周传文
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 重组人血红素加氧酶2的表达、纯化及性质鉴定
- 2013年
- 血红素加氧酶是广泛存在于哺乳动物细胞中的一类氧化酶,催化血红素氧化生成胆绿素,同时生成三价铁离子和一氧化碳,对调节体内离子平衡,参与机体免疫反应及调节神经系统功能均有重要影响.血红素加氧酶2 （HMOX2）与血红素加氧酶1的功能相似,但分布不同且有着不同的反应动力学,但目前国内外对其研究较少.本文在获得HMOX2全长cDNA的基础上,将其克隆至高表达载体,通过自动诱导系统表达了人血红素加氧酶2重组蛋白（His10-HMOX2）.每升菌液通过Ni-NTA亲和层析和Mono Q阴离子交换层析纯化,最终约可获得92.6 mg纯度为92％蛋白质样品.通过酶活检测,其活性可达到69.51 u/mg,与已报道的血红素加氧酶活性相比较,我们得到的HMOX2具有与之相当的酶活性.同时,通过改变反应温度（20 ～ 95℃）,pH值（pH 6 ～9）等条件,检测了重组His10-HMOX2的催化活性,在温度为40℃和pH为8时,其活性最高.本研究为将来进一步深入了解HMOX2的生化功能及与相关疾病的关系奠定了基础.
- 周传文李益鹏丁澦
- 关键词：原核表达纯化酶活
