罗凌惠
- 作品数：36 被引量：113H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子和环氧化酶-2 mRNA检测被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和环氧化酶(COX-2)mRNA的表达情况及与癌组织生长、浸润及转移的关系。方法:应用RT-PCR方法检测62例喉鳞状细胞癌、54例癌旁和9例正常喉黏膜组织中VEGF mRNA及COX-2 mRNA的表达。结果:喉鳞癌组织中VEGF mRNA和COX-2 mRNA的表达量高于癌旁和正常喉黏膜组织(P<0.01),Ⅰ、Ⅱ期喉鳞癌组织2者的表达量低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.01)。喉鳞癌组织中VEGF mRNA和COX-2 mRNA的表达呈正相关(r=0.756,P<0.01)。结论:VEGF和COX-2与喉鳞癌的生长、浸润及转移有密切关系,2者有协同作用。
- 陈广理龚树生刘英鹏王建亭罗凌惠陈沛鄢开胜
- 关键词：喉肿瘤鳞状细胞癌
- 螺旋神经节细胞无血清培养方法的研究被引量：11
- 2006年
- 目的:通过对比不同培养条件下螺旋神经节细胞(SGCs)的生长特性,从而确定一种可以获得足够数量和纯度的SGCs体外培养的最佳方法。方法:采用出生3d内的SD大鼠,取螺旋神经节组织,观察有血清培养基及无血清培养基,加或不加阿糖胞苷(Ara-C)对体外培养SGCs纯度及活性的影响。免疫组织化学鉴定培养的螺旋神经节细胞。结果:使用DMEM/F12培养基及B27添加剂,联合5μmol/L Ara-C作用48h,能有效抑制非神经细胞增殖,得到比较纯的SGCs。通过hochest33258及PI双标,发现Ara-C对SGCs毒性较小。得到的细胞经免疫组织化学抗神经丝蛋白抗体证实为SGCs。结论:本实验建立的方法,所获得的SGCs纯度较高,细胞活性保持良好,为体外研究外周听觉系统疾病提供了重要方法。
- 罗凌惠龚树生宋鹏鄢开胜
- 关键词：螺旋神经节神经元原代培养
- 腺病毒介导Bcl-2基因对原代螺旋神经节细胞存活的促进作用被引量：3
- 2008年
- 目的研究外源性细胞凋亡相关基因Bcl-2对原代培养的螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGCs)存活及突起生长的影响,以期找到保护SGCs的有效方法。方法大鼠螺旋神经节细胞原代培养,免疫印迹法(western blot)检测转染AdEasy系统构建携带Bcl-2和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)的腺病毒后SGCs表达Bcl-2蛋白的水平。免疫细胞组织化学染色鉴定螺旋神经节细胞,计数SGCs的数目。结果AdEGFP/Bcl-2组SGCs的存活数目分别高于AdEGFP组及空白对照组,AdEGFP组的存活SGCs细胞数略少于空白对照组。结论Bcl-2蛋白能促进体外SGCs细胞存活,腺病毒本身有轻微的细胞毒性,但表达外源性Bcl-2基因却可以保护SGCs不受腺病毒细胞毒性损害。
- 罗凌惠龚树生
- 关键词：基因,BCL-2螺旋神经节
- 谷氨酸对体外培养螺旋神经节细胞的损伤作用被引量：5
- 2006年
- 目的:探讨谷氨酸对体外原代培养的大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(SGC)兴奋性毒性作用。方法:SGC在体外培养4d,加入1mmol/L谷氨酸,继续培养24h后,用荧光显微镜观察Annexin-V-FITC和PI双标的细胞形态改变,以及用激光共聚焦方法观察细胞内游离钙离子浓度的变化。结果:体外培养4d的SGC,用1mmol/L谷氨酸处理24h后,与对照组相比,出现大量的细胞受损,表现为死亡或凋亡(P<0.05);用Fluo-3染色,激光共聚焦显微镜观察,加入谷氨酸后,80%的SGC细胞内钙离子迅速增加,150s达到高峰。结论:谷氨酸诱导的SGC钙离子内流与细胞受损有明显的关系。
- 鄢开胜薛秋红罗凌惠龚树生
- 关键词：谷氨酸细胞培养螺旋神经节细胞
- Hep-2细胞中bFGF及其双受体系统mRNA的表达
- 2010年
- 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其双受体系统串珠素(perlecan)和高亲和力酪氨酸激酶受体(FGFR)在人喉癌细胞Hep-2中的表达。方法:培养Hep-2和正常永生化表皮细胞系HaCaT细胞,应用RT-PCR方法检测bFGF、perlecan及FGFR1～4 mRNA的表达。结果:bFGF、perlecan、FGFR1、FGFR2及FGFR4 mRNA在Hep-2细胞中的相对表达量高于HaCaT细胞(t分别为17.540、19.684、13.371、12.692和12.586,P均<0.05)。2种细胞中均未检测到FGFR3 mRNA。结论:bFGF、perlecan及FGFR与喉癌细胞的生长关系密切。
- 陈广理龚树生陈沛罗凌惠
- 关键词：HEP-2细胞碱性成纤维细胞生长因子串珠素喉癌
- 内质网应激在老年大鼠耳蜗细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨内质网应激在老年大鼠耳蜗细胞凋亡中的作用,从而进一步探索老年性聋的发病机制。方法Wistar大鼠24只,其中12只为对照组(3～4月龄),12只为自然衰老组(22～24月龄);比色法测定内耳组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialchehyche,MDA)水平;ABR检测听力学改变;免疫组化及western blot检测GRP78/BiP和Caspase-12蛋白的表达。结果老年大鼠听力下降;内耳组织SOD活性降低,MDA升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);耳蜗切片中及western blot结果可见GRP78的表达与对照组相比差异无统计学意义(P<0.05);caspase-12的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论内质网凋亡途径是老年大鼠老年性聋的发生机制之一。
- 谢静罗凌惠薛秋红龚树生
- 关键词：老年性聋内质网应激细胞凋亡
- 内质网分子伴侣GRP78在拟老化大鼠耳蜗中变化的研究被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨内质网分子伴侣GRP78在拟老化大鼠耳蜗中的变化,研究老年性聋的发病机制。方法:Wistar大鼠24只,随机分为对照组与模型组,每组12只。对照组每日生理盐水1ml皮下注射,模型组10%D-半乳糖颈部皮下注射(800mg·kg-1.d-1),时间均为8周。用Morris水迷宫检测2组动物空间学习记忆能力;比色法测定内耳组织膜迷路中超氧化物岐化酶及丙二醛的水平;ABR检测听力学改变,免疫组织化学、RT-PCR及Westernblot检测内质网分子伴侣GRP78的表达。结果:模型组动物有空间记忆障碍伴随超氧化物岐化酶活性降低,丙二醛升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);模型组听力学改变与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);模型组动物的内耳组织GRP78含量在分子及蛋白表达水平均明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在D-半乳糖制备亚急性衰老动物模型的过程中,内耳组织氧化-抗氧化平衡被破坏;内质网分子伴侣GRP78在拟老化大鼠耳蜗组织中有明显变化,推测其参与了内耳损伤的过程。
- 谢静罗凌惠薛秋红李欣龚树生
- 关键词：内耳内质网分子伴侣凋亡
- 细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用
- 2007年
- 目的通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒。方法质粒pAdTrack酶切线性化后,通过电转化方法转化AdEasier细菌,线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒,观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒对培养细胞生长的影响。结果构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确;扩增的腺病毒转染培养的Hep-2细胞8 h后即开始表达报告基因,48 h后全部细胞均有报告基因表达;该重组的腺病毒对培养Hep-2细胞生长无明显影响。结论通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒,方法简单、成功率高、实验周期短。
- 刘英鹏田蕾王国鹏王建亭李泽文罗凌惠龚树生
- 关键词：腺病毒载体基因转移
- 大鼠面神经损伤修复晚期面神经核的基因表达谱
- 2016年
- 目的:筛选外周损伤修复晚期面神经核区的差异表达基因。方法:建立大鼠面神经断伤吻合模型,90 d后准确解剖定位获取健患两侧面神经核组织的总RNA,再以其逆转录的c DNA为模板转录生成生物素标记的c RNA,纯化与片段化后形成探针并与大鼠基因表达谱芯片杂交,扫描仪检测信号后用生物学分析软件筛选差异表达基因并作初步功能分析。结果:基因芯片检测表明,患侧面神经核区检出1 660个基因,健侧检出1 683个基因,与健侧相比筛选出差异基因300个,其中上调157个(差异倍数≥2),下调143个(差异倍数≤-2)。GO分析电子功能注释发现,差异基因功能涉及代谢反应、细胞黏附、细胞因子、信号传递等。KEGG信号通路分析筛选出最可能相关的信号通路32个(P<0.05),包括白细胞跨膜转运、黏着斑激酶途径等。结论:基因表达谱分析表明多基因、多信号通路参与外周损伤修复晚期面神经核内的塑形活动。
- 陈沛宋俊李春丽张鄂罗凌惠肖红俊龚树生
- 关键词：面神经核基因芯片
- 血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子在喉癌细胞Hep-2中的表达被引量：3
- 2006年
- 目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)在喉癌细胞Hep-2中的表达,及其与喉癌细胞生长、浸润及转移的关系。方法培养Hep-2和正常永生化表皮细胞HaCaT,提取总细胞RNA,应用逆转录聚合酶链反应检测VEGF mRNA和bFGF mRNA在Hep-2和HaCaT细胞中的表达。结果VEGF mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸光度值为(0.839±0.063);VEGF mRNA在HaCaT细胞中低表达,平均相对积分吸光度值为(0.305±0.066),差异有极显著性意义(t=14.94,P<0.01)。bFGF mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸光度值为(0.792±0.058);bFGF mRNA在HaCaT细胞中低表达,平均相对积分吸光度值为(0.296±0.049),差异有极显著性意义(t=17.54,P<0.01)。结论VEGF及bFGF与喉癌细胞的生长、浸润及转移有密切关系。
- 陈广理龚树生罗凌惠丁娟刘英鹏鄢开胜陈沛
- 关键词：血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子喉癌HEP-2细胞逆转录聚合酶链反应
