龙治锋
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- L-精氨酸与N-硝基L-精氨酸甲基酯对雄性大鼠睾酮分泌的影响被引量：3
- 2002年
- 目的:阐明一氧化氮(NO)对男性生殖轴中睾丸内分泌功能的调节作用。材料与方法:于雄性SD大鼠腹腔内注射不同剂量(0～210mg/kg)的L-ARG(L-arginine,L-ARG,NO前体)与L-NAME(Nw-nitrio-L-arginine-mythel-ester,L-NAME,NO合酶的竞争性抑制剂,0～70mg/kg),每天一次,共8天,最后一次注射后1小时采血 然后将SD大鼠分成4组,分别注射同一剂量的L-ARG(160mg/k8)、L-NAME(50mg/kg)、L-ARG+L-NAME和生理盐水,每天一次,注射13天,每隔3～4天采血一次。用放射免疫同步测定法测定血清中睾酮含量,对所得数据进行统计学处理。结果:L-ARG对睾酮分泌具有抑制作用(P<0.01),而L-NAME则促进睾酮的分泌(P<0.01),两者都具有时间依赖性,并与剂量高度相关。L-ARG和L-NAME混合注射时,睾酮的含量与生理盐水注射组无明显区别(P>0.05)。结论:NO对雄性大鼠的睾酮分泌具有抑制作用。
- 贺丽萍罗红梅李美香田英刘月顺龙治锋
- 关键词：一氧化氮睾酮放射免疫
- 肝癌细胞增殖受M-CSF胞内和胞外自分泌的双重调控被引量：1
- 2005年
- 目的:研究胞内M-CSF及其受体在肝癌SMMC 7721细胞的表达与性质,探讨胞内M-CSF对SMMC 7721细胞增殖的影响及其机制。方法:以高表达M-CSF的人肝癌细胞系(SMMC 7721细胞)为模型,以免疫组化、流式细胞计数、反义技术与蛋白印迹等方法观测胞内M-CSF对SMMC 7721细胞增殖的影响及其机制。结果:M-CSF 及其受体主要在SMMC 7721细胞的胞质、胞核中表达,胞内的M-CSF 的相对分子量为20 000,M-CSFR的相对分子量为120 000;免疫共沉淀分析证明M-CSF在细胞内与M-CSFR以复合物的形式存在;M-CSF的单克隆抗体及其反义寡聚核苷酸能抑制SMMC 7721细胞的增殖、下调CYCLIND1/E的表达和上调P16的表达,且M-CSF的单克隆抗体及其反义寡聚核苷酸的联合使用能进一步加强对SMMC 7721细胞抑制作用和增加下调CYCLIND1／E和上调P16的表达幅度。结论:SMMC 7721细胞受M-CSF胞外自分泌和胞内自分泌的双重调控。
- 张蒙夏罗红梅唐圣松雷小勇龙治锋张晓红汪煜华
- 关键词：SMMC肝肿瘤
- 人类心发育候选基因ZNF569融合EGFP真核表达载体的构建及表达
- 2009年
- 目的：构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569，并鉴定其在哺乳动物COS-7细胞系能否正确表达。方法：把ZNF569基因ORF定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体，构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569，脂质体介导将pEGFP-ZNF569转染入哺乳动物COS-7细胞，以一步法RT-PCR检测其在哺乳动物COS-7细胞中的表达情况。结果：双酶切及测序鉴定表明成功构建真核表达重组体pEGFP—ZNF569，并在COS-7细胞中成功地表达了融合荧光蛋白。RT-PCR检测显示RT—PCR扩增产物与ZNF569目的基因片段大小相符，确实源于重组质粒转录后的mRNA。结论：真核表达重组体pEGFP-ZNF569的成功构建及在体外真核细胞中有效表达，为进一步研究ZNF569在心发育过程中的信号调控奠定了一定的实验基础。
- 黄欣琼唐显庆石金凤吴秀山龙治锋
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白真核表达载体基因表达
- 核内M-CSF对NIH3T3细胞内微丝的影响
- 2007年
- 目的建立M-CSF核内稳定表达的NIH3T3细胞系,探讨核内M-CSF对细胞骨架的影响。方法经脂质体介导核内定位表达重组体pCMV/M-CSF转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用Rt-PCR、免疫细胞化学鉴定其在真核细胞中的表达及定位分布,用考马斯亮蓝染色细胞微丝测定M-CSF进入细胞核后对细胞骨架的影响。结果RT-PCR结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞能稳定表达M-CSFmRNA;免疫细胞化学结果显示表达的M-CSF定位于NIH3T3细胞核。考马斯亮蓝染色结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞内微丝数量减少,排列紊乱。结论核内M-CSF可引起NIH3T3细胞内微丝数量减少,排列紊乱。
- 张晓红唐圣松赵飞骏刘月顺龙治锋
- 关键词：NIH3T3细胞微丝
- 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)融合EGFP真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 目的构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并鉴定其在小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞能否正确表达。方法PCR扩增M-CSF基因,定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体,构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,脂质体介导将pEGFP-M-CSF转染入NIH3T3细胞,以一步法RT-PCR检测其在NIH3T3细胞中的表达情况。结果双酶切及测序鉴定证明成功构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白,RT-PCR检测结果显示RT-PCR扩增产物与M-CSF目的基因片段大小相符,确实源于重组质粒转录后的mR-NA。结论真核表达重组体pEGFP-M-CSF的成功构建及在体外真核细胞中有效表达,为进一步研究M-CSF在真核细胞中的信号调控奠定了一定的实验基础。
- 张晓红唐圣松李剑敏龙治锋
- 关键词：基因表达
- 锌指基因ZNF569的转录活性分析
- 2009年
- 目的构建GAL4-ZNF569和pCMV-Tag2C-ZNF569重组质粒。通过它控制报告基因的表达情况来确定它的转录激活/抑制活性以及它是否参与了细胞信号途径调控。结果GAL4-ZNF569和pCMV-Tag2C-ZNF569重组质粒转染细胞后发现ZNF569具有转录抑制活性并能抑制SRE和AP-1的转录活性。对ZNF569的分段结构域的转录活性分析表明ZNF569的KRAB结构域和C2H2锌指结构域都具有抑制转录因子转录活性的作用。结论由此笔者得出结论认为ZNF569的KRAB框和C2H2锌指都具有抑制因子作用,为进一步研究ZNF569在真核细胞中的信号调控奠定了一定的实验基础。
- 唐显庆黄欣琼吴秀山龙治锋
- 关键词：转录因子
- NIH3T3细胞核内过表达的M-CSF对细胞运动的影响被引量：1
- 2007年
- 目的构建M-CSF细胞核内定位表达载体pCMV/M-CSF,探讨核内M-CSF对NIH3T3细胞运动的影响。方法采用PCR的方法扩增人M-CSF活性片段,将其插入核内真核表达载体pCMV/myc/nuc,构建重组体pCMV/M-CSF,经脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418筛选后,用免疫细胞化学及Western blot鉴定其在真核细胞中的表达及定位分布,用细胞划痕实验测定M-CSF进入细胞核后对细胞运动能力的影响。结果限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入pCMV/M-CSF的片段为1400bp左右,与预期M-CSF分子大小相当。Western blot结果显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞能稳定表达M-CSF蛋白;免疫细胞化学结果显示表达的M-CSF定位于NIH3T3细胞核。细胞划痕实验显示转染pCMV/M-CSF的NIH3T3细胞有较强的运动能力。结论成功构建M-CSF核内定位表达载体pCMV/M-CSF,核内M-CSF可加强NIH3T3细胞运动。
- 张晓红唐圣松赵飞骏刘月顺龙治锋
- 关键词：NIH3T3细胞细胞运动
