原梅
- 作品数：31 被引量：98H指数：7
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- LC-MS法检测beagle犬血浆中SP-8的方法学及动力学研究
- 目的:建立专一、灵敏的LC-MS法测定beagle犬血浆中SP-8的浓度以及考察食物对SP8吸收的影响。方法:血浆样品用乙腈沉淀,内标选用甲苯磺丁脲,液相色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C(3.5μm,100...
- 张帆乔建忠原梅王晓英张振清阮金秀
- 关键词：药代动力学LC-MS
- 文献传递
- 决明子水提液对大鼠肝脏CYP450酶的影响被引量：11
- 2016年
- 该文研究决明子水提液对大鼠肝脏CYP450酶酶活性、mRNA及蛋白表达水平的影响。取SD大鼠,口服灌胃受试药物后,处死,用冰冷生理盐水灌流肝脏,提取大鼠肝脏微粒体、肝脏总RNA和总蛋白,采用Cocktail体外孵育法结合液质联用(LCMS)技术对大鼠肝脏中CYP1A2,2B1,2C11,2D2,2E1,3A1各亚酶的酶活性进行测定,并应用荧光定量PCR技术和Western blot对上述亚型的mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果表明,酶活性方面,决明子水提液组与空白组比较可明显诱导CYP1A2,2B1,2C11,2D2,2E1,3A1的酶活性,其中决明子低剂量组对CYP2D2有明显的抑制作用,中、高剂量组对CYP2D2有明显的诱导作用,且都呈剂量依赖性增加,但对CYP3A1的诱导不呈剂量依赖性;mRNA表达方面,决明子水提液对CYP1A2,2C11,2D2,2E1mRNA的表达具有显著诱导作用,其中对CYP1A2,2D2,2E1诱导作用呈剂量依赖性,与酶活性水平具有一致性,对CYP2B1,3A1没有明显作用;蛋白表达方面,决明子水提液对CYP2C11,2E1的表达也具有诱导作用,但没有统计学差异。决明子水提液对CYP450同工酶不同程度诱导或抑制作用,特别是对于CYP2C11,2E1亚型酶,酶活性与mRNA,蛋白表达水平具有一致性,提示当与这些酶底物合并用药时,尤其是与CYP2C11,2E1代谢有关的药物合用时,应充分考虑到潜在的有益和不利的药物相互作用。
- 许龙龙汤响林马增春王宇光梁乾德谭洪玲肖成荣李桦原梅高月
- 关键词：细胞色素P450酶荧光定量PCR技术BLOT
- LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的左旋紫堇达明及其药代动力学研究
- 2016年
- 目的建立快速、灵敏的LC-MS/MS分析方法定量测定大鼠血浆中左旋紫堇达明（L-CDL）的浓度,经系统方法学验证后,应用于该药的大鼠药代动力学研究。方法以普萘洛尔为内标,以水（含0.1%甲酸与5 mmol/L的甲酸铵）和乙腈（含0.1%甲酸）为流动相,血浆样品中的L-CDL和内标经C18（2.1 mm×750 mm,3μm）柱分离后,质谱电喷雾离子化源（ESI）正离子多反应监测（MRM）方式分别对离子对m/z 342？192.1和m/z 260？116.2进行检测。方法验证包括专属性、标准曲线与定量下限、批内和批间精密度、准确度、基质效应、提取回收率、稳定性。结果 L-CDL在大鼠血浆样品的定量线性范围为15000 ng/ml,最低定量下限为1 ng/ml,批内和批间精密度（RSD）〈10%,回收率93.5%102.8%,基质效应108.3%112.5%。大鼠经胃给予LCDL 10 mg/kg后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC0-24分别为：（557.8±330.1）ng/ml、（7.04±3.93）h、（2408±630）h·ng/ml。结论建立的LC-MS/MS方法简便、快速、灵敏,适用于L-CDL在大鼠体内的药代动力学研究。
- 刘帅原梅米桂芸高赟赟杨红菊李桦杨征
- 关键词：LC-MS/MS药代动力学
- 补骨脂素和异补骨脂素对体外细胞色素P450酶活性的抑制和诱导作用被引量：18
- 2012年
- 目的探讨补骨脂素(PSO)和异补骨脂素(IPSO)对细胞色素P450(CYP)活性的抑制和诱导作用。方法将人肝微粒体或鼠肝微粒体与PSO或IPSO以及CYP特异性探针底物共孵育30 min,分别以非那西丁O-脱乙基、甲苯磺丁脲4-羟基化、美芬妥因-4-羟基化、右美沙芬O-脱甲基化和咪达唑仑1'-羟基化为同工酶CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6(大鼠2D2)和CYP3A4(大鼠3A1/2)代谢活性的标志,用HPLC-MS/MS法检测相应代谢产物的生成量并计算相应的IC50值,评价PSO和IPSO对5种CYP同工酶的潜在抑制作用。将PSO和IPSO或阳性诱导剂与"三明治"培养大鼠肝原代细胞共孵育72 h后,再加入CYP探针底物孵育1 h,检测相应代谢产物的生成量,与阳性诱导剂组比较,评价二者对CYP1A和CYP3A的诱导作用。结果 PSO和IPSO对人肝微粒体和鼠肝微粒体的CYP1A2均有较强的抑制作用,在人肝微粒体中的IC50值分别为0.17和0.13μmol·L-1;在鼠肝微粒体中的IC50值分别为0.47和0.36μmol·L-1。二者对人肝微粒体的CYP2D6也有中等强度的抑制作用,IC50值分别为3.59和9.51μmol·L-1。PSO和IPSO 100μmol·L-1可分别将大鼠肝细胞的CYP3A活性提高1.18和0.96倍,有一定的诱导作用。结论 PSO和IPSO能显著抑制CYP1A2酶活性,对CYP3A有一定的诱导作用。
- 钟玉环沈国林原梅刘万卉李桦
- 关键词：异补骨脂素药物相互作用微粒体
- 芍药苷的体外代谢性质被引量：8
- 2013年
- 目的研究芍药苷在人和大鼠肝微粒体,以及大鼠原代肝细胞中的代谢特征,确定芍药苷的Ⅰ相代谢酶表型。方法将芍药苷与人、大鼠肝微粒体或大鼠肝细胞在37℃孵育,应用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定孵育液中的芍药苷含量,考察芍药苷的代谢稳定性。将芍药苷与重组人源细胞色素P450酶(CYP)中CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6和3A4孵育,并在人肝微粒体中将芍药苷与各同工酶的特异性抑制剂共孵育,确定其代谢酶表型。结果在人和大鼠肝微粒体中,芍药苷均发生依赖于NADPH的Ⅰ相代谢消除,60 min的代谢率分别为10.74%和22.76%,半衰期T1/2分别为(88.87±5.32)和(48.47±1.18)min,经外推得到的肝脏清除率分别为(13.13±1.11)和(10.06±1.34)ml/(min·kg)。在加入葡萄糖醛酸转移酶辅酶(UDPGA)的人肝微粒体中,芍药苷不发生代谢转化。在大鼠原代肝细胞中,芍药苷的代谢转化率与肝微粒体相当,T1/2为(77.88±3.93)min。芍药苷是由多个CYP同工酶介导代谢的,CYP2C9、CYP3A4和CYP2C8是主要的代谢酶,用整体归一化法评价其代谢贡献率分别为22.06%、52.47%和25.47%。结论芍药苷在肝微粒体和肝细胞中主要发生多个CYP酶介导的Ⅰ相代谢,主要的代谢表型是CYP2C9、CYP3A4和CYP2C8。
- 谭妍沈国林庄笑梅原梅李桦高月
- 关键词：芍药苷细胞色素P450酶肝微粒体肝细胞代谢
- 超高效液相色谱-质谱联用方法研究罗格列酮和INT131的组织分布特征
- 2015年
- 目的建立定量测定生物样品中罗格列酮和INT131的液-质联用方法,比较两药在C57BL/6肥胖小鼠组织分布的特点。方法建立并验证了定量分析血浆和组织样品中罗格列酮和INT131的LC-MS/MS方法,方法的灵敏度、回收率、准确性和重现性均符合研究要求。C57BL/6肥胖小鼠分别灌胃罗格列酮和INT131,不同时间点采样,测定血浆、皮下白色脂肪、肩胛褐色脂肪、腹内白色脂肪、肝和骨骼肌的药物含量,考察罗格列酮和INT131在C57BL/6肥胖小鼠的组织分布。结果罗格列酮口服后血浆和组织浓度在0.5 h达峰,分布浓度的排序为血浆>腹内白色脂肪>皮下白色脂肪>肝>肩胛褐色脂肪>骨骼肌。INT131给药后,血浆和肝浓度峰值出现在0.5 h,脂肪和骨骼肌药物浓度在4 h达峰,此时的分布浓度排序为腹内白色脂肪>皮下白色脂肪>肩胛褐色脂肪>血浆>肝>骨骼肌。INT131在脂肪的消除较慢,给药后12 h仍维持较高的组织浓度,例如腹内白色脂肪的药物浓度约为血浆的10倍,与罗格列酮相比,INT131在皮下脂肪、褐色脂肪、腹内脂肪、肝和骨骼肌显示了较高的分布浓度。结论与罗格列酮相比,INT131在脂肪、骨骼肌和肝的组织分布靶向性更强,提示INT131的药效学作用可能与其在组织中的特异分布有关。
- 陈琳原梅颉欣妮庄笑梅王莉莉李桦
- 关键词：罗格列酮肥胖小鼠
- 欧前胡素肝微粒体代谢动力学和细胞色素P450代谢表型分析被引量：4
- 2016年
- 目的研究呋喃香豆素活性成分欧前胡素在人和大鼠肝微粒体的代谢稳定性和酶促动力学,并分析细胞色素P450(CYP)酶的代谢表型。方法将欧前胡素分别与人和大鼠肝微粒体在37℃与不同辅酶因子孵育,应用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定孵育液中剩余的欧前胡素含量,分析其代谢稳定性及代谢消除反应类型,并计算酶促动力学参数——米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))。应用重组人源CYP同工酶(CYP1A2,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4)及其特异性抑制剂,确定欧前胡素的CYP酶代谢表型。结果在人和大鼠肝微粒体中,欧前胡素主要依赖于还原性辅酶Ⅱ(NADPH)的Ⅰ相代谢消除,30 min代谢转化率分别为69.7%和94.5%,代谢消除半衰期t1/2分别为18.9±0.6和(2.8±0.4)min,经外推得到的肝清除率(Cl_h)分别是16.9±0.1和(51.9±0.4)m L·min^(-1)·kg^(-1),K_m分别为13.60±0.16和(14.00±0.24)μmol·L^(-1),V_(max)分别为2928±96和(8434±27)nmol·min^(-1)·g^(-1)。欧前胡素在大鼠肝微粒体的消除显著快于人肝微粒体(P<0.01)。欧前胡素在肝微粒体的Ⅰ相代谢是由多个CYP同工酶介导的,经整体归一化法评价得到CYP1A2,CYP2B6,CYP2C19和CYP3A4的代谢贡献率分别为20.4%,7.3%,10.5%和61.8%。结论欧前胡素在肝微粒体中主要发生多个CYP酶介导的Ⅰ相代谢,其中CYP3A4和CYP1A2的贡献率>20%。
- 蹇阳陈琳原梅庄笑梅李桦
- 关键词：欧前胡素肝微粒体细胞色素P450酶代谢
- 化合物及制剂的药代动力学体内快速评价
- 目的:应用药代动力学快速评价体系,比较靶向分子化合物(DHTBP)、不同处方工艺的制剂(SP-8)及系列候选化合物(ZZB-20和ZZB-36)药代动力学行为和体内分布特征,筛选具有预期体内过程和理想药代特性的药物,为靶...
- 原梅阮金秀张振清
- 关键词：生物利用度候选药物制剂
- 文献传递
- 同时定量检测水胺硫磷和水胺氧磷的液相色谱-串联质谱法及应用被引量：1
- 2012年
- 目的建立同时测定大鼠全血中水胺硫磷及其活性代谢产物水胺氧磷的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析方法,用于毒代动力学研究中血药浓度的测定。方法采集大鼠全血样品后即刻用4倍体积冰冷乙腈沉淀蛋白。待测物用Zorbax SB C18柱（2.1 mm×50 mm,1.8μm）分离,以含有0.1%甲酸的水和甲醇为流动相系统进行梯度洗脱。采用ESI源正离子多反应监测模式分析,水胺硫磷、水胺氧磷和内标三唑磷的定量离子对分别为m/z 231→121、274→215和314→162。结果水胺硫磷和水胺氧磷在5μg/L～5 mg/L浓度范围内线性良好,最低定量限为5μg/L,回收率在63.1%～77.8%的范围内,准确度和精密度符合生物样品的检测要求。大鼠静脉注射3 mg/kg水胺硫磷后,水胺硫磷在血中很快下降,消除半衰期为22.2 min。活性代谢产物水胺氧磷的生成也较快,10～15 min达到（257.91±42.00）ng/ml的平均峰值,消除半衰期为17.6 min。水胺硫磷和水胺氧磷的AUC0~t分别为（528.62±49.15）和（191.11±33.23）h.μg/L。结论本研究首次建立了同时定量测定大鼠全血中水胺硫磷和水胺氧磷的LC-MS/MS分析方法,方法的专属性好、灵敏度高,适用于水胺硫磷及水胺氧磷在大鼠体内的毒物代谢动力学研究。
- 魏霞钟玉环原梅谢剑炜李桦
- 关键词：水胺硫磷液相色谱-串联质谱法毒物代谢动力学
- 新型BACE-1抑制剂基于转运体的血脑屏障通透性质评价
- 目的 GS9和V10是非肽类新型BACE-1(β淀粉样蛋白前体裂解酶)抑制剂,药理评价表明具有治疗阿尔茨海默病的良好前景,本研究进一步评价了它们基于转运体的血脑屏障通透性质.方法 应用Caco-2单层细胞模型和表达转运体...
- 原梅庄笑梅曹艳李桦
- 关键词：转运体血脑屏障
