朱柳
- 作品数:35 被引量:76H指数:6
- 供职机构:广州医学院药物研究中心更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金广州市教育局市属高校科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生理学更多>>
- 柱前衍生化RP-HPLC分离巴氯芬的对映异构体被引量:7
- 2008年
- 目的建立巴氯芬对映异构体的拆分方法。方法采用柱前衍生化RP-HPLC法,以2,3,4,6-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯为柱前手性衍生化试剂,考察衍生化时间、试剂用量、流动相组成及其pH等因素对手性分离的影响。结果采用ZORBAX-C8(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,在流动相为甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(40:60,pH6.0)、紫外检测波长为254 nm、流速为1.5 m.lmin-1、柱温35℃的色谱条件下,巴氯芬对映体衍生物获得了基线分离,分离度为1.93,并确认了R(+)-衍生物的色谱峰。结论所建方法简便、快速,为巴氯芬的光学异构体的测定提供了参考。
- 张春艳袁牧黄碧云季红朱柳
- 关键词:巴氯芬反相高效液相色谱法对映体拆分
- 卵黄抗体用于蛇毒抗原检测的初步研究被引量:6
- 2005年
- 目的在常规ELISA检测中,以卵黄抗体取代哺乳动物来源的IgG类抗体,以探讨卵黄抗体应用于蛇毒检测的可行性.方法以甲醛减毒的眼镜王蛇毒抗原免疫莱航母鸡,制备抗眼镜王蛇毒抗体;采用过碘酸钠法对特异卵黄抗体进行酶标;将卵黄抗体及相应酶标抗体应用于常规ELISA中,对国内常见蛇毒样品抗原(包括眼镜王蛇毒、眼镜蛇毒、金环蛇毒、银环蛇毒、五步蛇毒及广东园斑蝰蛇毒)进行检测,并进行灵敏度、精确度、特异性及交叉反应等分析.结果检测的灵敏度可达32 μg·L-1,并且眼镜王蛇毒抗原浓度在32~750 μg·L-1的范围内,线性关系较好(r=0.963);初步应用表明卵黄抗体对眼镜王蛇毒具有较高的特异性,与蝰蛇科的五步蛇毒、园斑蝰蛇毒无交叉反应,与眼镜蛇科的金环及银环蛇毒仅在高剂量(剂量大于500 μg·L-1)时存在轻度交叉反应,不干扰实验检测,但与眼镜蛇毒之间交叉反应明显,干扰实验检测;应用本方法对低(100 μg·L-1)、中(300 μg·L-1)、高(1 000 μg·L-1)不同浓度的眼镜王蛇毒样品检测,结果平均板内变异系数均在1%~3%之内,板间变异系数在8%以内.结论 特异的卵黄抗体应用于微量蛇毒检测研究是可行的,具有灵敏度高、特异性较强等优点.该研究将为蛇伤诊断试剂盒的研制提供相应的理论依据.
- 王桂平余清声刘新艳朱柳覃媛黄劭
- 关键词:眼镜王蛇毒IGG类抗体
- 中华眼镜蛇毒活性组分诱导内皮细胞凋亡的机制
- 2011年
- 目的通过检测内皮细胞Bcl-2和caspase3的表达水平,探讨中华眼镜蛇毒活性组分(CCVAF)诱导内皮细胞凋亡的可能机制。方法采用血管内消化法原代培养牛肺主动脉血管内皮细胞(BAVEC)。实验分为不同浓度的CCVAF组(1.25,2.5,5,10 mg/L)和对照组(等体积的培养基)。采用流式细胞仪检测CCVAF作用24 h后各组BAVEC的Bcl-2表达水平;采用比色法测定caspase3的活性。结果经CCVAF作用后,流式细胞仪测定各组均未见到有阳性峰出现在M1,抗凋亡蛋白Bcl-2表达并没有受到药物的影响。而与对照组相比,capase3活性在1.25mg/L组即出现升高,此后随浓度的增加而升高,呈剂量依赖性(r=0.929,P<0.05)。各浓度组加入capase3活性抑制剂(Ac-DEVD-CHO)后,capase3活性明显降低,但仍然高于对照组(P<0.05)。结论 CCVAF不影响内皮细胞Bcl-2的表达,而能够上调capase3的活性。其可能不经Bcl-2影响的线粒体所在的凋亡通路调节细胞的凋亡。
- 刘新艳余清声王桂平余红娥朱柳袁牧楼晓华腾脉坤
- 关键词:眼镜蛇毒内皮细胞BCL-2凋亡血管生成
- 中华眼镜蛇毒活性组分诱导内皮细胞凋亡被引量:3
- 2008年
- 目的观察中华眼镜蛇毒活性组分(China cobra venom active factor,CCVAF)诱导内皮细胞凋亡的作用。方法采用荧光显微镜、流式细胞仪等方法检测CCVAF对牛肺主动脉内皮细胞(bovine arteria pulm onalis vascular endothelialcells,BAVEC)凋亡形态学、DNA、细胞周期以及凋亡指数的影响。结果经AO染色、流式细胞仪分析均证实CCVAF能够诱导内皮细胞出现凋亡。荧光显微镜下观察到CCVAF各浓度(0.15625、0.3125、0.625、1.25μmol.L-1)组处理的内皮细胞,核染色质固缩或断裂成片段状,染色不均匀,出现凋亡小体,凋亡细胞的比例随浓度升高而增加,0.625μmol.L-1组视野内凋亡细胞最多;流式细胞仪分析结果表明CCVAF在浓度低于0.625μmol.L-1,细胞生长被阻滞在S期,1.25μmol.L-1时则被阻滞在G0/G1期,且细胞凋亡率随浓度升高而逐渐增加。结论CCVAF能够诱导内皮细胞出现凋亡,通过此途径抑制内皮细胞的生长增殖,这可能是其对抗血管生成的机制。
- 刘新艳余清声余红娥朱柳王桂平袁牧楼晓华腾脉坤
- 关键词:眼镜蛇毒内皮细胞细胞凋亡血管生成肿瘤
- 南海海绵Iotrochota sp.中抗氧化活性成分的研究被引量:2
- 2009年
- 目的研究南海海绵Iotrochota sp.中的抗氧化活性成分。方法以95%乙醇浸提得南海海绵总浸膏,经多步分配得乙醇、正己烷和正丁醇部位。采用DPPH法进行活性示踪、反相柱层析和HPLC法分离,光谱方法进行结构鉴定。结果分离得到的化合物鉴定为purpurone,其清除DPPH自由基的IC50为19μg.m l-1。结论Purpurone为海绵Iotrochota sp.的特征性成分和主要抗氧化活性成分,对Iotrochota属海绵的分类具有重要意义。
- 季红刘永宏袁牧朱柳黄碧云
- 关键词:抗氧化DPPH自由基
- 尼可地尔在抑制内皮素诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用
- 1999年
- 目的:探讨丝裂素活化的蛋白激酶(MAPK),在ATP敏感钾通道开放剂尼可地尔抑制内皮素(ET-1)诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法:将10^(-7)~10^(-5)mol/L的尼可地尔导于培养血管平滑肌细胞,ET-1诱导培养大鼠血管平滑肌细胞增殖。用Western Blot法测定磷酸化 MAPK蛋白表达。[~3 H]胸腺嘧啶核苷酸掺入测定平滑肌细胞 DNA合成。结果:ATP敏感钾通道开放剂尼可地尔抑制ET-1诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞[~3H]胸腺嘧啶核苷酸掺入并同时剂量依赖性下调 MAPK蛋白表达。结论: ATP敏感钾通道开放剂尼可地尔可通过下调MAPK的表达从而抑制ET-1诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞增殖。
- 黄韶玲余清声陈华朱柳
- 关键词:钾通道开放剂血管活性物质血管平滑肌培养细胞
- 氟比洛芬对映异构体的手性衍生化反相高效液相色谱拆分及质谱鉴定被引量:9
- 2008年
- 以二氯亚砜和R-(+)-1-(1-萘基)乙胺为手性衍生化试剂,建立了一种柱前衍生化反相高效液相色谱法分析氟比洛芬对映异构体的方法。选用C18柱,以乙腈-50 mmol/L磷酸二氢钾溶液(体积比75∶25)为流动相,在254 nm检测,非对映异构体色谱峰的保留时间分别为5.6和6.2 min,分离度为2.0,检出限为12μg/L(S/N=3)。并经液相色谱-电喷雾离子阱质谱实现了衍生物的分离与鉴定。其衍生化产物稳定,方法灵敏度高,重复性好,可用于氟比洛芬及其对映异构体的药理学立体选择性研究和药品质量控制。
- 吴薇黄碧云袁牧朱柳季红
- 关键词:氟比洛芬对映体拆分液相色谱-质谱
- 用还原型谷胱甘肽制备阵发性睡眠性血红蛋白尿样红细胞
- 1996年
- 用还原型谷胱甘肽制备阵发性睡眠性血红蛋白尿样红细胞符民桂,朱柳,管锦霞(广州医学院广州蛇毒研究所,广州510182)陈和平(广东省人民医院血液病研究室)关键词阵发性睡眠性血红蛋白尿,还原型谷胱甘肽,红细胞,模型阵发性睡眠性血红蛋白尿(Paroxysr...
- 符民桂朱柳管锦霞陈和平
- 关键词:睡眠性血红蛋白尿还原型谷胱甘肽红细胞
- 眼镜蛇毒活性组分抑制内皮细胞生长及其生化机制初探被引量:1
- 2009年
- 目的探讨中华眼镜蛇毒活性组分(CCVAF)抑制新生牛肺主动脉血管内皮细胞(BAVEC)生长的作用及其生化机制。方法用MTT法测定CCVAF抑制BAVEC的增殖活性,用伊红-考马斯亮蓝法观察细胞骨架,罗丹明-鬼笔环肽荧光探针F-actin骨架蛋白定位,荧光标记流式细胞法测荧光强度表胞内钙离子浓度[Ca^2+]i及分光光度法测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮(NO)的含量。结果CCVAF(0.625-20μg/mL)剂量依赖性地抑制内皮细胞的生长,IC50=2.45μg/mL。CCVAF与BAVEC共同孵育后,引起细胞间连接减少,细胞F-actin分布混乱;细胞上清液中LDH活力及NO的含量及胞内[Ca^2+]i分别增加。结论CCVAF抑制BAVEC增殖,可能与CCVAF导致细胞骨架改变,LDH及NO分泌量及胞内Ca^2+浓度增加等生化机制有关。
- 朱柳余清声袁牧刘新艳王桂平余红娥楼晓华滕脉坤
- 关键词:蛇毒中华眼镜蛇毒内皮
- 眼镜蛇毒M组分对兔血小板聚集的影响及其机制研究被引量:2
- 2000年
- 余清声陈华朱柳孙林光黄韶玲
- 关键词:血小板聚集