耿风廷
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
- 供职机构：河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河北省生物工程重点学科资助更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人过氧化氢酶基因的克隆与表达被引量：7
- 2007年
- 目的利用基因重组技术在大肠杆菌中高效表达人过氧化氢酶(catalase,CAT)。方法从人cDNA文库中获得CAT编码基因,并利用pMAL-c2x、pBV221质粒分别构建了融合和非融合表达载体并进行了表达和活性检测。结果融合表达与非融合表达均可获得可溶性蛋白质,非融合的表达产物具有CAT活性,而融合表达产物在切除融合蛋白质(MBP)部分后表现出明显的CAT活性。结论从大肠杆菌表达体系能表达具有生物活性的CAT,此项研究为后续重组酶性质的研究和开发利用奠定了基础。
- 耿风廷赵晓瑜高珊
- 关键词：大肠杆菌
- 蚯蚓纤溶酶新基因EfP-0的电子克隆及其编码区序列RT-PCR验证被引量：7
- 2006年
- 利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶F-Ⅰ-0组分的基因。根据从粉正蚓(Lumbricusrubellus)中分离的F-Ⅰ-0组分的N端氨基酸序列VVGGSDTTIGQYPHQL,利用DNAMAN软件通过电子克隆方法,从Lumbricidae的dbEST中获得该组分的核酸序列信息,设计特异引物,经过RT-PCR,成功地从赤子爱胜蚓(Eiseniafoetida)中克隆到一条蚯蚓纤溶酶新基因,命名为EfP-0。EfP-0基因全长678bp,编码225个氨基酸的成熟肽,属丝氨酸蛋白酶,胰蛋白酶家族,与F-Ⅰ-0组分的氨基酸组成非常接近。BLAST证明,EfP-0与已报道的蚯蚓纤溶酶基因之间的相似性均低于40%,因此为蚯蚓纤溶酶中的一个新基因,GenBank登录号为DQ836917。构建的pMAL-c2x-EfP-0重组质粒,在大肠杆菌TB1中获得融合蛋白MBP-EfP-0的可溶性表达,表达产物有酪蛋白平板溶解活性。
- 赵晓瑜高珊崔大岺耿风廷
- 关键词：蚯蚓纤溶酶电子克隆
- 多基因在大肠杆菌中的共表达策略被引量：13
- 2007年
- 多基因共表达在多领域有重要的应用价值,大肠杆菌共表达系统包括多顺反子系统和双质粒系统,两者各有优缺点。多顺反子系统不需外界2种抗生素的同时存在,但操作较为复杂。通常认为,具有相同复制子的质粒是不相容的,但近来的实验表明,在双抗生素的选择压力下,不相容的双质粒系统也能稳定传代,且操作简单,周期较短。双质粒系统已经应用于生产、医学等各个领域。
- 耿风廷赵晓瑜高珊
- 关键词：共表达大肠杆菌多顺反子
- 人过氧化氢酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达
- 生物体在新陈代谢中,细胞有氧呼吸所消耗的O/_2约10/%被还原成H/_2O/_2。后者很容易被细胞中各种还原剂还原成·OH和OH~-,而·OH是极毒的羟自由基,能氧化与它接触的几乎所有细胞组份,引起衰老、癌变及其它病症...
- 耿风廷
- 关键词：大肠杆菌活性测定重组酶
- 文献传递
