目的使用TRIzol法提取RNA,分析在不同种类、不同浓度试剂残留时RNA的吸光度及曲线变化,以阐明影响RNA纯度的因素。方法使用TRIzol试剂提取杜氏盐藻中RNA,经酚、氯仿、异戊醇抽提,醋酸钠和乙醇沉淀、纯化后制成标准品,与不同浓度的酚、TRIzol、氯仿、乙醇、牛血清白蛋白(BSA)等量混匀后制成待测定溶液,使用Nano Drop 2000测定其在230、260、280 nm处的吸光度,计算比值并观察其吸收曲线。结果在不同浓度的酚和TRIzol及0.5 g·L-1BSA残留时,RNA的吸光度比值与吸收曲线均有较明显的变化;高浓度的氯仿残留时其吸光度与吸收曲线的变化较低浓度的变化明显;高浓度的乙醇残留对RNA溶液的吸光度及曲线影响较小,而低浓度的残留反而有较大影响。结论根据RNA溶液的吸光度比值及曲线共同分析可快速准确判断影响RNA质量的残留试剂。
