徐健红
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 溶氧反馈分批补料高密度培养枯草杆菌谷氨酰胺合成酶工程菌被引量：3
- 2010年
- 为了建立枯草杆菌谷氨酰胺合成酶基因重组工程菌BL21/pET28b-glnA的高密度培养工艺,首先以摇瓶培养为基础,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如培养基、pH值、诱导剂浓度及时间等进行优化,再扩大至B IOTECH-5BG（5 L）自动玻璃发酵罐培养,利用溶氧反馈补料策略进行分批补料,并在培养过程中保持20%-50%的溶解氧,7.0-7.5的pH,以及1.0 g/L乳糖诱导12 h,成功地进行了工程菌的高密度培养,最终细菌干重达到48.1 g/L,目的蛋白的表达量占菌体蛋白总量的55%,粗提物酶比活为10.35 U/mg,整个补料过程细菌比生长率稳定的控制在0.1 h-1左右.
- 张锋王期李桂兰徐健红洪素丽岳玲冯志勇殷志敏
- 关键词：谷氨酰胺合成酶重组大肠杆菌分批补料培养
- 利用酵母下脚料高效表达重组谷氨酰胺合成酶研究被引量：2
- 2008年
- [目的]为了降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。[方法]利用酵母下脚料制得废酵母基来培养BL21(DE3)-pET28b-glnA,用乳糖诱导合成GS,并对诱导生长点、诱导浓度、诱导时间、添加碳源氮源以及所得GS的可溶性和酶活进行研究。[结果]酵母下脚料可以替代LB培养基诱导产生重组GS,其最佳诱导条件为:OD600=0.5,乳糖1 g/L诱导12 h;并不需要补加其他碳氮源,GS可溶性90%以上,催化Glu转化为Gln的转化率为94.5%。[结论]生产用高活性干酵母经过短期发酵后,酵母下脚料中的营养活性物质依然很丰富,可以用来培养大肠杆菌诱导目的蛋白表达,从而降低工业用谷氨酰胺合成酶的成本。
- 张正平徐健红殷志敏
- 关键词：谷氨酰胺合成酶乳糖谷氨酰胺
