洪解放
- 作品数:46 被引量:62H指数:4
- 供职机构:天津大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市科技计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 含有番茄LeEXP2基因的重组载体及重组菌及LeEXP2基因在重组菌中的表达
- 本发明公开了含有番茄LeEXP2基因的重组载体及重组菌及LeEXP2基因在重组菌中的表达,本发明首先从番茄中克隆了LeEXP2基因;进一步将LeEXP2基因构建至巴斯德毕赤酵母表达载体;通过电转化获得一种含有番茄LeEX...
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- 分泌表达β-葡萄糖苷酶的重组酿酒酵母工业菌株及应用
- 本发明公开了一种分泌表达β-葡萄糖苷酶的重组酿酒酵母工业菌株及应用,所述一种分泌表达β-葡萄糖苷酶的重组酿酒酵母工业菌株,其分类命名为酿酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)ScBG,保藏于中国典型培...
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- 能利用木糖生产乙醇的重组运动发酵单胞菌及发酵方法
- 本发明公开了一种能利用木糖生产乙醇的重组运动发酵单胞菌及发酵方法,一种能利用木糖生产乙醇的重组运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)GX1,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCC...
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- 一种新的克隆基因方法——重组工程应用研究初报
- 2007年
- 重组工程(recombineering)是近几年来兴起的一种基于体内同源重组的、新型的遗传工程技术。作为重组工程应用方式之一的空隙修复(gap-repair),是一种捕捉和克隆目的DNA的方法,具有操作简单、步骤少,没有突变、保真度高,不受酶切位点限制等等优点。以pACYC184为模板,PCR扩增含p15A复制子、氯霉素抗性基因和对S.cerevisiaeALD4基因同源臂的线性片段,与酵母染色体DNA共同电击转化诱导型表达了λ噬菌体重组酶活性的大肠杆菌BW25113(pKD46)感受态细胞,通过空隙修复方式,成功地从酵母染色体DNA直接捕捉到大小为1 016bp的ALD4基因部分区段,得到3188bp的重组质粒pACYC184-ALD4。为进一步掌握和充分利用该技术直接捕捉更大片段基因打下了基础。
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- δ整合并分泌表达纤维素酶的酿酒酵母工业菌株及应用
- 本发明公开了δ整合并分泌表达纤维素酶的酿酒酵母工业菌株及应用,一种δ整合并分泌表达纤维素酶的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工业菌株RδBEC,保藏编号CGMCC NO.16825。上术工业菌...
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- 大肠杆菌丁醇耐受机制及耐受菌选育研究进展被引量:3
- 2018年
- 随着全球变暖和能源危机日益加剧,生物丁醇因能用作清洁能源和重要化学品而备受关注。大肠杆菌(Escherichia coli)由于具有优良的遗传操作性能成为丁醇生产的底盘菌,但丁醇对细胞的毒害作用已成为提高工程菌丁醇产量的瓶颈,因而增强E.coli丁醇耐受性是提高工程菌丁醇产量的必要前提。为此,需要详细了解E.coli丁醇耐受机制。丁醇可破坏细胞膜的屏障作用、扰乱物质转运和传递功能,细胞产生与热激、渗透等胁迫类似的生理应答反应,通过转录与翻译调节应答丁醇胁迫。从上述几个方面综述了E.coli丁醇耐受机制,并总结了运用基因工程理性设计获得丁醇耐受菌株的研究进展。然而目前丁醇耐受机制尚未完全揭示,限制了理性设计策略的应用,因此概括了运用定向进化获得耐受丁醇菌株并解析丁醇耐受功能基因的反向代谢工程策略在此方面的研究进展。同时也关注和评述了最新的组合策略、化学修饰方法提高E.coli丁醇耐受性的研究。最后总结和展望了提高底盘菌株E.coli丁醇耐受性的关键策略。
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- 关键词:大肠杆菌基因工程定向进化
- 利用木糖生产丁醇的拜氏梭菌及应用
- 本发明公开了利用木糖生产丁醇的拜氏梭菌及应用,利用木糖生产丁醇的拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)51543保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC M2017031。本发明以木糖为唯一底...
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- 大肠杆菌xylA和xylB基因的克隆与表达
- 随着人们对全球性能源危机认识的不断加深及环境保护意识的不断加强,开发新的替代能源已是刻不容缓的重大战略问题。生物乙醇作为一种可再生的替代能源,日益受到各国的重视。如何利用廉价生物质等可再生资源进行生物乙醇生产已成为各国的...
- 洪解放
- 关键词:木糖异构酶基因酶活测定
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- 分泌表达纤维素酶的酿酒酵母工业菌株及构建方法
- 本发明公开了分泌表达纤维素酶的酿酒酵母工业菌株及构建方法,其构建步骤为:1)宿主菌Kα的获得:安琪酿酒高活性干酵母进行生孢培养,筛选得到交配型为α型的单倍体菌株,用5‑氟乳清酸平板进行反选得到宿主菌Kα;2)纤维素酶基因...
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- 运动发酵单胞菌定点整合质粒的构建被引量:1
- 2009年
- 运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种,但其可利用的碳源范围窄.对其进行分子生物学基础研究和基因工程改造的工作早在上世纪八、九十年代就开始了,但基于其独特的生物学特性,至今遗传操作手段仍不成熟.以大肠杆菌(E.coli)pBR328为出发质粒,分段插入带Z.mobilis乳酸脱氢酶基因ldh、分别作为左右同源臂、1.5 kb大小的DNA片段,构建了Z.mobilis定点整合型质粒pBR328-ldhR-ldhL(6 239 bp),此质粒两同源臂片段即ldhR和ldhL的中间有稀有酶切位点NotI和SfiI,以方便插入待整合片段.经NotI位点插入1 216 bp氯霉素抗性基因cml,将相应质粒pBR328-ldhR-cml-ldhL以环型和线型形式分别电击转化Z.mobilis ZM4菌株,都成功筛选到了ZM4 ldh::cml菌株,证明此定点整合质粒是方便可用的,为对Z.mobilis的定点遗传操作提供了很好的基础.
- 邹少兰洪解放马媛媛张一婷张鲲张敏华
- 关键词:运动发酵单胞菌