倪文琳
- 作品数：3 被引量：20H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pEGFP-C2-ASIC2a真核表达载体的构建及其在大鼠关节软骨细胞中的表达
- 2014年
- 目的通过构建真核表达pEGFP-C2-ASIC2a质粒,转染大鼠关节软骨细胞,建立ASIC2a在关节软骨细胞中过表达的模型,观察ASIC2a mRNA及其蛋白在细胞中的表达。方法从大鼠脑组织中提取目的基因ASIC2a,并用EcoRⅠ和KpnⅠ进行双酶切,同时用这两种酶双酶切质粒pEGFPC2,将其酶切产物按常规方法连接并转化入大肠杆菌DH5a,挑单克隆菌进行培养,提取质粒,再通过双酶切鉴定及测序后,用Lipofectamine 2000将所构建质粒转染入关节软骨细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,使用RT-PCR和Western blot法检测ASIC2a mRNA和蛋白表达,以鉴定模型建立成功与否。结果进行双酶切鉴定目的条带清晰准确,转染后可在荧光显微镜下观察到绿色荧光表达,通过RT-PCR可发现mRNA转录,Western blot法可发现目的蛋白表达。结论成功构建重组pEGFP-C2-ASIC2a表达载体,将用于进一步观察ASICs对软骨细胞的影响。
- 倪文琳唐杰潘春晓葛金芳陈飞虎
- 关键词：PEGFP-C2软骨细胞基因表达蛋白表达
- ASIC2a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞凋亡中的作用及其可能机制
- 酸敏感离子通道(ASICs)是一类配体门控性离子通道,在正常生理环境下,机体内环境受到PH十分精密的调节以至达到稳定。组织酸化可使PH值降至6.0以下,而酸敏感的离子通道可以感受PH值的变化。本课题组前期研究证实在佐剂性...
- 倪文琳
- 关键词：PEGFP-C2软骨细胞类风湿关节炎细胞凋亡
- 文献传递
- 鬼针草总黄酮对急性炎症的保护作用及可能机制研究被引量：19
- 2013年
- 目的:研究鬼针草总黄酮(TFB)对急性炎症的保护作用与可能机制。方法:二甲苯诱导急性小鼠耳肿胀,检测耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量;氟氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症,检测足肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8含量,HE染色观察炎症关节病理学变化,免疫组织化学法检测关节软骨组织ASIC1a蛋白。结果:小鼠急性耳肿胀和AA大鼠原发性炎症中,模型组动物血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量均明显升高,TFB(100、200mg/kg)灌胃给药能降低小鼠耳肿胀度和血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,TFB(67、133mg/kg)可以升高AA大鼠血清IL-2的含量。TFB灌胃给药可以使AA大鼠关节炎性细胞减少,改善病理变化。在AA大鼠原发性炎症中模型组大鼠关节软骨组织ASIC1a表达明显升高,TFB(67、133mg/kg)组ASIC1a的表达明显降低。相关性分析结果显示,AA大鼠原发性炎症中ASIC1a与血清TNF-α、IL-1、IL-8含量呈正相关。结论:TFB对急性炎症具有保护作用,其抗炎机制可能与调节炎症介质释放有关。
- 林梅英陈飞虎葛金芳唐杰倪文琳
- 关键词：鬼针草总黄酮急性炎症
