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一种长野芽孢杆菌普鲁兰酶突变体Pul324及其应用: 一种长野芽孢杆菌普鲁兰酶突变体Pul324，其获得方法是利用现代酶工程技术对来源于长野芽孢杆菌（Pullulanibacillusnaganoensis）普鲁兰酶氨基酸序列进行分子改造，通过PCR方法缺失原酶上的前108...; 谢能中黄日波王青艳秦艳米慧芝朱绮霞申乃坤朱婧陆艳曹薇黎贞崇陈东; 文献传递

产普鲁兰酶克雷伯氏菌的分离鉴定及酶学性质研究被引量：5: 2013年; 利用曲里苯蓝法从淀粉加工厂废水氧化池酸性污泥样品中筛选普鲁兰酶产生菌,对筛选到的GXAS-38菌株进行形态观察、生理生化特征分析、16SrDNA序列系统发育分析和普鲁兰酶酶学性质研究,并用PCR方法克隆GXAS-38菌株的普鲁兰酶基因。结果表明,GXAS-38菌株属于肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),其产普鲁兰酶的最适反应温度为60℃,在温度35～50℃时酶活较稳定;最适反应pH值5.5,在pH值5.0～7.5时酶活较稳定。Ca2+、Na+和Li+对GXAS-38菌株的普鲁兰酶活性有激活作用;Cu2+、Zn2+、Co2+、Mn2+、Fe2+、Fe3+和Ba2+对GXAS-38菌株的普鲁兰酶活性有抑制作用;螯合剂EDTA能够强烈地抑制GXAS-38菌株的普鲁兰酶活性,GXAS-38菌株的普鲁兰酶反应需要金属离子参与。GXAS-38菌株完整的普鲁兰酶编码基因全长3291bp,编码1096个氨基酸。; 谢能中王青艳米慧芝朱绮霞秦艳曹薇朱婧陆雁黄日波; 关键词：普鲁兰酶肺炎克雷伯氏菌酶学性质基因克隆

一种长野芽孢杆菌普鲁兰酶突变体Pul324及其应用: 一种长野芽孢杆菌普鲁兰酶突变体Pul324，其获得方法是利用现代酶工程技术对来源于长野芽孢杆菌（Pullulanibacillusnaganoensis）普鲁兰酶氨基酸序列进行分子改造，通过PCR方法缺失原酶上的前108...; 谢能中黄日波王青艳秦艳米慧芝朱绮霞申乃坤朱婧陆艳曹薇黎贞崇陈东

木薯生料发酵生产高浓度燃料乙醇工艺研究被引量：5: 2015年; 【目的】对木薯生料发酵生产高浓度燃料乙醇的工艺进行研究,为其工业化生产奠定基础。【方法】首先通过单因素试验确定发酵中主要影响因素的最佳水平,然后利用响应面法对主要因素的相互作用进行研究,最后对发酵温度进行梯度降温控制,以提高乙醇的产量。【结果】单因素试验确定主要影响因素的最佳水平:颗粒淀粉水解酶用量为0.8GAU/g木薯粉,底物浓度为36%(W/V),初始pH值为4.2。响应面法优化的结果:颗粒淀粉水解酶用量为0.82GAU/g木薯粉,底物浓度为37%(W/V),初始pH值为4.3。对发酵温度进行梯度降温控制,则可降低醪液残糖,提高原料转化率。在技术集成基础上,对木薯生粉发酵96h,醪液乙醇产量可达16.24%(V/V),残还原糖含量为0.29%(W/V),残总糖含量为1.81%(W/V)。与初始条件相比,乙醇产量提高25%。【结论】木薯生料发酵生产高浓度燃料乙醇,在技术集成基础上可降低能耗,节约生产成本,具有较好的工业化应用前景。; 申乃坤曹薇王青艳秦艳朱婧朱绮霞米慧芝黄日波; 关键词：生料发酵响应面法燃料乙醇木薯

Bacillius naganoensis普鲁兰酶基因的分子改造及酶学性质研究: 2014年; 目的：通过缺失原酶上氨基酸残基，提高普鲁兰酶的酶活，并对其突变体重组酶进行酶学特性研究。方法：以Bacillius naganoensis基因组DNA为模板，PCR扩增大小为2781bp的普鲁兰酶编码基因，并通过PCR方法缺失原酶上的前78个氨基酸残基，获得突变体PulA234，将编码基因酶切连接到表达载体pET-22b（＋），转化Escherichia coli BL21（DE3）。IPTG诱导表达后对表达产物进行SDS—PAGE和酶学特性研究。结果：突变体发酵液的酶活是原酶的19倍，SDS—PAGE电泳结果显示有明显特异性条带，分子质量约为100kDa。该突变酶的最适反应温度为60℃，最适pH为4．75，在pH3．8～6．6范围内活性稳定，cu2＋、ca2＋对酶活有激活作用。结论：经改造的重组酶酶活力有所提高，具有良好的pH和酸稳定性，为普鲁兰酶酶制剂工业化生产及应用奠定基础。; 秦艳谢能中曹薇王青艳米慧芝申乃坤黄日波; 关键词：普鲁兰酶酶学性质

蔗糖酶产生菌的分离鉴定及酶学性质的研究: 2014年; 以蔗糖为唯一碳源筛选培养基,从高糖土壤筛选出1株分离出一株产蔗糖酶活力较高的细菌菌株,编号为L23。根据生理生化特性和16S rDNA序列,将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。对该菌所产蔗糖酶的性质研究结果表明：酶的最适pH为3.6,最适反应温度为40℃,在30～40℃范围内稳定。; 陆坚曹薇刘金平; 关键词：蔗糖酶枯草芽孢杆菌

基于代谢工程理论构建酿酒酵母抗逆高产乙醇菌株: ＜正＞通过对酿酒酵母中与海藻糖代谢、副产物合成密切相关基因的遗传操作来改善碳源的代谢流向,更好的优化细胞代谢途径,从根本上抑制副产物的合成,提高菌株的发酵性能和抗逆性能。本研究以酿酒酵母整合载体YIp5为骨架,引入特定的...; 谢能中王青艳朱绮霞秦艳曹薇; 文献传递

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曹薇