龚博
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：清华大学化学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程更多>>
- 谷氨酰胺合成酶腺苷酰化位点的定点突变和产胺的初步研究被引量：3
- 2008年
- 为解决谷氨酰胺合成酶腺苷酰化修饰失活的问题,利用基因定点突变的方法将谷氨酸棒杆菌的谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)腺苷酰化位点由Tyr405突变为Phe405,并在大肠杆菌中获得突变后GS的表达.对比腺苷酰化位点突变前后的重组大肠杆菌pET-3a/GSI和pET-3a/GSIM在高氨环境下的GS活性和谷氨酰胺产量,发现重组菌pET-3a/GSIM在高氨环境下的最大酶活是150U/L,产谷氨酰胺浓度为17.5g/L,分别是pET-3a/GSI酶活(30U/L)的5.0倍和产谷氨酰胺水平(3.4g/L)的5.1倍,GS定点突变使谷氨酸转化为谷氨酰胺的途径得到强化.
- 黄星曾行刘铭龚博胡淼曹竹安
- 关键词：谷氨酰胺大肠杆菌谷氨酰胺合成酶
- 定点突变的谷氨酰胺合成酶的表达条件和在酶法合成谷氨酰胺中的应用被引量：2
- 2008年
- 针对酶法生产谷氨酰胺中高浓度铵盐条件下的谷氨酰胺合成酶(GS)腺苷酰化问题,从谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC14067调取编码GS的基因glnA,将GS的腺苷酰化位点Tyr405定点突变为Phe405,并在大肠杆菌中表达突变后的GS,优化产酶条件。用突变的GS在摇瓶中进行酶催化过程,通过补加酶催化底物谷氨酸钠和氯化铵,可以提高定点突变的GS生产谷氨酰胺的能力,谷氨酰胺产量达到16.8g·L-1;在5L反应器规模的酶催化生产谷氨酰胺过程中,通过调控底物补加方案和反应条件,谷氨酰胺的产量达到34.2g·L-1,谷氨酰胺对谷氨酸的摩尔转化率为96.3%。
- 黄星刘铭龚博曾行张颂怡曹竹安
- 关键词：谷氨酰胺酶催化谷氨酰胺合成酶
