王石宝
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种兔出血热病毒空衣壳抗原的制备方法
- 本发明涉及基因工程领域，尤其涉及一种兔出血热病毒空衣壳抗原的制备方法。根据本发明的方法包括以下步骤：1)构建包含兔出血热病毒衣壳蛋白VP60基因或优化基因的杆状病毒转移载体，其中，是按家蚕的密码子频率进行密码子优化；2)...
- 张志芳李轶女易咏竹王树坤石小峰王石宝张渭蛟舒惠国
- 文献传递
- 一种兔出血热病毒空衣壳抗原的制备方法
- 本发明涉及基因工程领域，尤其涉及一种兔出血热病毒空衣壳抗原的制备方法。根据本发明的方法包括以下步骤：1)构建包含兔出血热病毒衣壳蛋白VP60基因或优化基因的杆状病毒转移载体，其中，是按家蚕的密码子频率进行密码子优化；2)...
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- 水貂细小病毒空衣壳抗原的制备及其免疫原性研究
- 水貂细小病毒(MEV)VP2蛋白是该病毒的主要结构蛋白，是病毒免疫保护性抗原。为研发水貂细小病毒基因工程疫苗，对该病毒的主要结构蛋白VP2编码基因的序列进行密码子优化并人工合成。利用大肠杆菌表达系统表达纯化了VP2重组蛋...
- 江峰王国增夏振强李轶女王石宝王金辉张志芳
- 关键词：病毒样颗粒基因工程疫苗
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型分离株ORF63基因的序列特征及表达与启动子活性分析被引量：2
- 2012年
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltMNPVⅡ)分离株是繁殖率和毒力极强的新型病毒株,ORF63是该病毒分离株的一个功能未知基因。从SpltMNPVⅡ分离株基因组中克隆了ORF63。序列分析表明,该基因读码框为1 071 bp,编码356个氨基酸,蛋白质分子质量为41.3 kD;起始密码子ATG上游存在一个早期和晚期启动子基序,编码蛋白序列含有CNX、MutH等多种结构域。启动子活性和转录时相分析表明ORF63是一个早、晚期表达的基因,在病毒感染4 h和18 h时有2个转录峰,24 h以后转录水平略有下降,但总体趋于稳定。构建该基因的原核表达载体pET-28a-ORF63,并转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体,Western blot检测制备的多克隆抗体特异性较好,效价可达1∶3 200以上。由以上结果推测,SpltMNPVⅡ分离株的ORF63基因是一个早期和晚期均有表达的病毒基因,可能与SpltMNPVⅡ感染宿主细胞后自身DNA的复制有关,参与早期芽生病毒(BV)的发生和晚期包涵体衍生病毒(ODV)的成熟2个过程。
- 刘惠芬高绘菊王石宝江峰李轶女张志芳牟志美
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltMNPV Ⅱ)ORF117基因的结构和功能研究
- 2016年
- 为了研究斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(Splt MNPVⅡ)中ORF117基因(编码GP117蛋白)的结构和功能,根据其核苷酸序列和氨基酸序列进行了生物信息学分析,以此为基础对该基因的启动子活性和转录时相进行分析,表达纯化了GP117蛋白的部分序列以制备豚鼠来源多克隆抗体,并利用该抗体对ORF117基因的表达时相和GP117蛋白在细胞中的定位进行了分析。生物信息学分析表明该基因全长1 203 bp,编码400个氨基酸的蛋白质,预测分子量为45.5 k Da,等电点为5.06;启动子活性和转录时相分析结果表明ORF117是一个晚期表达的基因;原核表达抗原免疫制备的多克隆抗体效价可以达到1∶3 200,利用该抗体对其表达时相的分析进一步验证了ORF117为晚期表达基因,免疫荧光检测表明编码的蛋白多存在于细胞质中。
- 刘兴健江峰王石宝李轶女张志芳胡小元
- 关键词：斜纹夜蛾
