齐浩 作品数:6 被引量:12 H指数:3 供职机构: 黑龙江八一农垦大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
猪传染性胃肠炎病毒S截短蛋白在干酪乳杆菌表面展示表达的研究 2013年 为构建细菌外膜展示表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S截短蛋白的重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),本研究采用RT-PCR扩增TGEV S基因的截短片段BC和AD,构建了重组pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei,利用western blot、间接免疫荧光法(IFA)和流式细胞术(FACS)检测外源蛋白在干酪乳杆菌的表面表达与定位。IFA和FACS结果显示重组菌株pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei表面均能够检测到截短的S和PgsA融合表达蛋白与TGEV阳性血清的特异性荧光信号,而对照菌没有检测到荧光信号。表明本研究构建的的TGEV重组L.casei具有胞外展示表达TGEV抗原蛋白的功能,可以作为TGEV候选疫苗应用于动物试验研究。 田斌 余丽芸 侯喜林 王桂华 刘振格 郭东伟 刘秋晨 齐浩 林红丽关键词:猪传染性胃肠炎病毒 大肠杆菌ETEC 987P菌毛蛋白重组干酪乳杆菌的构建 2015年 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)是引起仔猪腹泻的主要病原菌之一,给我国乃至全世界的养猪业带来了巨大的经济损失。黏附素性菌毛的黏附作用是该菌致病的先决条件[1]。目前,该病的防治主要以药物和疫苗为主,但由于药物的治疗价格昂贵,并且病原菌容易产生耐药性,因此免疫预防成为治疗该病的最佳选择[2]。目前,国内外主要采用灭活苗预防和控制该病,但灭活苗的生产费用比较高,需要佐剂辅助,而且免疫原性较差。此外,灭活苗仅能诱发体液免疫应答,不能产生细胞免疫应答和局部免疫应答;因此,这就迫使我们研制一种安全、有效的新型疫苗来预防该病。 齐浩 侯喜林 王桂华 余丽芸 徐超关键词:产肠毒素性大肠杆菌 干酪乳杆菌 ETEC 体液免疫应答 免疫预防 细胞免疫应答 ETEC 987P基因工程乳酸菌的制备及其免疫效果的检测 产肠毒属性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是人和多种动物感染腹泻的重要病原菌之一,引起新生仔猪腹泻和死亡的几率非常高。黏附素和肠毒素是ETEC致病过程中的主要致病因子... 齐浩关键词:干酪乳杆菌 黏膜免疫 文献传递 锚定NDV HN蛋白重组干酪乳杆菌诱导雏鸡黏膜免疫应答 被引量:4 2012年 以干酪乳杆菌作为呈递抗原活载体,表达新城疫病毒保护性抗原HN蛋白。重组干酪乳杆菌表达外源蛋白后,经SDS-PAGE、Western blot及间接免疫荧光分析,表明目的蛋白表达并展示到乳酸菌表面。将重组菌及空质粒菌株分别滴鼻、点眼免疫雏鸡,于不同时间检测血清样品中特异性IgG;于三免后不同时间采集雏鸡的泪液、气管洗液、胆汁和肠洗液样品,采用间接ELISA方法检测样品的特异性sIgA;用MTT法检测免疫鸡脾淋巴细胞增殖情况,结果显示重组干酪乳杆菌表达系统能刺激动物黏膜免疫反应和系统免疫反应。 孙景秀 王桂华 侯喜林 余丽芸 田斌 侯瑞峰 朱娉慧 周婷婷 齐浩关键词:新城疫病毒 HN蛋白 干酪乳杆菌 黏膜免疫 重组乳杆菌质粒拷贝数测定方法的建立 被引量:4 2015年 为建立一种快速、准确、特异的重组乳杆菌表达质粒拷贝数的定量检测方法,根据SYBR Green I荧光定量分析原理,对重组乳杆菌质粒拷贝数进行分析。借助计算机软件Oligo5对乳杆菌基因组和重组质粒DNA进行分析,设计特异性良好的引物,建立绝对定量的QPCR检测方法。利用该方法对3株重组乳杆菌质粒拷贝数进行测定。试验表明,所建立的实时荧光定量PCR检测方法能够快速、准确、特异、灵敏地确定重组乳杆菌质粒拷贝数,为进一步研究发酵过程中质粒拷贝数和表达水平相关性提供可靠基础。 王宇鹏 齐浩 林红丽 王嵩 侯喜林关键词:乳杆菌 PLA 实时荧光定量PCR ETEC K99、K88菌毛蛋白抗原表位多肽的设计合成及免疫反应 被引量:1 2013年 目的:通过生物信息学及蛋白分析软件等,寻找ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位。方法:通过生物信息学技术、DNAStar Protean蛋白分析软件及网络共享软件对ETEC K88、K99菌毛蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位多肽;采用腹腔注射的方式将合成的抗原表位多肽免疫小鼠,用ELISA法检测血清中产生的抗体,并对免疫小鼠进行了攻毒试验。结果:多肽免疫小鼠后均能诱导抗体产生,攻毒试验表明合成肽对小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。 余丽芸 田斌 温丽娟 王桂华 曹宁 魏小曼 郭东伟 齐浩 刘秋晨关键词:ETEC ETEC 抗原表位 合成肽