赵丽
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MLH1R217C/BRAFV600E突变型家族性甲状腺乳头状癌永生化细胞系的建立及鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的建立家族性甲状腺乳头状癌(FPTC)永生化细胞系,为研究家族性非髓样甲状腺癌(FNMTC)提供新的途径。方法选取FPTC患者的肿瘤标本,采用消化法分离原代细胞。使用改良的DMEM/F12培养基,添加促甲状腺激素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、表皮细胞生长因子(EGF)及氢化可的松等进行培养。在原代细胞早期分2种方式导入外源基因SV40T/TERT用于诱导永生化。利用RT-PCR检测甲状腺过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(TG)、促甲状腺激素受体(TSHR)、钠/碘共同转运体(NIS)等基因的表达,同时利用免疫荧光技术检测TPO及磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)蛋白的表达。提取该患者外周血DNA,进行突变基因的检测。提取细胞基因组PCR扩增后测序,进行突变基因的检测。结果分离的FPTC原代细胞呈梭形或不规则多角形贴壁生长;细胞生长6个月,转染SV40T组(标记为FPTC-S)传代至p26,FPTC细胞传代至p23,转染SV40T+h TERT组(标记为FPTC-ST)传代至p19,细胞增殖能力较好;FPTC-S与FPTC-ST细胞均能够在基因水平稳定表达TPO、TG与TSHR;患者外周血中存在MLH1 R217C胚系突变;原代细胞存在BRAF V600E突变;原代细胞及永生化的细胞系中均存在MLH1 R217基因突变。结论本研究初步建立了FPTC永生化细胞系,且该细胞系中存在MLH1 R217C及BRAF V600E突变,该细胞系将为研究以上突变及其相互作用关系提供研究模型。
- 郝伟静于洋王青松赵丽叶艳董莉李健森孟祥睿运新伟高明
- 关键词：细胞培养技术永生化细胞系MLH1BRAF
- TBX2基因沉默抑制卵巢癌细胞增殖同时促进细胞衰老发生被引量：2
- 2017年
- 卵巢癌已成为致死率最高的妇科恶性肿瘤,缺乏特异性分子靶点是引起其高致死率的重要因素之一.TBX2是发育相关转录因子T-box基因家族成员之一,已证实其在黑色素瘤等多种肿瘤中异常表达.本实验通过免疫组化检测了人良性卵巢囊肿组织与卵巢癌组织中TBX2蛋白表达,并采用CCK8法、克隆形成实验、SA-β-Gal染色等方法,分析了在卵巢癌细胞中敲低TBX2后对细胞增殖和衰老的影响.结果表明TBX2在卵巢癌组织中高表达,同时TBX2基因沉默抑制了卵巢癌细胞增殖和克隆形成,诱导了P21WAF1和P16INK4A表达上调,促进了细胞衰老发生.
- 张雁袁树楷李晓萌温丽琪赵丽
- 关键词：TBX2卵巢癌细胞衰老细胞增殖
