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朱佑明
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- 所属机构:重庆市第一人民医院
- 所在地区:重庆市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 李文桂
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- 多房棘球绦虫重组Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗的构建及鉴定被引量：20
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- 目的构建和鉴定多房棘球绦虫(Em)重组双歧杆菌(Bb)-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗。方法通过PCR扩增EmⅡ/3和Em14-3-3抗原编码基因,然后采用基因拼接法(geneSOEing)剪接EmⅡ/3和Em14-3-3,得到EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因;将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-EmⅡ/3-Em14-3-3;用电穿孔法将该质粒导入Bb,构建多房棘球绦虫重组Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗。结果PCR成功扩增出2554bp的EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因;双酶切证实EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因成功插入pGEX-1λT中;PCR证实rBb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗构建成功。结论成功构建了多房棘球绦虫重组Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗,为该疫苗的开发和利用打下了坚实的实验基础。
- 杨梅李文桂朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫
- 多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察被引量：4
- 2007年
- 目的:动态观察多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有PBS对照。结果:疫苗接种组的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后4～8周、2～8周、2～8周和6～10周升高,分别在免疫后6、6、4～6和8周达最高水平。结论:多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗在免疫早期(2～8周)即可诱导小鼠产生一个TH1型保护性免疫反应。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫重组BCG-EM14-3-3疫苗细胞因子
- 多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ／3疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨多房棘球绦虫（Em）重组BCG-EmⅡ／3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法将Balb／c小鼠按体质量随机分为3组：疫苗皮下注射组、疫苗鼻腔内接种组、对照组。免疫后8周用Em原头节进行攻击感染，感染后18周杀鼠取脾，分离脾细胞，分别用原液、Em抗原（EmAg）、刀豆蛋白A（ConA）或植物血凝素（PHA）培养，酶联免疫吸附（ELISA）法检测脾细胞培养上清液中白细胞介素2（IL-2）、1干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4）水平。结果疫苗皮下注射组原液培养条件下IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平分别为（34．6±2．7）、（34．5±2．8）、（265．0±0．0）、（9．8±2．6）ng／L，与对照组[（25．0±1．9）、（30．0±0．0）、（10．0±0．0）、（12．5±2．7）ng／L]比较差异均有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）；疫苗鼻腔内接种组原液培养条件下上述4种指标分别为（32．5±2．2）、（33．6±2．7）、（130．0±0．0）、（10．4±2．7）ng／L，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）；疫苗皮下注射组原液培养条件下TNF-α水平明显高于疫苗鼻腔内接种组（P〈0．01）。EmAg、ConA（或PHA）刺激培养条件下，上述4种指标明显高于相同组别的原液培养（P〈0．01），且ConA（或PHA）刺激培养条件下，上述4种指标明显高于相同组别的EmAg刺激培养条件（P〈0．01）。结论多房棘球绦虫重组BCG－EmⅡ／3疫苗诱导小鼠产生辅助T淋巴细胞（Th）1型免疫反应，从而对抗Em原头节攻击感染。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：棘球蚴病细胞因子类
- 多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导BALB/c小鼠的保护力观察被引量：2
- 2008年
- 目的探讨多房棘球绦虫(Em)重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫后对受攻击感染BALB/c小鼠的囊重和抗体及其亚类的影响。方法将5×106克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用皮下注射和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠1次,免疫后8周每鼠用50个Em原头节攻击感染,感染后18周剖杀小鼠,分离泡球蚴并称重,计算囊重抑制率;收集鼻腔内接种组鼠血清,测定IgG及其亚类和IgE水平。试验设有空载体、卡介苗(BCG)和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组。结果疫苗皮下注射和鼻腔内接种组小鼠的囊重抑制率分别为82.35%和59.41%;疫苗鼻腔内接种组攻击后18周的鼠血清IgG、IgG2a、IgG2b和IgE水平均较接种前高(P<0.05或P<0.01),吸光度(A490)值分别为0.090±0.006、0.026±0.002、0.024±0.003和0.031±0.019,IgG1和IgG3水平低于接种前(P<0.05或P<0.01),A490值分别为0.042±0.011和0.156±0.004。结论多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗可诱导小鼠产生较强的保护力,表现为血清IgG、IgG2a、IgG2b、IgE水平升高和棘球蚴生长受抑制。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫重组BCG-EM14-3-3疫苗保护力
- 人体恶性实体瘤TIL增殖力、表型和杀伤力研究被引量：7
- 1994年
- 在建立高活力肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）分离培养方法的基础上，对８３例恶性实体瘤ＴＩＬ的细胞增殖动力学、部份ＴＩＬ表型与杀伤力等作了较为系统的研究。结果提示，本实验室所建立分离培养的ＴＩＬ增殖能力较强且稳定，有６５％的增殖倍数大于１０００倍；３Ｈ－ＴｄＲ掺入高峰在培养的第４５～７５天；对其自身的原代肿瘤细胞杀伤力可以维持至５６天以上；对５６份经ｒＩＬ２诱导的ＴＩＬ（培养时间１７±５．２天）表型分析：ＣＤ３８０±２１％，ＣＤ４３７±２１％，ＣＤ８４４±１８％，ＨＬＡＤＲ６９±２４％，与ｒＩＬ２诱导前比较，ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８和ＨＬＡＤＲ均增多，尤以ＣＤ３与ＣＤ８表型增多明显。
- 李彪如童善庆张希衡朱佑明胡宝瑜陆德源陆静顾琴龙
- 关键词：浸润淋巴细胞淋巴细胞表型
- 多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞凋亡的研究被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨以多房棘球绦虫(Em)重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠再以Em的续绦期幼虫泡球蚴的原头节攻击后,鼠脾细胞凋亡的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠,免疫后8周用Em原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾分离脾细胞,用流式细胞术检测脾细胞的凋亡,同时设空载体、BCG和PBS对照组。结果:疫苗接种组小鼠脾细胞的凋亡率明显低于感染对照组;鼻腔内接种组脾细胞的凋亡率显著低于皮下注射组。结论:泡球蚴的感染可引起小鼠脾细胞发生凋亡,Em重组BCG-Em14-3-3疫苗接种可抑制感染小鼠脾细胞的凋亡。疫苗鼻腔内接种是一种较好的免疫途径。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫重组BCG-EM14-3-3疫苗脾细胞凋亡
- 多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究
- 2008年
- 目的:探讨多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c鼠,免疫后8周用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染,感染后18周杀鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2I、FN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有空载体、BCG和PBS对照。结果:疫苗接种组的IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低;鼻腔内接种组的TNF-α水平高于皮下注射组。结论:多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠产生一个TH1型反应,从而对抗Em原头节攻击感染。
- 李文桂王鸿朱佑明
- 关键词：多房棘球绦虫细胞因子
- TNF抗妇科肿瘤细胞的实验研究被引量：4
- 1994年
- 肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）是具有抗肿瘤特性的多功能物质，但不同种肿瘤细胞对ＴＮＦ的敏感性存在着明显差异。在体外试验中，发现卵巢癌细胞（ＡＯ）子宫颈癌细胞（Ｈｅｌａ）和绒癌细胞（ＪＡＲ）对ＴＮＦ都不甚敏感。若ＴＮＦ联合应用γ－干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－Ｔ，ＩＦＮ－γ）或放线菌素Ｄ，则对这３种细胞株的杀伤作用明显增强。提示它们与ＴＮＦ有协同杀伤妇科肿瘤细胞的作用，这对妇科肿瘤的治疗提供了新的线索。
- 陆静华祖德童善庆张希衡朱佑明陆德源
- 关键词：肿瘤坏死因子干扰素放线菌素
- 卵巢癌浸润淋巴细胞的免疫学特性研究
- 1999年
- 目的 研究卵巢癌浸润淋巴细胞（ＴＩＬ） 在体外扩增后免疫学特性，评估ＴＩＬ用于晚期卵巢癌治疗的前景。 方法 利用流式细胞仪分析ＴＩＬ的细胞表型，使用分子生物学和免疫学方法研究ＴＩＬ分泌细胞因子的能力和杀伤肿瘤细胞的活性。 结果 ＴＩＬ细胞表型的差异可能与肿瘤的种类、性质、取材部位有关，结缔组织，基质中来源的ＴＩＬ以ＣＤ＋３ 、ＣＤ＋４ 为主，肿瘤组织和小血管周围以ＣＤ＋３ 、ＣＤ＋８ 为主，体外ＩＬ２ 的浓度对ＴＩＬ的免疫学特性有很大的影响。经ｒＩＬ２ 扩增后，ＴＩＬ分泌产生ＩＬ２、ＴＮＦα、ＩＦＮγ等多种细胞因子能力及杀伤肿瘤细胞的活性均有明显提高。再加入抗ＣＤ３ 单抗或ＰＨＡ（ 合适浓度），ＴＩＬ细胞因子表达可进一步增强。ＴＩＬ联合环磷酰胺或ＩＬ２ 治疗晚期卵巢癌患者，可显著改善患者外周血细胞表型，具有一定的疗效。 结论 ＴＩＬ在体外经ｒＩＬ２ 扩增后，免疫活性有明显提高。体内肿瘤细胞的消退可能主要并不是通过输入的ＴＩＬ直接杀伤肿瘤细胞，而是在很大程度上依靠其分泌多种细胞因子增强了机体细胞免疫活性和免疫调节能力。
- 胡宝瑜王建华童善庆李彪如丁健青朱佑明陆德源华祖德陆静
- 关键词：肿瘤浸润淋巴细胞卵巢肿瘤TIL
- 囊性棘球蚴病免疫发病机制研究进展被引量：6
- 2007年
- 本文从宿主对棘球蚴感染的先天性抵抗、早期免疫、包囊形成期免疫、影响CD4+T细胞分化因素、细胞因子在细粒棘球绦虫(Eg)感染中的作用、Eg感染与变态反应、Eg感染的逃避机制等7个方面进行了综述。
- 朱佑明李文桂
- 关键词：细粒棘球绦虫棘球蚴病免疫机制
