南通大学医学院生命化学实验室
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 开设医学本科生PCR实验的教学体会
- 2013年
- 结合分子生物学中PCR实验的开设,从实验前的各项准备工作到学生实验的教学过程及实验课后的思考等方面进行分析和总结,得到一些实践体会,以期为今后的实验教学改革提供参考。
- 贾辛殷冬梅翟旭光钱慰沈勤
- 关键词：生物化学分子生物学实验教学PCR
- 反义寡核苷酸阻断乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶的表达和意义被引量：2
- 2009年
- 目的探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的基因试剂MBO-asGCS逆转乳腺癌多药耐药的作用机制及其意义。方法MBO-asGCS处理体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药型MCF-7/AdrR,采用细胞毒性分析测定MBO-asGCS对MCF-7-AdrR存活率的影响,RT-PCR和Western印迹分析对耐药型细胞GCS的表达变化,检测对caspase 3/7的活性影响及流式细胞仪测定MBO-asGCS对耐药型细胞的凋亡情况。结果MBO-asGCS转染人耐药型乳腺癌细胞MCF-7/AdrR后,与未转染组细胞的IC50分别是0.18μmol/L和12.50μmol/L,药物敏感性提高了69倍;MBO-asGCS抑制GCS的mRNA表达70%,减少GCS蛋白表达39%(P<0.01);转染MBO-asGCS后耐药型细胞的caspase 3/7活性上升53%(P<0.05),细胞凋亡率上升5.6倍(P<0.01)。结论GCS过表达是耐药型乳腺癌细胞的特征,靶向人GCS的反义寡核苷酸可直接抑制GCS的过表达,诱导耐药细胞凋亡,有效逆转其耐药性,GCS可能是治疗耐药型乳腺癌的一个潜在靶点。
- 殷冬梅吴娟娟井园王新葛锦涛
- 关键词：乳腺肿瘤细胞反义寡核苷酸葡萄糖神经酰胺合成酶药物耐药
