公共文化服务平台

搜索到34篇“ ONCONASE“的相关文章

Onconase偶聚化设计、优化表达及抗肿瘤活性研究: 豹蛙酶(Onconase)是从北美洲豹蛙卵母细胞中提取出的一种核糖核酸酶，具有RNA降解活性，经FDA批准用于间皮质瘤的治疗。临床应用显示：Onconase免疫原性低、对正常组织器官损伤小，在其它肿瘤治疗方面也具有较好应...; 倪平; 关键词：纯化工艺细胞毒性

重组大肠杆菌表达豹蛙酶发酵培养基和发酵条件的优化被引量：1: 2021年; 采用Plackett-Burman(PB)实验设计,考察了培养基各组分对重组大肠杆菌表达豹蛙酶的影响,优化了重组大肠杆菌表达豹蛙酶的发酵培养基,并进一步优化了诱导表达条件。在此基础上,采用指数补料和pH-Stat方式在7 L发酵罐中进一步验证优化结果。结果表明:摇瓶水平豹蛙酶表达量由优化前的9%提高到优化后的36%,OD_(600)值由优化前的4.80提升到优化后的5.47。优化后7 L发酵罐中重组菌豹蛙酶表达水平可达到55%,OD_(600)可达到35。; 夏祯赵兴聪王学东; 关键词：大肠杆菌蛋白表达发酵优化 PLACKETT-BURMAN

豹蛙抗瘤酶与维生素C协同促进大鼠肝癌RH-35细胞凋亡被引量：3: 2020年; 为了研究豹蛙抗瘤酶(ONC)与维生素C(VC)对肿瘤细胞的协同促凋亡作用,对大鼠肝癌RH-35细胞进行单药组和联合用药组处理。采用磺酰罗丹明B法测定细胞增殖抑制率,Hoechst染色检测细胞核变化。采用联合指数和等效线图解法评价联合用药效果,流式细胞法检测细胞的凋亡情况。试验结果表明:ONC单药组和VC单药组对RH-35细胞增殖的抑制作用均显著(P<0.01),联合用药组的促凋亡作用优于单药组(P<0.001)。VC协同ONC促进了RH-35细胞凋亡。; 王泽郗玲玲郗玲玲梁新月杨刚刚; 关键词：维生素C 细胞凋亡

重组豹蛙抗瘤酶促进大鼠肝癌RH-35细胞凋亡被引量：1: 2016年; 目的研究重组豹蛙抗瘤酶(r ONC)对大鼠肝癌RH-35细胞增殖和凋亡的作用。方法用不同浓度的r ONC处理体外培养的RH-35细胞,用SRB法检测细胞增殖;Hoechst染色法测定细胞活性;用流式细胞术检测细胞周期;用qRT-PCR和Western blot法检测相关基因和蛋白的变化。结果 r ONC作用于RH-35细胞24 h后呈时间和浓度依赖性,显著抑制增殖(P<0.05),IC_(50)为7.38μmol/L。rONC作用于RH-35细胞后,细胞核出现了显著的凋亡特征。G0/G1期的细胞比例显著上升(P<0.05),增殖能力减弱。r ONC作用于RH-35细胞后,BAX mRNA和蛋白水平升高(P<0.05),而PCNA,CCNA2和BCL-2 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05)。结论 r ONC可能通过上调BAX表达和下调PCNA,CCNA2和BCL-2表达,促进RH-35细胞凋亡,抑制细胞增殖。; 许晓亚靳伟杨刚刚张全义吕中原秦艳丽徐存拴; 关键词：大鼠肝癌细胞细胞凋亡

免疫毒素Onconase-V3的组成型表达及抗肿瘤作用研究: 癌症是目前影响人类健康的几大疾病之一,全球新增癌症患者及死亡病例近一半出现在中国。多年来,手术治疗、放射治疗、化学药物(细胞毒药物)治疗是肿瘤治疗的三个主要手段。但是,化疗药物缺乏组织特异性,它同时也会杀伤正常的组织细胞...; 孙妙囡; 关键词：抗肿瘤药物免疫毒素靶向药物 V3 ONCONASE; 文献传递

长白山林蛙蛙卵Onconase基因的克隆表达及其抗人乳腺癌作用研究: 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。乳腺癌的发生与细胞增殖和凋亡的失衡有关,是细胞经过致瘤因素的刺激,在基因水平上失去对其正常调控,使细胞凋亡受到抑制而造成的异常增生,肿瘤细胞能够和正常细胞争夺营养并造成正常组织与器官受损,而...; 王作昭; 关键词：核糖核酸酶A 人乳腺癌胞外信号调节激酶; 文献传递

豹蛙抗瘤酶的毕赤酵母高效表达、纯化及活性测定被引量：1: 2015年; 豹蛙抗瘤酶(Onconase,ranpirnase,ONC)对体内外多种肿瘤有很强的杀伤作用,是当前全球重点研究的100种新药之一,为获得高表达与高活性的重组豹蛙抗瘤酶(Recombination onconase,rONC),根据成熟ONC的cDNA序列和毕赤酵母密码子偏好性设计基因并提高其GC含量,分泌信号肽采用酵母α交配因子的pre肽,分别构建表达载体pPIC9/ONC、pPIC9K/ONC和pPICZα-A/ONC,并转染毕赤酵母X-33、GS115和SMD1168,筛选阳性克隆并进行诱导表达。在摇瓶规模筛选最佳载体-宿主组合及优化培养条件之后,进行10 L规模最优培养基的筛选,发酵产物经双水相萃取偶联G50凝胶层析分离纯化。结果表明,pPICZα-A/X-33/ONC组合表达量优于其他组合,且在p H 5.5、23℃条件下诱导7 d,最高表达量达到13 mg/L;在10 L规模条件下,rONC于pH 5.5的低盐基础培养基(Lower basic salt medium,LBSM)、甲醇浓度0.25%条件下诱导7 d,最高表达量为180 mg/L;纯化后的rONC纯度≥95%,收率高于90%;生物活性检测发现,rONC在体外能杀伤多种癌细胞。初步建立了rONC的高效表达与纯化体系,为后续的功能和作用机理研究奠定了一定基础。; 杨刚刚马诚凯张全义史世会王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红张瑞刚徐存拴; 关键词：双水相萃取活性测定

豹蛙抗瘤酶与人血清白蛋白融合蛋白的毕赤酵母高效表达与活性测定被引量：4: 2015年; 豹蛙抗瘤酶(Onconase,ONC),又称豹蛙酶,对多种肿瘤细胞和实体瘤具有显著杀伤作用,为得到高表达的ONC,利用HSA在毕赤酵母系统中的表达优势,将HSA和ONC融合进行毕赤酵母表达并分离纯化。设计融合基因HSA-(Gly4Ser1)3-ONC,简称HSA-ONC,构建至3种表达载体p PIC9、p PIC9K、p PICZα-A并分别转染X-33、GS115和SMD1168 3种宿主菌,在摇瓶和10L规模优化表达条件和双水相偶联柱层析分离纯化目的蛋白并测定其生物学活性。结果显示,在1 L摇瓶规模下,p PICZα-A/X-33/HSA-ONC组合的表达量优于其他组合,且在p H7,温度23℃条件下诱导10 d,表达量达到最高(235 mg/L)。在10 L规模进行不同培养基条件的发酵,r HSA-ONC于p H 7的低盐基础盐培养基(Low salt basic salt mediu m,LS-BSM),甲醇浓度0.25%条件下诱导10 d,表达量达到最高(2.02 g/L)。经双水相萃取偶联DEAE离子交换层析可得到纯度≥95%、收率高于70%的r HSA-ONC。生物活性检测发现,r HSA-ONC在体外能抑制多种癌细胞增殖。r HSA-ONC的表达量较r ONC提高1倍(同等摩尔量情况下),同时在体外抑制多种癌细胞增殖。; 杨刚刚马诚凯史世会张全义王泽吕中原王绪洋许晓亚崔晴晴张继红丁一徐存拴; 关键词：双水相萃取

核糖核酸酶Onconase的稀释复性条件优化研究被引量：3: 2013年; 采用稀释复性方法从包涵体中复性得到有活力的Onconase蛋白,并与传统的醋酸沉淀复性方法进行了比较,考察了复性温度、尿素浓度、氧化型谷胱甘肽(GSSG)加入时间对复性效果的影响。结果表明,在最佳复性温度为4℃、采用最佳复性体系(先加GSSG的含2mol·L-1尿素的稀释复性缓冲溶液)时,复性纯化后Onconase含量和回收率明显高于醋酸沉淀复性法。; 郭红徐殿胜王庆诚; 关键词：核糖核酸酶包涵体稀释复性分离纯化

核糖核酸酶Onconase制备过程优化研究: 豹蛙酶(Onconase，简称ONC)是一种从北极豹蛙卵母细胞和早期胚胎中提取的核糖核酸酶，属于RNaseA超家族，研究证实其对许多肿瘤细胞和实体肿瘤都具有杀伤作用。<br>　　以一株表达豹蛙酶的基因工程菌为...; 郭红; 关键词：核糖核酸酶发酵工艺纯化方法

相关作者