml,用荧光定量PCR方法进行细菌数量的检测。结果污染细菌后的血小板在常规保存条件下,最长保存期7d,不同接种浓度的细菌生长情况的变化,所有种类的细菌均在d1、2表现出迅猛的增殖高峰,3d以后增殖趋于平缓,到d5左右其生长速度趋于平台期。 边国慧 杨春晖 阳红 李武平关键词:细菌污染 浓缩血小板 蜡样芽孢杆菌 接种浓度 细菌数量 一种环状RNA作为寨卡病毒感染生物标志物的应用 本发明为一种环状RNA作为寨卡病毒感染生物标志物的应用。本发明提供一种与寨卡病毒感染密切相关的环状RNA及其扩增体系,将其用于制备检测寨卡病毒感染的试剂盒。生物标志物包括环状RNA hsa_circ_0007321及其扩... 段晓琼 谢鹤 康澜 陈利民 李世林 李玉佳 杨春晖 徐敏一管化RPA-CRISPR/Cas12a可视化联合检测12种病原体的试剂盒 本发明公开了一种一管化RPA‑CRISPR/Cas12a可视化联合检测12种病原体的试剂盒,装置和检测方法。本发明通过将RPA的扩增方法与CRISPR/Cas12的检测方法结合,并借助石蜡设计了一管化RPA‑CRISPR... 陈利民 谭琪 石耀强 徐敏 李玉佳 杨春晖 段晓琼 李世林1种吩噻嗪类衍生物光化学法病原体灭活的可行性分析——遗传毒性研究 2010年 黄毅 阳红 徐敏 文辉 蔡永福 张伶俐 杨春晖 王憬惺关键词:遗传毒性研究 光化学法 代谢活化 淋巴瘤细胞 小鼠成纤维细胞 新型光敏剂M007剂量及光剂量与红细胞溶血率的相关性研究 2012年 目的通过光敏剂剂量和光剂量与红细胞溶血率相关性的研究,为将光化学技术应用于血液中肿瘤细胞灭活的实验研究提供理论基础。方法将光敏剂M007加入Hct 40%的红细胞悬液中,经单波长630~660 nm红光光照后,测定红细胞溶血率。实验分为实验组(M007-PCT,加入光敏剂后光照)、光敏剂对照组(M007,加入光敏剂后避光)、光照对照组(L,仅光照)与空白对照组(C,不加入光敏剂,避光)。光敏剂剂量范围(4~40)μmol/L,光剂量范围(2.16~6.48))J/cm2。结果光剂量2.16 J/cm2,光敏剂浓度(4~40)μmol/L范围内,M007-PCT组及M007组红细胞均发生溶血,2组红细胞溶血率分别从(0.108±0.003)%、(0.092±0.001)%升至(1.032±0.074)%、(1.022±0.053)%,明显大于同剂量L组及C组(P<0.05)。L组与C组相比红细胞未发生溶血(P>0.05)。光剂量(2.16~6.48))J/cm2,M007-PCT组红细胞溶血率(28、32、36、40μmol/L)分别从(0.920±0.042)%、(0.945±0.054)%、(1.035±0.052)%、(1.032±0.074)%升至(1.489±0.315)%、(1.506±0.110)%、(1.484±0.308)%、(1.502±0.264)%。随暗反应时间延长M007组红细胞溶血率增加。结论 M007-PCT所致红细胞溶血率的变化与光敏剂剂量及光剂量具有相关性(r=0.956、r=0.946),光敏剂剂量及光剂量的增加均能导致红细胞溶血率的增加,实验剂量下最大溶血率<1.7%。 吴文知 黄毅 王艳萍 杨春晖 张兰关键词:光化学反应 光敏剂 光剂量 溶血率 终端干热法灭活人抗凝血酶-Ⅲ制品中细小病毒工艺研究 目的验证干热法灭活人抗凝血酶-Ⅲ制品中人细小病毒的效果。方法以猪细小病毒为模式病毒加入AT-Ⅲ样品中,按标准生产流程将制品冻干,然后采用100℃30 min的干热灭活方案处理冻干制品,用微量细胞病变法检测干热前后制品中猪... 胡吉军 杨春晖 邓靖 肖春桥 袁靖 秦亮 李长清 陈云华关键词:猪细小病毒