山西医科大学基础医学院形态学实验室
- 作品数：21 被引量：77H指数：5
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- cAMP-PKA/EPAC参与了β1-AA诱导的心肌细胞自噬下降
- 目的：建立β1肾上腺素受体细胞外第二环(β1-AR-ECⅡ)抗原肽段主动免疫大鼠模型,探讨cAMP-PKA/EPAC在β1肾上腺素受体自身抗体(β1-AA)引起心肌自噬水平下降中的作用。方法：采用β1-AR-ECⅡ主动免...
- 侯晓鸿宁娜李杨任亚楠王昌图原媛王丽王晓晖
- 关键词：PKA自噬
- 喉鳞状细胞癌中ZNF750的表达及与预后的关系被引量：2
- 2020年
- 目的探讨ZNF750的表达与喉鳞状细胞癌临床病理特征及预后的相关性。方法收集115例喉鳞状细胞癌及56例对应癌旁正常喉组织,另收集6对新鲜喉鳞状细胞癌组织及配对癌旁正常喉组织。采用Western blot法和免疫组化法检测喉鳞状细胞癌组织及癌旁正常喉组织中ZNF750蛋白的表达;采用Kaplan-Meier生存曲线和Cox比例风险回归模型分析ZNF750蛋白表达与喉鳞状细胞癌患者预后的关系。结果ZNF750在喉鳞状细胞癌组织中的表达明显低于癌旁正常喉组织(P<0.05),ZNF750蛋白表达与喉鳞状细胞癌的淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),同时喉鳞状细胞癌患者中ZNF750蛋白高表达组的总生存率均高于ZNF750低表达组(P<0.05)。结论ZNF750在喉鳞状细胞癌组织中的表达与淋巴结转移、TNM分期有关,其有望成为预测喉鳞状细胞癌患者预后的指标。
- 郭林芝王丽曹红艳刘青华闫玲艳菅晓婷吴月琴李灵敏
- 关键词：喉肿瘤鳞状细胞癌预后因子WESTERNBLOT
- β_1-肾上腺素受体自身抗体通过激活内质网应激诱导心肌细胞凋亡被引量：4
- 2018年
- 目的:探讨内质网应激在β_1-肾上腺素受体自身抗体(β_1-AA)引起心肌细胞凋亡中的作用。方法:采用β_1-肾上腺素受体细胞外第二环抗原肽段主动免疫大鼠,应用SA-ELISA法检测大鼠血清中β_1-AA的水平,TUNEL染色检测心肌组织的凋亡水平,Western blot法和免疫组化法检测心肌组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及caspase-12的蛋白表达。利用亲和层析法纯化的β_1-AA处理H9c2心肌细胞,CCK-8法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡;采用内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)预处理H9c2心肌细胞,再给予β_1-AA干预,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡的变化情况。结果:与对照组相比,主动免疫大鼠血清中β_1-AA水平在免疫2周时显著增加,进一步增加至8周,并且主动免疫2周大鼠心肌组织凋亡率明显升高,持续升高至8周。与对照组相比,主动免疫大鼠心肌组织中GRP78、CHOP及caspase-12的蛋白表达在免疫4周和8周时均明显增加。β_1-AA引起H9c2心肌细胞活力持续降低,凋亡明显增加。与β_1-AA单独处理组相比,内质网应激抑制剂4-PBA预处理H9c2心肌细胞可以有效逆转β_1-AA诱导的细胞凋亡增加和活力下降。结论:β_1-AA可以通过激活内质网应激诱导心肌细胞凋亡。
- 侯晓鸿宁娜李杨何金玲燕子原媛王丽王晓晖
- 关键词：葡萄糖调节蛋白78C/EBP同源蛋白CASPASE-12
- 数码显微互动实验教学在组织学与胚胎学中的应用被引量：12
- 2014年
- 数码显微互动实验室在实验教学的逐步应用,加速了形态学实验课从传统教学模式向现代教学模式的转变,把现代信息技术融入高等教育的课堂,为形态学实验课教学提供了高效率的教学和沟通手段。通过多年来对组织学与胚胎学实验课教学方法的摸索,将与传统模式相结合的数码显微互动实验教学运用于组织学与胚胎学,充分发挥了两种教学模式的优势,弥补了各自存在的缺点,相对于传统教学模式来说,教学内容更加丰富,互动式的教学模式使课堂气氛活跃,充分调动了学生的积极性、主动性,教学效果显著提高。
- 郭蕊张涛乔从进王晓晖
- 关键词：组织学与胚胎学实验教学
- 胰高血糖素样肽-1受体在β淀粉样蛋白31-35对HT22神经细胞节律基因per2影响中的作用
- 2017年
- 目的探讨胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)在β淀粉样蛋白(Aβ)31-35影响HT22神经细胞节律基因per2表达中的作用。方法以小鼠海马HT22神经细胞为研究对象。四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒性实验检测细胞存活率的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测不同CT时间per2基因的变化趋势;免疫荧光染色观察CT16时GLP-1R及PER2蛋白的原位表达情况。结果 (1)分别使用0、1、5μmol/L的Aβ31-35处理细胞,结果发现:1μmol/L Aβ31-35处理组细胞存活率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);5μmol/L Aβ31-35处理组细胞存活率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(2)经1μmol/L Aβ31-35处理后,per2基因表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);经5μmol/L Aβ31-35处理后,per2基因表达在CT16时与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在CT16时,经5μmol/L Aβ31-35处理后,GLP-1R的表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(4)在CT16时,经10μmol/L Exendin(9-39)处理后PER2蛋白的荧光强度与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Aβ31-35可能通过降低GLP-1R表达导致小鼠海马HT22神经细胞per2节律基因异常表达。
- 李亚蒙王丽赵学玲张蕊赵今原媛王晓晖
- 关键词：淀粉样Β蛋白胰高血糖素样肽-1受体
- Per2蛋白抑制β_(1)-肾上腺素受体自身抗体诱导的心肌细胞死亡
- 2022年
- 目的探讨周期蛋白2(period 2,Per2)在β_(1)-肾上腺素受体(β_(1)-adrenergic receptor,β_(1)-AR)自身抗体(β_(1)-adrenergic receptor autoantibodies,β_(1)-AA)诱导的心肌细胞死亡中的作用。方法选取6~8周龄SD雄性大鼠16只随机分为主动免疫组[模型组,采用β_(1)-肾上腺素受体细胞外第二环抗原肽段(β_(1)-AR-ECⅡ)对大鼠进行主动免疫]和对照组(同期注射Na_(2)CO_(3)等溶液),每组8只。8周时取大鼠血清,提纯β_(1)-AA。购买H9c2心肌细胞,随机分为Control组、β_(1)-AA组和β_(1)-AR+β_(1)-AA组,CCK-8法检测细胞存活率(n=8);Control组和β_(1)-AA(1μmol/L)组细胞经地塞米松同步化4 h后,Western blot检测两组不同时间点心肌细胞Per2的表达,JTK_CYCLE分析昼夜节律参数(n=11);分别采用慢病毒shPer2和Per2敲低或过表达心肌细胞中Per2的表达,RT-PCR和Western blot检测Per2的表达(n=6);在慢病毒敲低Per2(n=8)和过表达Per2(n=10)基础上,结合β_(1)-AA处理,CCK-8法检测心肌细胞存活率。结果CCK-8结果显示,β_(1)-AA诱导H9c2细胞存活率明显降低(P<0.05)。Western blot结果显示β_(1)-AA显著抑制心肌细胞Per2蛋白的节律性表达(JTK_CYCLE P>0.05),其中CT8和CT16降低最为明显(P<0.01)。慢病毒敲低Per2表达可引起心肌细胞存活率降低;在此基础上进行β_(1)-AA处理,细胞存活率进一步降低(P<0.001)。而过表达Per2可明显逆转β_(1)-AA诱导的心肌细胞存活率下降(P<0.001)。结论Per2抑制β_(1)-AA诱导的H9c2心肌细胞死亡。
- 李朋佳贾微微陆洁蓓马明霞周秀雅王宁原媛郭蕊牛晓辰王晓晖王丽
- 关键词：心肌细胞PER2
- 实验小鼠脂肪组织石蜡切片制作方法的改进被引量：5
- 2020年
- 脂肪组织是机体重要的能量仓库,广泛分布于全身的皮下及内脏各处[1],薄层疏松的结缔组织将其分割成许多小叶结构[2],小叶内有大量的脂肪细胞。近年来,人们越来越重视对脂肪组织的研究[3-5],而这些研究都离不开形态学方面(如HE、免疫组化染色)的观察。因此,制作优质的脂肪组织切片标本至关重要。由于脂肪组织结构特殊,含有大量的油脂成分,如果组织固定、脱水脱脂不完全,切片时往往出现组织碎渣,有空洞、触摸较软、放置后蜡块表面有凹陷、不易保存等各种问题影响后续的观察及研究[6-8]。本实验室参照董学易等[9]的方法制作脂肪组织石蜡切片,虽基本满足形态学研究,但整个流程所用时间较长,效率较低,减慢了科研进程。为制作更好的脂肪组织石蜡切片,同时缩短制作时间,本科室在此基础上进行改进,并应用于免疫组化和免疫荧光染色,获得了较为满意的结果。
- 菅晓婷付超岳丹杜圣家郭林芝
- 关键词：实验小鼠脂肪组织石蜡切片
- 雷帕霉素改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱被引量：1
- 2019年
- 目的:观察大环内酯类抗生素雷帕霉素(Rapa)对β-淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)引起的C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱及小鼠海马神经元细胞系HT22中Per2表达异常的影响。方法:选取6～8周雄性C57BL/6小鼠进行跑轮行为学实验,分析Rapa在改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱中的作用。将HT22神经细胞随机分为对照组、Aβ31-35组、Rapa预处理组和Rapa单独处理组,CCK-8法检测细胞活力。采用real-time PCR法检测上述各组细胞于circadian time(CT)4、CT8、CT12、CT16、CT20和CT24的Per2 mRNA表达水平,通过Western blot方法检测Per2 mRNA表达差异最大时点CT16的PER2蛋白表达水平。结果:与对照组相比,Aβ31-35引起小鼠昼夜节律紊乱,自由运转周期显著延长;Rapa预处理后,小鼠的昼夜节律紊乱情况有所改善,自由运转周期显著降低。Aβ31-35引起HT22细胞活力显著降低且具有剂量依赖性;Rapa预处理后有效逆转Aβ31-35诱导的HT22细胞存活率下降(P<0.05)。经Aβ31-35处理后,HT22细胞Per2的mRNA水平在CT16处较对照组明显降低;Rapa预处理后Per2的mRNA异常表达得到显著改善。与对照组相比,Aβ31-35组CT16时Per2蛋白水平显著降低;与Aβ31-35组相比,Rapa预处理组Per2蛋白水平在一定程度上升高(P<0.05)。结论:Rapa可以有效缓解Aβ31-35所致C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱,并有效改善Aβ31-35所致HT22细胞中Per2的异常表达。
- 王昌图张蕊原媛赵今任亚楠王丽王晓晖
- 关键词：昼夜节律雷帕霉素
- cAMP在Liraglutide改善Aβ25-35诱导的昼夜节律紊乱中的作用研究被引量：1
- 2018年
- 目的研究环腺苷酸(cAMP)在利拉鲁肽(Liraglutide)改善β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)引起的昼夜节律紊乱中的作用。方法 C57BL/6小鼠随机分为Vehicle,Aβ25-35,Liraglutide,Liraglutide+Aβ25-35四组,利用跑轮行为学实验评估小鼠昼夜节律,ELISA法检测海马CA1区cAMP的表达水平。HT22小鼠海马神经细胞随机分为Vehicle,Aβ25-35,Liraglutide,Liraglutide+Aβ25-35,SQ22536+Liraglutide+Aβ25-35,SQ22536组,利用CCK8法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测per1 mRNA表达水平。结果海马内注射Aβ25-35后小鼠出现明显昼夜节律紊乱,且cAMP节律性表达异常,Liraglutide预处理明显改善了小鼠昼夜节律紊乱现象和cAMP节律性表达异常。HT22细胞中加入Aβ25-35后,细胞存活率下降且per1基因节律性表达异常,而Liraglutide预处理提高了细胞存活率并改善了per1表达异常,但这种效应会被cAMP抑制剂SQ22536所拮抗。结论 Liraglutide可拮抗Aβ25-35所致昼夜节律紊乱及per1基因的异常表达,其机制可能是通过改变cAMP节律性表达实现的。
- 任亚楠郭林芝张蕊侯晓鸿原媛王丽王晓晖
- 关键词：昼夜节律LIRAGLUTIDEAΒ25-35CAMP
- 脂联素抑制β1-肾上腺素受体自身抗体诱导的大鼠H9c2心肌细胞自噬流下降被引量：4
- 2020年
- 目的:观察脂联素抑制β1-肾上腺素受体(β1-AR)自身抗体(β1-AA)诱导的大鼠心肌细胞自噬流下降的作用及机制。方法:SD大鼠随机分为免疫组和对照(control)组,每组6只;H9c2大鼠心肌细胞分为control组、β1-AA组、β1-AA+脂联素组、脂联素组、β1-AA+脂联素+Compound C组和β1-AA+Compound C组。合成β1-AR细胞外第2环(β1-AR-ECII)抗原肽段,主动免疫SD大鼠并采用亲和层析法纯化大鼠血清中β1-AA;CCK-8法检测H9c2心肌细胞活力;real-time PCR检测心肌细胞LC3B和beclin-1的m RNA水平;Western blot检测心肌细胞LC3-II、P62、AMP活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)的蛋白水平。结果:与control组相比,10μg/L脂联素预处理可显著抑制β1-AA诱导的心肌细胞活力下降(P<0.05);脂联素预处理可显著逆转β1-AA诱导的心肌细胞LC3B和beclin-1 m RNA水平下降、LC3-II蛋白表达水平下降及P62蛋白的累积(P<0.05);脂联素可逆转β1-AA诱导的心肌细胞AMPK磷酸化水平下降(P<0.05)。加入AMPK抑制剂Compound C预处理,脂联素则不能逆转β1-AA诱导的心肌细胞LC3B和beclin-1 m RNA及LC3-II蛋白水平降低(P<0.05),但仍可减少P62蛋白累积(P<0.05)。结论:脂联素抑制β1-AA诱导的H9c2大鼠心肌细胞自噬流降低,其机制部分依赖AMPK途径。
- 孙聪郭帅宁娜侯晓鸿王昌图原媛王晓晖王丽
- 关键词：脂联素自噬AMP活化蛋白激酶心肌细胞
