邹锋
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 毛囊生物学特性的某些研究进展被引量：8
- 2006年
- 邹锋郝飞
- 关键词：毛囊干细胞生物学特性毛乳头细胞自我更新CELL
- HSPCO16重组蛋白对毛乳头细胞增殖的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察HSPCO16重组蛋白对培养的低/高传代毛乳头细胞(DPC)的影响。方法消化对数期生长的第2代和第7代DPC,调整细胞浓度为3×105细胞/mL,接种于24孔细胞培养板;至对数生长期时加入HSPCO16重组蛋白,调整浓度为0.1mg/mL继续培养,倒置显微镜下定期观察;一组细胞采用流式细胞仪进行检测;另一组细胞内加入3H-TdR继续孵育6h,消化收集细胞,检测HSPCO16重组蛋白对DPC增殖的影响。结果HSPCO16重组蛋白处理的DPC增殖活跃,生长状态明显好于对照组;流式细胞仪分析和3H-TdR掺入试验均证实重组HSPCO16蛋白可促进第8代DPC的增殖及其DNA合成,而对第3代DPC则无明显作用。结论HSPCO16重组蛋白具有促进高传代DPC增殖的作用,可能是一种新的促进毛囊生长蛋白。
- 夏汝山郝飞尹锐宋志强邹锋钟白玉
- 关键词：流式细胞仪^3H-TDR掺入
- 抗人毛乳头细胞造血干细胞016基因多克隆抗体的制备
- 2006年
- 目的:在大肠杆菌中重组表达人毛乳头细胞造血干细胞(HSPC)016基因功能序列,制备特异性多克隆抗体。方法:采用PCR技术从pcDNA3.1(+)/HSPC016中扩增出目的基因克隆至pMD18-T载体,酶切回收目的片段连接至表达载体pET-28a(+)。重组质粒经酶切及测序鉴定后转化工程菌E.coliBL21,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对目的蛋白N-端氨基酸测序鉴定后免疫日本大耳白兔,制备兔抗HSPC016多抗血清,以双向免疫扩散、ELISA、Westernblotting检测抗体效价及特异性。结果:在大肠杆菌中高效表达了相对分子质量约7200的HSPC016蛋白,目的蛋白N-端氨基酸测序结果与预期序列完全一致。双向免疫扩散显示兔抗HSPC016多克隆抗体效价为1∶16;ELISA分析兔抗HSPC016血清的滴度可达320000EU;Westernblotting显示抗血清可与原核表达的HSPC016蛋白特异结合。结论:成功制备了兔抗HSPC016多抗血清,为进一步研究HSPC016蛋白的结构与生物学意义奠定了基础。
- 邹锋郝飞宋志强易勇翟志芳邹全明叶庆佾
- 关键词：人毛乳头细胞原核表达抗体
- HSPC016的表达、纯化与生物学活性分析
- 2007年
- 目的:测定大肠杆菌中造血干细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPC)016融合蛋白的表达,纯化及其生物学活性。方法:采用PCR技术从pET-28a(+)/HSPC016中扩增出目的基因HSPC016重组到质粒pET-22b(+)中,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍离子亲和层析和分子筛法纯化;用胰蛋白酶消化对数期生长的第3代和第9代DPC,细胞记数法记录生长曲线。结果:原核表达载体pET-22b(+)/HSPC016在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白表达率约28%,纯化后纯度达95%以上;经重组蛋白处理的DPC增殖活跃;细胞记数结果初步证实HSPC016重组蛋白能促进第9代DPC的增殖及其DNA合成,对第3代DPC无明显作用。结论:HSPC016基因在大肠杆菌中得到了高效表达;HSPC016重组蛋白具有促进高传代DPC增殖的作用。
- 邹锋郝飞易勇邹全明宋志强杨希川叶庆佾
- 关键词：生物学活性
- 基因工程制备人毛乳头细胞HSPC016蛋白质的方法、表达载体和工程菌
- 本法发明涉及一种基因工程人毛乳头细胞HSPC016基因的表达载体，该载体为含有人毛乳头细胞HSPC016基因功能序列的质粒pET－22b(+)，HSPC016编码序列位于pET－22b(+)载体上Nde I和Xho I酶...
- 郝飞邹锋宋志强
- 文献传递
- 层板状鱼鳞病1例
- 患儿男,3岁。因全身反复弥漫性红斑、鳞屑3年于2007年10月21日来我院就诊。患儿出生时全身可见轻度弥漫性红斑,出生约5天后皮肤逐渐干燥,伴类似胡豆皮的鳞屑,棕褐色,鳞屑反复自然脱落、生长,广泛分布于面、颈、躯干、四肢...
- 邹锋郝飞宋志强杨希川钟白玉叶庆佾
- 关键词：皮肤组织病理
- 文献传递
- 获得性大疱性表皮松解症1例被引量：3
- 2004年
- 获得性大疱性表皮松解症(epidermolysis buuosa acquisita,EBA)是一种自身免疫性表皮下大疱病,以摩擦或外伤部位出现张力性水疱及血清内存在高滴度胶原自身抗体为基本特征,本病临床较少见,且临床表现和其他大疱性皮肤病类似,较易引起误诊.现将本科诊治的1例报告如下.
- 郝进阎衡邓军郝飞叶庆佾邹锋
- 关键词：表皮松解症大疱性获得性
- 人毛乳头细胞HSPC016基因在大肠杆菌中的表达和鉴定
- 2005年
- 目的构建人毛乳头细胞HSPC016基因的原核表达载体,诱导其表达并对目的蛋白基本生物学特性进行鉴定。方法采用PCR技术从pcDNA3.1(+)/HSPC016中扩增出195bp目的基因,克隆至pMD18-T载体,双酶切回收纯化目的片段后连接至同样酶切回收的表达载体pET-28a(+)质粒中。重组质粒经酶切及测序鉴定后转化工程菌E.coliBL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,UVP图像扫描分析并对目的蛋白进行N-端氨基酸测序鉴定。结果采用PCR技术成功地从pcDNA3.1(+)/HSPC016中扩增出195bp目的基因,序列分析显示HSPC016基因ORF由195bp组成并与GenBank公布序列完全一致。原核表达载体pET-28a(+)/HSPC016转化工程菌E.coliBL21并经诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定:目的蛋白Mr约为7200,与理论预测值相吻合;UVP扫描表明目的蛋白表达率约20%。N-端氨基酸测序结果与预期序列完全一致。结论HSPC016基因能通过原核载体pET-28a(+)及工程菌E.coliBL21进行高效、正确地表达,为研究HSPC016基因表达的生物学意义奠定了基础。
- 邹锋郝飞宋志强易勇郝进钟华叶庆佾
- 关键词：毛乳头细胞原核表达
- 人毛乳头细胞HSPC016基因在毕赤酵母中的表达和鉴定
- 2005年
- 目的构建人毛乳头细胞HSPC016基因的真核表达载体,诱导其表达并对目的蛋白基本生物学特性进行鉴定。方法用PCR从pET-28a(+)/HSPC016中扩增出195bp目的基因,克隆至酵母表达载体pPIC9K质粒,经酶切鉴定后转化毕赤酵母菌GS115,G418-YPD平板筛选高拷贝转化子,甲醇诱导表达后进行Westernblot检测和目的蛋白N-端氨基酸测序鉴定。结果用PCR成功扩增出目的基因;pPIC9K/HSPC016转化GS115用G418-YPD平板筛选高拷贝转化子,甲醇诱导后,SDS-PAGE电泳鉴定:目的蛋白相对分子量约为7·2×103,与理论预测值相吻合;UVP扫描表明目的蛋白表达率约18%;Westernblot检测具有良好的免疫反应性;N-端氨基酸测序结果与预期序列完全一致。结论HSPC016基因能通过酵母表达载体pPIC9K及宿主菌GS115进行高效、正确地表达,为研究HSPC016基因在真核细胞水平表达的生物学意义奠定了基础。
- 邹锋郝飞宋志强易勇杨希川杨斌叶庆佾
- 关键词：毛乳头细胞
- HSPC016基因重组工程菌发酵研究被引量：7
- 2005年
- 目的 研究人毛乳头细胞HSPC0 16基因重组工程菌的发酵工艺。方法 采用德国B Brau公司C 10型5L发酵罐批次发酵,通过对能影响工程菌生长和目的蛋白表达的条件如不同培养基、不同葡萄糖浓度、营养物补充、pH及溶氧调节等进行优化,确定合适的培养条件和发酵工艺。结果 在优化条件下,菌体单产可达45 g/L ,目的蛋白表达量约占总蛋白的18%。结论 此发酵工艺可以提高人毛乳头细胞HSPC0 16/pET 2 8a(+ )基因重组工程菌的收获和目的蛋白表达。
- 邹锋郝飞宋志强易勇郝进钟华叶庆佾
- 关键词：人毛乳头细胞发酵大肠杆菌
