袁方
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人红细胞丙酮酸激酶缺陷的动力学研究
- 目的:研究丙酮酸激酶(PK)缺陷的动力学参数特征,并进一步探讨酶缺陷导致的溶血机理.方法:以昆医附院提供的PK缺陷可疑患者为研究对象,按照国际血液学标准委员会(ICSH)推荐的方法,对PK缺陷一个家系进行活性测定、热稳定...
- 袁方
- 关键词：热不稳定性最适PH人红细胞
- 文献传递
- 结核分枝杆菌H37Ra FadD3基因克隆与表达研究被引量：4
- 2014年
- 为探索FadD3在结核分枝杆菌胆固醇分解代谢中的作用,从结核分枝杆菌H37Ra的全基因组中克隆了FadD3基因,并在大肠杆菌BL21中表达.根据NCBI公布的结核分枝杆菌全基因组序列设计一对引物,PCR扩增FadD3基因.PCR扩增产物与克隆载体pGEM3Zf(+)进行拼接,得到重组基因FadD3-pGEM3Zf(+),再转化到大肠杆菌DH5ɑ得到克隆.PCR检测阳性克隆,再与表达载体pYUB28b拼接,得到重组质粒FadD3-pYUB28b.阳性重组质粒亚克隆到大肠杆菌BL21宿主菌进行自体诱导表达.经过表型筛选及鉴定分析,已成功构建了重组表达质粒FadD3-pYUB28b.SDS-PAGE和Western blotting证实,重组基因FadD3-pYUB28b在大肠杆菌BL21中有表达产物.实验结果表明,以pYUB28b为表达载体,FadD3重组基因在大肠杆菌表达体系于温度分别为18,28℃有包涵体形式的表达蛋白,在37℃无表达产物.
- 袁方陈元晓Stephanie DawesEdward N.Baker
- 关键词：结核分枝杆菌H37RA基因克隆
- 结核分枝杆菌FadD3结构与功能的生物信息学分析被引量：8
- 2015年
- 目的应用生物信息学分析软件预测结核分枝杆菌脂酰辅酶A合成酶(FadD3)氨基酸序列的结构与功能。方法应用生物信息学在线工具NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)、Expasy(http://ca.expasy.org/)、SWISSMODEL(http://swissmodel.expasy.org/)、客户端软件clustalx等进行多重序列比较、同源性分析、同源模建及蛋白功能活性位点分析;应用ProtParam软件(http://web.expasy.org/protparam)预测FadD3基因编码FadD3的蛋白理化性质;采用最小值进化法(the Minimum Evolution method)构建分子进化树。结果 FadD3(Mt-FACS)与其他物种的脂酰辅酶A合成酶(FACS)含相同的保守序列及催化活性位点,第174-185氨基酸残基是AMP结合部位,也是FadD3的保守区域;第422-497氨基酸残基是FACS与底物(脂酸)结合的部位,亦是结核分枝杆菌脂酰辅酶A合成酶的C末端。分子进化分析表明结核分枝杆菌脂酰辅酶A合成酶(Mt-FACS)与睾丸酮丛毛单胞菌脂酰辅酶A合成酶(CtFACS)的进化关系较近,与黑腹果蝇脂酰辅酶A合成酶(Dm-FACS)的进化关系较远。结论生物信息学预测提示FadD3是结核分枝杆菌脂类代谢及耐药性研究的潜在靶蛋白。
- 袁方廖泽容张璐陈元晓
- 关键词：结核分枝杆菌生物信息学
- 一种用于临床检验结核分枝杆菌的载玻片存放装置
- 本实用新型涉及医疗技术领域，且公开了一种用于临床检验结核分枝杆菌的载玻片存放装置，包括存放盒，所述存放盒内部的左侧均固定安装有支撑板，所述支撑板上插接有等距离排列的支撑柱，所述支撑柱的左端贯穿并滑动连接至支撑板的左侧，所...
- 袁方陈元晓廖泽容孙云骏刘长瑜马建海曹琨廖云连普荣凯易婷金红灼雷涵马绍驯武天兰李格艳谭娜李永姝徐瑞奇周艳凤李昊向春勇安宇杨紫军徐磊李正东杨金银赵莹李金状刘宇蝉
- 文献传递
- 一种用于分子生物实验室的多功能实验盒
- 本实用新型专利涉及分子实验室实验器材技术领域，是一种用于分子生物实验室的多功能实验盒，包括试验盒和盒盖，该盒盖铰接在试验盒的顶部，所述试验盒的左侧面固定连接有一拉杆盒，所述拉杆盒的顶部垂直活动连接有一伸缩拉杆，所述试验盒...
- 袁方杨华
- 文献传递
