张鲲
- 作品数:26 被引量:15H指数:2
- 供职机构:天津大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 含有番茄LeEXP2基因的重组载体及重组菌及LeEXP2基因在重组菌中的表达
- 本发明公开了含有番茄LeEXP2基因的重组载体及重组菌及LeEXP2基因在重组菌中的表达,本发明首先从番茄中克隆了LeEXP2基因;进一步将LeEXP2基因构建至巴斯德毕赤酵母表达载体;通过电转化获得一种含有番茄LeEX...
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- 文献传递
- 运动发酵单胞菌定点整合质粒的构建被引量:1
- 2009年
- 运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种,但其可利用的碳源范围窄.对其进行分子生物学基础研究和基因工程改造的工作早在上世纪八、九十年代就开始了,但基于其独特的生物学特性,至今遗传操作手段仍不成熟.以大肠杆菌(E.coli)pBR328为出发质粒,分段插入带Z.mobilis乳酸脱氢酶基因ldh、分别作为左右同源臂、1.5 kb大小的DNA片段,构建了Z.mobilis定点整合型质粒pBR328-ldhR-ldhL(6 239 bp),此质粒两同源臂片段即ldhR和ldhL的中间有稀有酶切位点NotI和SfiI,以方便插入待整合片段.经NotI位点插入1 216 bp氯霉素抗性基因cml,将相应质粒pBR328-ldhR-cml-ldhL以环型和线型形式分别电击转化Z.mobilis ZM4菌株,都成功筛选到了ZM4 ldh::cml菌株,证明此定点整合质粒是方便可用的,为对Z.mobilis的定点遗传操作提供了很好的基础.
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- 关键词:运动发酵单胞菌
- 基于CPG神经元网络的机械臂运动节律控制方法
- 本发明涉及一种基于CPG神经元网络的机械臂运动节律控制方法,包括下列步骤:(1)上位机设定神经元持续纳电流、钾电流和泄漏电流对应的电导率和反电势参数,以及变阈值整形时的上、下限阈值和阈值周期,并由USB通讯传输至FPGA...
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- 文献传递
- 编码β-葡萄糖苷酶的基因及重组表达载体及重组酿酒酵母表达菌株及应用
- 本发明公开了一种编码β-葡萄糖苷酶的基因及重组表达载体及重组酿酒酵母表达菌株及应用,编码β-葡萄糖苷酶的基因,它具有序列表SEQ ID No.1所述2913个核苷酸序列中的第1位到第2828位的核苷酸序列。本发明的重组酿...
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- 运动发酵单胞菌的电穿孔遗传操作方法
- 本发明公开了一种运动发酵单胞菌的电穿孔遗传操作方法,包括下述步骤:将待转化DNA通过电穿孔转化到运动发酵单胞菌的感受态细胞中或用运动发酵单胞菌无细胞提取液与待转化DNA共同孵育,通过电穿孔将孵育后的DNA转化到运动发酵单...
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- 用运动发酵单胞菌发酵甜高粱茎秆浓缩汁液生产燃料乙醇的方法
- 本发明公开了一种用运动发酵单胞菌发酵甜高粱茎秆浓缩汁液生产燃料乙醇的方法,由如下步骤组成:(1)机械压榨甜高粱茎秆,获得糖液;(2)浓缩糖液成糖汁;(3)调节糖汁的浓度,使总糖的质量浓度为5%-15%的稀糖汁,调节pH,...
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- 文献传递
- 大肠杆菌双顺反子表达载体中绿色荧光蛋白表达水平的研究被引量:1
- 2009年
- 构建了一系列含有编码硫氧还蛋白(Trx)和绿色荧光蛋白(GFP)基因的双顺反子重组表达质粒,重点考察双顺反子间紧密相连和重迭的间隔序列。诱导表达后,对表达的GFP进行荧光检测,利用GFP的荧光强度来反映蛋白质的表达水平。结果表明各表达载体所表达的GFP的平均荧光强度差距很大,表明双顺反子间的间隔序列对报告基因表达水平有一定的影响,为实现不同功能基因表达的精确调控奠定了基础。
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- 关键词:双顺反子多基因表达
- 半定量RT-PCR检测运动发酵单胞菌中外源基因转录水平的研究被引量:5
- 2009年
- 本研究运用半定量RT-PCR法检测运动发酵单胞菌重组菌中外源基因xylB的转录水平。提取野生型运动发酵单胞菌CP4及其2个重组菌的总RNA,检测无DNA污染后定量至同一浓度、并反转录为cDNA。观测目的基因xylB和内标基因16SrRNA的PCR扩增曲线、并确定合适的循环数,选用相同量的cDNA为模板,PCR检测各样本中xylB相对16SrRNA的转录水平。结果表明野生型菌株CP4中xylB基因没有转录,而两株重组菌中皆有xylB的转录本,且转录丰度基本一致,酶活测定也进一步证实该基因在重组菌中有效表达。该方法可用于鉴定运动发酵单胞菌中特定基因的转录水平,是一种快速有效的检测方法。
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- 关键词:运动发酵单胞菌基因表达
- 能利用木糖生产乙醇的重组运动发酵单胞菌及发酵方法
- 本发明公开了一种能利用木糖生产乙醇的重组运动发酵单胞菌及发酵方法,一种能利用木糖生产乙醇的重组运动发酵单胞菌GX1(Zymomonas mobilis),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCC...
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- 克雷伯氏菌甘油脱水酶基因在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 2009年
- 利用PCR技术从K.pneumoniae AS1.1736总DNA中扩增得到甘油脱水酶基因(dhaB)的DNA片段,将其连接至载体pGEM-Teasyvector,经测序正确后亚克隆至载体pET28a(+),转化至E.coli BL21(DE3)中,得到的重组菌能高效表达甘油脱水酶(DHAB)。对其进行了诱导表达研究,并对DHAB的一些基本性质进行了初步探讨。结果表明,37℃,IPTG浓度1.0mmol/L,诱导2h重组菌DHAB比活力最高;该酶最适温度为37℃,最适pH为8.0。在优化条件下,酶的比活力可达到8.75U/(mg.min)。
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