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携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡的制备: 2020年; 目的制备携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡并测定其与hVEGF165表达载体的结合率。方法制备携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡,测定其粒径大小、浓度、Zeta电位;测定与hVEGF165表达载体的结合率。结果阳离子脂质微泡90%粒径范围:1μm-3μm,平均粒径:(1.31±0.23)μm,平均浓度:(3.17±0.16)×108/mL,Zeta电位:(28.00±1.84)mV,与hVEGF165表达载体的最大结合率:(35.34±0.71)%。结论采用机械振荡法制备的阳离子脂质微泡,粒径分布良好,浓度、Zeta电位稳定,与hVEGF165表达载体结合率较高,是携带基因表达的良好载体系统。; 伍巧玲丁云川冉海涛王志刚陈剑王庆慧张键; 关键词：超声造影剂 HVEGF165

治疗肺动脉高压的携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡的制备: [目的]制备两种MBs(普通脂质MBs、阳离子脂质MBs),检测其理化特性;制备两种携带hVEGF165表达载体脂质微泡,检测其基因质粒携带率,评估两种载体携带基因质粒的能力。[方法]采用薄膜水化法和机械振荡法制备两...; 伍巧玲; 关键词：超声造影剂 HVEGF165

利用转基因家蚕丝腺表达重组hVEGF165的研究: 鳞翅目昆虫家蚕（Bombyx mori）是重要的产丝昆虫，至今已被人类饲养利用逾5000年。家蚕丝腺是合成和分泌蚕丝蛋白的专一场所（一头家蚕可生产约0.5克丝蛋白），是蚕丝业最为核心的生物学基础。　　近些年来，随着生物技...; 张天洋; 关键词：转基因家蚕人血管内皮生长因子生物学活性; 文献传递

腺相关病毒介导hVEGF165基因和SDF-1基因共转染小鼠内皮祖细胞的实验研究: 目的：检测腺相关病毒介导hVEGF165和SDF-1基因共转染小鼠EPCs后mRNA及蛋白质的表达水平。　　方法：首先利用基因重组技术构建CAG-VEGF165-T2A-mcherry-WPRE和pHBAAV-tfeb-...; 陶星宇; 关键词：内皮祖细胞 MRNA

加味丹参饮含药血清对hVEGF165转染BMSCs促IRI大鼠心肌血管新生的影响被引量：3: 2016年; 目的探讨加味丹参饮含药血清诱导血管内皮生长因子165(hVEGF165)转染后BMSCs移植IRI大鼠的心肌血管新生的影响。方法构建hVEGF165转染BMSCs,将hVEGF165转染后PⅢ/Ⅳ BMSCs分别加入加味丹参饮含药血清和空白血清,体外诱导48 h。建立IRI大鼠模型,将实验大鼠分为4组,A组:假手术组;B组:IRI组;C组:hVEGF165转染组;D组:hVEGF165转染+加味丹参饮含药血清组。移植第7天,HE染色观察心肌组织形态学变化并做微血管计数。结果移植7 d后,与A组相比,B组心肌微血管有一定再生,C组及D组与B组相比,微血管数上升明显,差异具有统计学意义(P<0.05);D组与C组相比,微血管数上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IRI大鼠模型在移植hVEGF165转染BMSCs后,新生血管增多,加味丹参饮含药血清和hVEGF165转染联合应用效果更佳。; 杨洋黄政德阮甦梁晖严年文林昱高千仞; 关键词：加味丹参饮 HVEGF165 血管新生

hBMP2/hVEGF165双基因腺病毒转染BMSCs复合多孔n-HA/PA66修复兔桡骨缺损的实验研究: 骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）因具有多向分化潜能而被公认为理想的种子细胞。骨形态发生蛋白2（Bone morphogenetic protein2，B...; 管大凡; 关键词：血管内皮生长因子165 聚酰胺66

hBMP2/hVEGF165双基因腺病毒修饰BMSCs复合n-HA/PA66修复骨缺损影像学观察被引量：4: 2015年; [目的]探讨携带h BMP2/h VEGF165双基因重组腺病毒共修饰BMSCs复合多孔n-HA/PA66修复兔桡骨大段骨缺损在不同时相点影像学动态变化和临床影像评估的可靠性。[方法]选取40只成年新西兰大白兔,雄性,体重2.8-3.1 kg,采用完全随机法分为2大组,每组20只,手术制作15 mm双侧桡骨中段骨缺损模型。A1组：左侧骨缺损处不植入任何材料为空白对照组;A2组：右侧骨缺损处植入h BMP2/BMSCs/n-HA/PA 66人工骨材料;B1组：左侧骨缺损处植入BMSCs/n-HA/PA66人工骨材料;B2组：右侧骨缺损处植入h BMP2/h VEGF165/BMSCs/n-HA/PA 66人工骨材料。分别于术后2、4、8、12周进行X线、CT三维重建观察和甲苯胺蓝组织染色观察。[结果]B2组各个时期Lane-Sandhu法X线射线评分均高于其他各组,差异有统计学意义（P〈0.05）,A2组优于B1组（P〈0.05）,A1组最差（P〈0.05）;且CT三维重建骨形成量和组织染色效果均优于同期其他各组。[结论]h BMP2/h VEGF165双基因重组腺病毒共修饰BMSCs复合多孔n-HA/PA66人工骨材料治疗兔大段骨缺损,影像学观察,直观、形象地显示了其持久、稳定、高效的骨修复作用,为基因治疗复合人工骨材料修复骨缺损提供了良好的实验依据。; 管大凡陈月芹刘洪美张聪李庆伟陈国武梁啸孟纯阳; 关键词：骨形态发生蛋白2 血管内皮生长因子165

hBMP2与hVEGF165双基因腺病毒载体转染BMSCs复合n-HA/PA66组织工程骨构建及检测被引量：3: 2015年; [目的]探讨腺病毒介导共表达人骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)和血管内皮生长因子165(vascular endothelia growth factor 165,VEGF165)载体转染兔骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(nano-hydroxyapatite/polyamide66,n-HA/PA66)体外构建组织工程骨的可行性。[方法]采用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),取第3代BMSCs进行细胞表型鉴定;第3代BMSCs作为细胞实验对象,实验共分2组:Ad-BMP2-VEGF165为实验组和Ad-GFP为对照组;首先用不同感染复数感染BMSCs,并进行ELISA和Western blot检测细胞h BMP2和h VEGF165的表达;其次将感染后的细胞接种到n-HA/PA66生物材料上,7 d后扫描电镜观察细胞贴附、生长状况;同时,7 d后消化收集贴附n-HA/PA66上的细胞,Western blot检测贴附生物材料细胞中骨钙素(osteocalcin,OC)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达,以及3 d和7 d后的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定。[结果]第3代细胞表面高表达CD29(99.82%)和CD44(94.14%),低表达CD14(3.11%)和CD34(0.34%);腺病毒感染后h BMP2和h VEGF165蛋白水平高表达;扫描电镜见感染细胞分布均匀,生长状态良好。实验组与对照组相比,复合n-HA/PA66后Western Blot检测显示OC和OPN表达和ALP活性均较高,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]Ad-BMP2-VEGF165双基因腺病毒感染BMSCs后目的蛋白较高量表达,同时感染后BMSCs可以在n-HA/PA66进行良好的黏附、生长、增殖、矿化,Ad-BMP2-VEGF165双基因表达组织工程骨构建成功。; 张聪刘洪美李庆伟陈国武梁啸孟纯阳; 关键词：骨形态发生蛋白2 血管内皮生长因子165 生物支架

超声微泡介导hVEGF165基因靶向转染糖尿病鼠缺血骨骼肌: 2015年; 目的:探讨超声介导微泡破裂法促进血管内皮生长因子(VEGF)基因在糖尿病鼠缺血骨骼肌内转染的作用,评估其转染效率和安全性。方法:建立糖尿病鼠缺血骨骼肌动物模型,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,观察接受超声及微泡治疗组h VEGF165基因在糖尿病鼠缺血骨骼肌内表达,并与对照组相比。同时取糖尿病鼠缺血骨骼肌进行HE染色行组织学检查。结果:在超声介导微泡破裂组内,h VEGF165基因表达明显增强(42.87±5.12),与单纯接受质粒治疗组(5.02±1.21)和接受质粒和超声治疗组(8.16±2.43)相比,差异具有统计学意义(P<0.001),HE切片未发现肌组织结构的改变。结论:超声介导微泡破裂法能有效促进外源基因在糖尿病鼠缺血骨骼肌中表达,为糖尿病周围血管疾病的基因治疗提供了实验依据。; 范春艳徐春媚王璐璐毕伟薛晓蕊; 关键词：多普勒超声微泡血管内皮生长因子

Ad-hVEGF165通过调控一氧化氮系统逆转同型半胱氨酸对内皮细胞的损伤被引量：1: 2015年; 目的探讨携带人血管内皮生长因子165基因的重组腺病毒（Ad-hVEGF165）对经同型半胱氨酸（Hcy）损伤的内皮细胞的作用及机制.方法不同浓度Hcy（0、0.05和1.00 mmol/L）刺激人脐静脉内皮细胞CRL-1730 24 h后,分别加入Hcy、空载体重组腺病毒Ad-Track和Ad-hVEGF165作用48 h（分为9组,包括空白组、Hcy0.05组、Hcy1.00组、Ad-Track组、Hcy0.05＋ Ad-Track组、Hcy1.00＋Ad-Track组、Ad-hVEGF165组、Hcy0.05＋ Ad-hVEGF165组、Hcy1.00＋ Ad-hVEGF165组）,采用实时荧光定量PCR和Western blot半定量分析细胞中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）2的mRNA和蛋白相对表达量,二者mRNA和蛋白表达的相关性采用Pearson相关分析.结果 Hcy0.05组和Hcy0.05＋Ad-hVEGF165组eNOS的mRNA和蛋白表达均分别低于空白组和Ad-hVEGF165组（P均＜0.05）.Hcy0.05组、Hcy1.00组与空白组相比,Hcy0.05＋Ad-Track组、Hcy1.00＋ Ad-Track组与Ad-Track组相比,Hcy0.05＋Ad-hVEGF165组、Hcy1.00＋Ad-hVEGF165组与Ad-hVEGF165组相比,细胞内的DDAH2 mRNA和蛋白表达均较低（P均＜0.05）.Ad-hVEGF165组与空白组、Ad-Track组相比,Hcy0.05＋Ad-hVEGF165组与Hcy0.05组、Hcy0.05＋Ad-Track组相比,Hcy1.00＋ Ad-hVEGF165组与Hcy1.00组、Hcy1.00＋ Ad-Track组相比,DDAH2 mRNA和蛋白表达均较高（P均＜0.05）.Pearson相关分析显示,Hcy损伤内皮细胞后DDAH2与eNOS的mRNA及蛋白表达均不相关（r值分别为0.057和0.449,P均＞0.05）;在外源性血管内皮生长因子作用下,DDAH2与eNOS的mRNA和蛋白表达也均不相关（r值分别为0.284和0.432,P均＞0.05）.结论 Ad-hVEGF165调控一氧化氮系统功能,是其逆转Hcy导致的内皮细胞损伤的可能作用机制之一.; 赵莉莉毛用敏张莹师莹宋衍秋; 关键词：血管内皮生长因子类高半胱氨酸一氧化氮

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