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李清
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1
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供职机构:
中山大学附属第三医院
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广东省卫生厅资助课题
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相关领域:
生物学
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合作作者
郑振达
中山大学附属第三医院
梁莉
中山大学附属第三医院
朱灿胜
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熊肇军
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2012
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sFlt-1对人单核细胞系THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用
被引量:1
2012年
目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体1[sFlt-1(1-3)]对人单核细胞系THP-1细胞向血管内皮生长因子(VEGF)迁移的抑制作用。方法应用腺病毒包装系统构建携带人sFlt-1(1-3)/FLAG融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sFlt-1/FLAG)。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫荧光分析所构建的重组腺病毒载体在L293细胞中的表达。通过Transwell实验观察sFlt-1(1-3)对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用。分别观察5种浓度(0、0.1、1、10和100ng/mL)的VEGF对THP-1的趋化作用。观察4种浓度(0.1、1、10和100ng/mL)的sFlt-1(1-3)/FLAG表达上清对THP-1细胞向VEGF迁移的抑制作用。结果成功构建了Ad-sFlt-1/FLAG融合基因的重组腺病毒载体,通过ELISA和免疫荧光检测显示构建的腺病毒载体携带的sFlt-1(1-3)基因能够在L293细胞中得到表达。在感染重组腺病毒(Ad-sFlt-1/FLAG)的L929细胞培养上清可以检测到sFlt-1(1-3)/FLAG蛋白的表达,浓度为503.7ng/mL。VEGF终浓度为1、10和100ng/mL时,迁移的THP-1细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。sFlt1(1-3)/FLAG浓度为100ng/mL时THP-1细胞迁移数约为sFlt1(1-3)/FLAG浓度为0ng/mL时的25.7%。结论 VEGF对THP-1细胞具有趋化作用,sFlt-1(1-3)可以有效地抑制THP-1细胞向VEGF迁移。
熊肇军
朱灿胜
梁莉
郑振达
李清
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迁移
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