钟乐
- 作品数：31 被引量：274H指数：10
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经干细胞移植对缺氧缺血新生大鼠感觉运动机能的影响被引量：14
- 2005年
- 目的研究神经干细胞(NSCs)移植对改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后感觉运动障碍的作用。方法7d龄新生SD大鼠,随机分为假手术组,HIBD组和脑内移植组,后两组HIBD损伤后3d分别在左侧感觉运动皮质区植入BrdU标记的NSCs或培养基作为对照,观察植入4周后大鼠感觉运动功能的变化和移植细胞在脑内的存活和分化情况。结果与HIBD组比较,移植组在T迷宫和四项感觉运动功能测试中,表现出明显的改善。在T迷宫中,自发改变率[(69.23±13.34)%vs(45.00±27.27)%](P<0.05)上升;在握持牵引试验中,握持时间明显延长[(49.15±13.39)svs(27.20±15.18)s](P<0.05);在肢体放置和足错误试验中的不对称性消失,姿势反射也明显改善(P<0.05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周,在脑内可见存活的NSCs分布于移植点附近;BrdU和NF-200免疫荧光双标显示移植后4周NSCs可部分分化为神经元表达NF-200。结论脑内移植NSCs对HIBD新生大鼠的感觉运动机能和行为的恢复有良好的促进作用。
- 王霞杨于嘉余小河钟乐贾延劼
- 关键词：缺氧缺血新生大鼠神经干细胞移植新生SD大鼠BRDU标记感觉运动功能皮质区
- 骨髓基质细胞促进神经干细胞增殖分化被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)对神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法:在体外比较NSCs在单独培养和在BMSCs条件培养液中培养下的分化和增殖情况。结果:应用BMSCs条件培养液培养NSCs,分化的神经元比例较显著高于NSCs单独培养(41.1%±3.2%vs23.3%±16.5%,P<0.05),而分化的星形胶质细胞所占比例显著降低(33.8%±4.9%vs65.0%±10.4%,P<0.01),同时增殖细胞所占比例也显著增高(74.7%±4.7%vs51.4%±12.3%,P<0.01)。结论:BMSCs对NSCs有促进其增殖和向神经元分化的作用。NSCs与BMSCs联合移植可能会增强NSCs移植的抗脑损伤作用。
- 钟乐杨于嘉余小河王霞
- 关键词：骨髓基质细胞神经干细胞细胞增殖细胞分化
- 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的远期行为学测试被引量：24
- 2005年
- 目的目前对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的研究多采用病理学和生化指标,而缺乏功能评价手段。该研究对新生大鼠HIBD后的行为学改变及其测定方法进行探讨,为新生大鼠HIBD的研究提供功能评价的方法。方法24只7日龄新生SD大鼠随机分为对照组(n=12)和HIBD组(n=12),HIBD组大鼠予以缺氧缺血,对照组大鼠仅予以假手术。生后3周,两组大鼠予以T迷宫测试及感觉运动测试对学习记忆、空间能力和感觉运动功能进行评估。然后处死两组大鼠,取脑组织切片行尼氏染色,计数海马DG区和皮层区单位面积神经元的数目,并对行为学和组织学的结果进行相关分析。结果在行为测试中,HIBD组大鼠的成绩显著低于正常鼠。在T迷宫测试中,两组在第3,4d的正确率有显著差异(P=0.049,P<0.001),HIBD组的正确率(68.3%±26.2%,66.7%±15.6%)显著低于对照组(86.7%±15.6%,98.3%±5.7%)。在感觉运动测试中,与正常鼠比较,HIBD鼠在足错误和肢体放置测试中表现出左右运动的不对称(均P<0.001),姿势反射也显示出了运动功能异常(P=0.032)。缺氧缺血导致了神经元损伤,使海马DG区(39.7±5.9vs50.9±4.1,P<0.001)和皮层单位面积内神经元(12.7±3.3vs18.2±3.3,P<0.001)数目显著减少。但行为学测试结果与组织学改变无相关性。结论新生鼠缺氧缺血会造成远期学习记忆,空间能力和感觉运动功能障碍,T迷宫测试和三项感觉运动测试可以作为大鼠HIBD模型的评价指标。
- 钟乐王霞余小河杨于嘉
- 关键词：行为学
- HRE.ppET-1调控血管内皮生长因子基因在内皮细胞的靶向性表达被引量：1
- 2008年
- 试图探讨缺氧反应元件(hypoxia-responsive element,HRE)增强人前内皮素原-1基因(human preproendothelin-1,ppET-1)启动子在缺氧条件下靶向调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因在内皮细胞中的表达,以提高基因治疗的效果.构建真核表达载体pEGFP-HRE.ppET-1,pcDNA3.1-VEGF+Pa(VA),pcDNA3.1-ppET-1+VEGF+Pa(PVA),pcDNA3.1-HRE.ppET-1+VEGF+Pa(HPVA),脂质体转染离体培养的脐静脉内皮细胞(HUVEC)和肝细胞,荧光显微镜下观察GFP表达,验证HRE.ppET-1调控元件在内皮细胞中的特异性.培养基中加入100μmol/L的氯化钴模拟细胞体外缺氧环境.载体转染后,RT-PCR和Western blot半定量分别检测各载体VEGFmRNA和蛋白水平在常氧及缺氧条件下的表达差异.应用Elisa定量检测细胞上清VEGF蛋白的表达量,分析各载体的表达水平.使用MTT实验检测细胞增殖率.GFP的表达显示HRE.ppET-1调控元件在内皮细胞中可有效转录外源基因,在非内皮细胞中表达极弱.RT-PCR,Western Blot及Elisa的检测结果均表明缺氧条件下HPVA组以及PVA组中,VEGF的表达均较常氧条件下增强(P<0.05).MTT实验检测显示HPVA转染的缺氧条件下的HUVEC增殖率超过其常氧未转染对照组.结果显示,HRE.ppET-1调控元件具有内皮细胞表达特异性,并能在缺氧条件下显著提高VEGF的表达,刺激内皮细胞的增殖,为进一步开展内皮细胞的靶向基因治疗研究奠定良好基础.
- 郑湘榕张珊珊杨于嘉王霞钟乐余小河
- 关键词：缺氧反应元件血管内皮生长因子内皮细胞
- Vanderbilt父母评定量表在注意缺陷多动障碍诊断中的应用被引量：4
- 2013年
- 目的本研究探讨了Vanderbilt父母评定量表(VADPRS)在注意缺陷多动障碍(ADHD)中的诊断价值。方法 319名疑诊为ADHD的儿童由父母完成VADPRS,同时由专科医师根据美国精神病学会《精神障碍诊断和统计手册》第四版(DSM-Ⅳ)标准进行诊断,最终诊断ADHD患儿196名。ROC曲线分析VADPRS诊断注意缺陷和多动冲动的价值,并计算最佳诊断界值的各诊断评价指标。计算Kappa系数,分析VADPRS各条目与DSM-Ⅳ诊断标准中对应条目的一致性。结果 VADPRS诊断注意缺陷的ROC曲线下面积为0.791,最佳诊断界值时敏感性为0.83,特异性为0.63,阳性预测值为0.69,阴性预测值为0.79;VADPRS诊断多动冲动的ROC曲线下面积为0.855,最佳诊断界值时敏感性为0.82,特异性为0.76,阳性预测值为0.65,阴性预测值为0.88。根据本研究结果推算出此量表人群筛查时阴性预测值为0.99。对Vanderbilt父母评定量表各症状条目与DSM-Ⅳ标准对应症状进行一致性分析发现大部分条目Kappa值小于0.40,一致性较差。结论 VADPRS有较好的诊断价值,适用于人群筛查ADHD患者和临床协助诊断。但是量表结果受家长对于孩子行为的了解和认知影响,不能替代专业人员的访谈和判断。
- 肖朝华王庆红罗甜甜钟乐
- 关键词：注意缺陷多动障碍儿童
- Vanderbilt父母评定量表在注意缺陷多动障碍转诊患儿中的应用
- 目的：本研究探讨了Vanderbilt父母评定量表(VADPRS)在注意缺陷多动障碍(ADHD)转诊儿童中的诊断价值.方法：319名疑诊为ADHD的转诊儿童由父母完成VADPRS,同时由专科医师根据美国精神病学会《精神障...
- 肖朝华王庆红罗甜甜钟乐
- 关键词：注意缺陷多动障碍儿童患者
- 黄芩甙诱导大鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究被引量：59
- 2002年
- 目的 探讨中药单体黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞的可行性。方法 以黄芩甙作为主要诱导剂 ,诱导成年大鼠骨髓基质细胞 6d。采用免疫细胞化学染色、蛋白质印迹 (WesternBlot)、逆转录PCR(RT PCR)法检测神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA的表达 ;原位末端标记染色评价细胞凋亡率 ;绿色荧光蛋白转染后 ,进行同种异体脑移植 ,观察诱导后细胞在脑内存活情况。结果 黄芩甙诱导 6d后 ,骨髓基质细胞形成较典型的神经细胞形态。诱导前骨髓基质细胞不表达神经细胞、胶质细胞标记蛋白和mRNA ;诱导 6h ,nestin出现暂时表达 ,诱导 6d表达神经细胞标记蛋白和mRNA ,不表达胶质细胞标记蛋白和mRNA。细胞凋亡率为 12 2 %± 2 8%。同种异体脑移植 14d ,移植物存活良好。结论 黄芩甙可以定向诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞。
- 贾延劼杨于嘉周燕宋元宗刘丽旭宋建辉王霞钟乐余小河
- 关键词：黄芩甙骨髓细胞细胞分化神经细胞诱导剂
- 新生儿溶血病患儿血浆组织因子和组织因子途径抑制物含量的变化
- 组织因子(tissue factor,TF)即凝血因子Ⅲ,是启动凝血途径的重要因子。组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor TFPI)是近十余年来发现的生理性抗凝物质,对TF诱...
- 岳少杰钟乐何晓凡杨于嘉姜玲贺石林李俊成
- 关键词：新生儿溶血病组织因子途径抑制物
- 文献传递
- 新生儿感染性黄疸血浆组织因子和组织因子途径抑制物含量的变化被引量：5
- 2003年
- 目的 探讨新生儿感染性黄疸患儿血浆组织因子 (TF)和组织因子途径抑制物 (TFPI)含量的变化及其意义。方法 运用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 8例非感染性高胆红素血症新生儿 (对照组 )及 2 1例感染性黄疸新生儿 (感染组 )血浆TF和TFPI水平。结果 感染组的血浆TFPI含量和TF含量显著高于对照组 [TFPI( 2 1 0± 4 3 )、( 16 2± 1 9) μg/L ,P <0 0 1;TF ( 177± 79)、( 5 1± 2 4)ng/L ,P <0 0 1];TFPI/TF比值显著低于对照组 ( 13 7± 61、3 19± 67,P <0 0 1)。根据患儿血清胆红素 (SB)浓度 ,将 2 1例感染性黄疸新生儿分为胆红素重度增高感染组 (SB≥ 2 0 5 2 μmol/L ,n =10 )和胆红素轻度增高感染组 (SB <2 0 5 2 μmol/L ,n =11) ,两组间TFPI水平差异无显著性 (P >0 0 5 )。胆红素重度增高感染组TF水平高于胆红素轻度增高感染组 [( 2 16± 79)、( 141± 63 )ng/L ,P <0 0 1],而TFPI/TF低于胆红素轻度增高感染组 ( 10 0± 3 0、171± 74,P <0 0 1)。结论 感染可引起新生儿体内抗凝与促凝作用的平衡失调。黄疸可提高血浆TF水平 。
- 岳少杰钟乐何晓凡杨于嘉姜玲贺石林李俊成
- 关键词：新生儿黄疸凝血致活酶脂蛋白类
- 神经干细胞移植对HIBD新生大鼠学习记忆的影响被引量：15
- 2005年
- 目的:探讨脑内移植胚鼠神经干细胞(NSCs)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆的影响。方法:分离孕龄14d的Sprague-Dawley(SD)大鼠胚胎前脑皮质,采用无血清悬浮培养的方法获得细胞克隆;7d龄新生大鼠随机分为假手术组(n=10)、HIBD组(n=11)和移植组(n=13),后两组结扎左侧颈总动脉联合8%氧吸入制作HIBD模型,损伤后3d利用立体定位仪分别在左侧海马区植入培养基作为对照或BrdU标记的NSCs,观察植入4周后大鼠学习记忆功能的恢复情况。计数海马CA1区正常神经元,间接免疫荧光法观察移植细胞在脑内的存活、迁移情况。结果:在放射形迷宫测试中,移植组较对照组表现出明显的改善,觅水时间缩短(61·40s±24·83svs89·32s±31·52s),错误次数(2·65±0·57vs3·78±0·41)及重复次数明显减少(0·32±0·43vs0·81±0·47)(P<0·05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周,在脑内可见存活的NSCs在海马内广泛分布;尼氏染色显示移植可明显减少海马CA1区的细胞丢失。结论:脑内移植胚鼠NSCs对HIBD新生大鼠的学习记忆恢复有良好的促进作用。
- 王霞杨于嘉余小河钟乐贾延劼
- 关键词：干细胞移植记忆障碍
