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红海海绵素A对小鼠精子冷冻活力的影响
2013年
目的通过建立最佳的冷冻降温速率,研究红海海绵素A(1atrunculinA,LATA)对精子的冷冻保护作用。方法用冷冻液平衡后的ICR小鼠附睾精子置于液氮面上方不同的位置,用快速(-240℃/min)、中速(-109℃/min)、慢速(一41℃/min)和超陵速(-12℃/min)的降温速率分别冷冻5或10min后投入液氮冻存。结果在液氮上方冷冻5min或10min对小鼠精子的复苏活力没有影响。而用超慢速冷冻速率冻存精子的复苏活力显著高于其他组,中速冷冻速率保存的精子的复苏活力在各实验组中最低。用0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L和4mmol/L的红海海绵素A处理小鼠精子后,再用趋陵速冷冻速率保存,结果用0.5mmol/L、1mmol/L和2mmol/L的红海海绵素A处理的精子未能提高精子的复苏活力,而高浓度的红海海绵素A(4mmol/L)反而降低了精子的复苏活力度。结论红海海绵素A对精子的冷冻保护作用值得商榷。
程芙蓉杨世华
关键词:小鼠精子
Inhibition of latrunculin-A on dexamethasone-induced fibronectin production in cultured human trabecular meshwork cells被引量:2
2011年
AIM: To determine the effects of a low dose latrunculin (LAT)-A on dexamethasone (Dex)-induced upregulation of extracellular matrix proteins fibronectin (FN) in cultured human trabecular meshwork (HTM) cells. METHODS: HTM cells were cultured to confluent and incubated with 0.4 mu mol/L Dex and/or 0.05 mu mol/L LAT-A. FN expression in HTM cells was evaluated by Western blot and immunofluorescence microscopy. RESULTS: Dex up-regulated FN production in HTM cells, failed to do so when co-incubated with LAT-A. LAT-A decreased production of FN in cultured HTM cells. CONCLUSION: This study indicated that LAT-A may modulate the expression of fibronectin in trabecular meshwork to achieve treatment for steroids and other types of glaucoma. It has an important prospect as an intraocular pressure-lowering drug.
Yun Wang,Su-Ping Cai
关键词:DEXAMETHASONEFIBRONECTIN
AtFH8 Is Involved in Root Development under Effect of Low-Dose Latrunculin B in Dividing Cells被引量:7
2011年
Formins have been paid much attention for their potent nucleating activity. However, the connection between the in vivo functions of AtFHs (Arabidopsis thaliana formin homologs) and their effects on actin organization is poorly understood, in this study, we characterized the bundling activity of AtFH8 in vitro and in vivo. Biochemical analysis showed that AtFH8(FH1FH2) could form dimers and bundle preformed actin filaments or induce stellar structures during actin polymerization. Expression of truncated forms of AtFH8 and immunolocalization analysis showed that AtFH8 localized primarily to nuclear envelope in interphase and to the new cell wall after cytokinesis, depending primarily on its N-terminal transmembrane domain. GUS histochemical staining showed AtFH8 was predominantly expressed in Arabidopsis root meristem, vasculature, and outgrowth points of lateral roots. The primary root growth and lateral root initiation of atfh8 could be decreased by latrunculin B (LatB). Analysis of the number of dividing cells in Arabidopsis root tips showed that much fewer dividing cells in Lat B-treated atfh8 plants than wild-type plants, which indicates that AtFH8 was involved in cell division. Actin cytoskeleton in root meristem of atfh8-1 was more sensitive to LatB treatment than that of wild-type. Altogether, our results indicate that AtFH8 is an actin filament nucleator and bundler that functions in cell division and root development.
Xiu-Hua XueChun-Qing GuoFei DuQuan-Long LuChuan-Mao ZhangHai-Yun Ren
关键词:FORMIN
Lat-B对家兔巩膜胶原重塑的影响
2010年
目的研究latrunculin-B(Lat-B)对兔巩膜通透性的影响,为细胞骨架因子在青光眼治疗中的应用及眼后节疾病的药物传递研究提供新的思路和理论依据。方法 36只家兔随机分为平衡盐液(BSS)组、二甲基亚砜(DMSO)组及Lat-B组,每组12只,分别用BSS、DMSO和Lat-B局部点眼,于用药前1h及用药后1、2、3、4、5、6、24h分别测量眼压,于24h后处死动物并获取部分巩膜组织,自制巩膜滤过装置测试巩膜通透性的变化,部分巩膜组织行免疫组织化学染色以检测前部巩膜组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和组织金属蛋白酶-2抑制剂(TIMP-2)的表达。光学显微镜下观察实验兔眼部各组织结构的形态学变化。结果 Lat-B组、BSS组与DMSO组点眼前后各时间点眼压的总体变化差异有统计学意义(F=25.76,P<0.01),Lat-B点眼后不同时间点与点眼前比较眼压呈下降趋势,差异有统计学意义(Ftime=4.50,P<0.01),点眼后1h即可引起眼压降低,降眼压作用可持续24h;BSS组与DMSO组点眼前后各时间点眼压变化的差异无统计学意义(P>0.05);Lat-B点眼后的前部巩膜对BSS的滤过较BSS组和DMSO组明显增加,3组的总体比较差异有统计学意义(F=47.50,P<0.01);Lat-B组、BSS组和DMSO组MMP-2及TIMP-2表达的吸光度(A)值的总体比较差异均有统计学意义(F=28.70,F=22.30,P<0.01)。MMP-2、TIMP-2的表达Lat-B组与BSS组比较差异有统计学意义(P<0.01),与DMSO组比较二者的表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.01);BSS组和DMSO组间MMP-2及TIMP-2比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Lat-B能够有效降低眼压,明显提高巩膜的房水流出易度,并可通过上调MMP-2、TIMP-2的表达导致巩膜胶原重塑。
李卫国张磊宫月荣雷宁玉考华婷何湘珍
地塞米松及Lat-A对人眼小梁细胞蛋白质表达的影响
2010年
目的探讨地塞米松(Dex)及latrunculin-A(Lat-A)处理后人眼小梁细胞蛋白质表达的变化。方法正常供体人眼小梁细胞培养后用Dex及Lat-A处理,经二维凝胶电泳分离小梁细胞蛋白质,分析凝胶电泳图谱,选取部分差异凝胶斑点并采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定蛋白质。结果采用24cmIPG胶条获得正常人眼小梁细胞对照组、Dex组、Dex+Lat-A组以及Lat-A组的二维电泳凝胶图谱,得出不同培养条件下人眼小梁细胞蛋白质表达的差异。应用GDPiMALDI-TOFMS得出不同培养条件下差异表达的蛋白质斑点并成功鉴定出其中的24种蛋白质,主要包括细胞骨架相关的蛋白、热休克蛋白、氧化还原相关的蛋白和糖代谢相关的蛋白4类蛋白质。ADLH和Rab蛋白在Lat-A组的人小梁细胞中表达增加,但在Dex组表达减少,而热休克蛋白27(HSP27)和人CRMP2呈现相反的结果。结论成功建立Dex及Lat-A诱导人眼小梁细胞蛋白质表达图谱。Dex及Lat-A能诱导人眼小梁细胞的蛋白质表达变化,可能与青光眼致病的分子机制相关。
林羡钗余敏斌刘旭阳邱璇吴开力
关键词:小梁细胞蛋白质组学地塞米松
烟草BY-2细胞和蚕豆叶肉细胞原生质体微丝骨架及latrunculin B处理对其分布的影响被引量:2
2010年
用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀网络结构;共聚焦显微成像显示了随latrunculin B处理时间的延长微丝解聚和微丝骨架分布的动态过程.建立原生质体制备、微丝骨架荧光染色、latrunculin B处理及激光共聚焦显微观察的实验体系为进一步研究植物微丝骨架的功能奠定了基础.
叶露飞刘成科孟春梅洪健
关键词:原生质体微丝骨架LATRUNCULIN激光共聚焦显微镜
BY-2原生质体微丝骨架及Latrunculin B处理对其分布的影响
@@微丝骨架是植物细胞骨架的重要组分之一,它主要由肌动蛋白组装的螺旋状多聚体和肌动蛋白结合蛋白组成。前者又称为肌动蛋白纤丝,由F.肌动蛋白和G-肌动蛋白组成,参与细胞内众多生理活动。研究植物细胞微丝骨架通常采用原生质体系...
叶露飞刘成科孟春梅洪健
关键词:微丝骨架
文献传递
Lat-B对家兔房水葡萄膜巩膜引流通路的影响
2010年
目的:研究Lat-B对家兔眼内压、葡萄膜巩膜通路的影响。方法:兔眼局部应用Lat-B,BSS和DMSO,于用药前1h及用药后1,2,3,4,5,6,24h测量眼压后部分免疫荧光组通过前房内注入微量示踪剂异硫氰酸荧光素牛血清白蛋白(fluorescein isothiocyanate bovine serum albumin,FITC-BSA),于点眼后2,4,6,8,10h各处死家兔2只,摘除双侧眼球作冰冻切片,于荧光显微镜下观察并确定睫状体、脉络膜上腔、前、后巩膜和脉络膜的荧光强度等级。结果:Lat-B滴眼后处理眼眼压不同时间点与滴眼前比较眼压呈下降趋势,差异有显著性(P<0.05),1h即可引起眼压降低,24h仍有效,BSS组与DMSO组未引起眼压下降;葡萄膜巩膜途径通路3组之间在睫状体、脉络膜上腔、前、后巩膜和脉络膜的荧光强度,各部位均为Lat-B组最强,Lat-B与BSS组和DMSO组相比差异均有显著性(P<0.05),BSS组和DMSO组相比差异无显著性。结论:Lat-B能够有效降低眼压,1h即可起效,且24h仍有效。Lat-B可以增加葡萄膜巩膜途径通路的房水流出率,具有治疗青光眼的应用前景,尤其是正常眼压性青光眼、开角性青光眼。
李卫国何湘珍
关键词:青光眼
Latrunculin B处理后青杄花粉管微丝骨架和细胞超微结构的观察被引量:4
2008年
本文应用荧光探针标记技术和透射电子显微镜研究微丝抑制剂(latrunculin b,LATB)处理青杄花粉管后,对其微丝骨架和超微结构的影响。结果表明:LATB剂量依赖性地抑制青杄花粉萌发和花粉管生长;应用荧光探针FITC-鬼笔环肽标记花粉管中的微丝,发现用正常培养基培养的花粉管中,束状的F-actin以与花粉管长轴平行的方向排列,从花粉管基部一直延伸到花粉管亚顶端,而LATB处理导致微丝的解聚。通过透射电镜观察发现,LATB处理使花粉管顶端的透明区消失,顶端区域被一些空泡、脂粒等占据,线粒体膜破裂,高尔基体片层断裂成泡状结构以至解体。上述研究结果表明:微丝抑制剂LATB通过破坏花粉管微丝的组装和超微结构影响青杄花粉萌发及花粉管生长,因此微丝在青杄花粉萌发、花粉管极性生长模式的建立和维持过程中起重要作用。
田翠婷郑茂钟罗茂春林金星吕洪飞
关键词:青杆花粉花粉管微丝超微结构
低剂量微丝解聚剂对地塞米松诱导的牛小梁细胞骨架及基质蛋白TSP-1的影响被引量:3
2007年
目的研究低剂量的肌动蛋白微丝解聚剂Latrunculin(LAT)-A对地塞米松诱导的牛小梁细胞肌动蛋白细胞骨架及细胞外基质蛋白TSP-1产生的影响。方法体外培养牛眼小梁细胞,分别用地塞米松和LAT-A在不同条件下孵育,免疫荧光显微镜观察细胞骨架形态和结构的改变并用免疫组织化学法对TSP-1的表达进行定位和半定量分析。结果培养的小梁细胞NSE染色阳性,ⅧR∶Ag染色阴性,TSP-1染色阳性。经地塞米松诱导后微丝重组杂乱,细胞外TSP-1表达减弱。LAT-A可部分逆转此重组,促进其恢复;LAT-A可抑制TSP-1表达,且随作用时间的延长抑制作用更强。结论低剂量的LAT-A可以逆转由地塞米松诱导的细胞骨架的改变,并对TSP-1的产生有抑制作用。
曹娟张德秀
关键词:小梁细胞凝血酶敏感蛋白-1

相关作者

刘成科
作品数:13被引量:31H指数:4
供职机构:浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所
研究主题:百合无症病毒 ELISA 单克隆抗体 单克隆抗体制备 细胞病理学
考华婷
作品数:18被引量:44H指数:4
供职机构:滨州医学院附属医院
研究主题:异体巩膜移植 眼睑再造 切除术后 巩膜 晶状体上皮细胞
宫月荣
作品数:8被引量:44H指数:4
供职机构:滨州医学院附属医院
研究主题:康柏 普治 教育模式 教学质量 临床教育
孟春梅
作品数:9被引量:32H指数:3
供职机构:浙江大学农生环测试中心
研究主题:建兰花叶病毒 单克隆抗体 齿兰环斑病毒 细胞定位 外壳蛋白
张磊
作品数:66被引量:147H指数:6
供职机构:滨州医学院附属医院
研究主题:近视 形觉剥夺性近视 基质金属蛋白酶-2 青少年 视网膜