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卷叶贝母FcLEA-D29基因的克隆及原核表达分析: 2022年; 卷叶贝母作为传统名贵中药材川贝母的最珍贵来源,产量和品质易受逆境影响。为开展对卷叶贝母抗逆基因的发掘研究,该研究基于卷叶贝母转录组数据,获得1个胚胎晚期丰富蛋白(LEA)基因,命名为FcLEA-D29。通过生物信息学分析该基因序列特征及蛋白结构特点,qRT-PCR检测不同组织及温度胁迫响应表达,并通过原核表达系统验证了FcLEA-D29耐受低温的生物学功能。结果显示,FcLEA-D29基因开放阅读框为777 bp,编码258个氨基酸,多重序列比对预测分析该蛋白属于LEA3家族的LEA-D29亚族;qRT-PCR结果表明FcLEA-D29在鳞茎中特异性表达,响应低温诱导,重组表达菌低温胁迫后的生长情况明显好于对照菌,表明FcLEA-D29可能在卷叶贝母鳞茎发育和低温响应中发挥作用。该研究结果将为进一步探讨FcLEA-D29基因在卷叶贝母低温胁迫下次生代谢产物尤其是生物碱积累机制中的作用奠定了基础,为揭示卷叶贝母低温适应提供直接的分子依据。; 肖茂桃胡于琴赵琦李锐; 关键词：LEA 原核表达

一个麻风树Kunitz型蛋白酶抑制剂基因的克隆和鉴定被引量：3: 2016年; 通过PCR技术克隆得到一个麻疯树Kunitz型蛋白酶抑制剂基因(JcKTI)的开放阅读框序列(540bp),对应的基因组序列不含内含子.该序列编码一个含有179个氨基酸残基的成熟多肽,其在根和茎中的表达最高,在叶片和种子中较低.原核表达的重组蛋白显示出一定的抑制牛胰蛋白酶的活性,过表达该基因的转基因烟草蛋白提取物对胰蛋白酶具有一定抑制作用,同时转基因烟草叶片可使进食后的棉铃虫幼虫生长发育受阻,摄食量减少.上述结果暗示JcKTI基因可能在麻疯树根和茎的抗虫应答中扮演着一定的角色.; 牛蓓李锐杨林符佳唐琳徐莺; 关键词：胰蛋白酶抑制剂原核表达转基因抗虫

基于转录组挖掘野生和栽培余甘子类黄酮生物合成关键基因: 2025年; 目的:探讨野生和栽培余甘子类黄酮代谢差异的分子机制,挖掘二者间类黄酮合成差异的关键酶基因。方法:以四川野生余甘子和广东栽培余甘子果实和叶片为实验材料,用Illumina NovaSeq 6000测序平台进行转录组测序,通过Nr、基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库注释分析比较两种余甘子转录组的差异,筛选出类黄酮合成途径的关键酶。结果:共得到81378条Unigene,N50长度为1573 bp。Nr数据库注释发现余甘子与橡胶树的同源性最高,KEGG富集分析表明,相比栽培余甘子,类黄酮合成通路中CHS、CHI、FLS、DFR和LAR主要在野生余甘子果和叶中上调。结论:共鉴定出81个参与类黄酮生物合成途径的基因,其中CHS、FLS、LAR可能是余甘子调控黄酮类化合物积累的关键基因。参与类黄酮合成途径的CHI、CHS、FLS、LAR等关键基因均主要在野生余甘子组织中上调表达,导致野生余甘子黄酮类产物含量高于栽培余甘子,野生环境下干旱和高紫外辐射可能影响余甘子组织中黄酮类化合物的积累模式。; 李永宁王双宜赵琦李锐高继海侯飞侠; 关键词：野生栽培类黄酮生物合成途径

乌桕Cu/Zn超氧化物歧化酶基因克隆及耐盐性被引量：4: 2016年; 利用RT-PCR和RACE技术,成功获得了乌桕Cu/Zn超氧化物歧化酶（SsCu/Zn SOD）的cDNA全长.该序列含有486 bp的完整开放阅读框（Gen Bank登录号为KX169161）,编码161个氨基酸残基,推测其相对分子质量为16.304 k Da,等电点为6.57.对应开放阅读框的基因组序列含有7个外显子和6个内含子.同源性及保守结构域分析显示SsCu/Zn SOD和其他物种的Cu/Zn SOD有较高的同源性（67.26%-88.69%）,含有一个保守的活性区.构建原核表达载体p ET32-SsCu/Zn SOD在大肠杆菌BL21（DE3）中表达,诱导出目的蛋白.转化菌的盐胁迫实验显示,其具有抗盐胁迫的功能.; 牛蓓宋君符佳李锐郭晓恒邹亮雍彬郭静高孝锦; 关键词：克隆原核表达盐胁迫

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李锐