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尼博: 作品数：34 被引量：58H指数：5; 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>; 发文基金：国家奶牛产业技术体系项目科技基础性工作专项高层次人才科研启动基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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A型塞尼卡病毒检测方法及疫苗研究进展被引量：5: 2022年; A型塞尼卡病毒(Senecavirus A,SVA)也称为塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV),属于小RNA病毒科塞尼卡病毒属成员。SVA主要引起猪的水泡性疾病,与口蹄疫、水泡性口炎、猪水泡病等临床症状相似,可导致新生仔猪急性死亡,严重影响养猪业发展。自2015年广东省发生SVA感染以来,中国多省份陆续有该病发生的报道。当前,中国因猪群缺乏针对SVA的免疫屏障,加之该病传染性较强,存在大范围暴发的潜在风险。如何有效防控SVA感染是迫切需要解决的问题。目前已开发出多种SVA诊断方法用于进行实验室及现场条件下早期的鉴别诊断。SVA的分离鉴定、原位杂交和免疫组化可用于检测病原体的存在及其与组织内形态学变化关系;血清学诊断方法包括基于不同结构蛋白的间接ELISA方法、竞争ELISA方法、均相光激化学发光免疫技术和病毒中和试验,用免疫学方法检测抗体有助于了解SVA感染进程,是临床诊断的主要手段;病毒核酸检测方法主要有PCR技术、等温扩增技术、基因组测序等分子生物学技术,在病毒感染的早期快速检测及检测新发病毒中具有重要作用。目前仍无商品化疫苗预防SVA感染,但科研人员已研发出了灭活疫苗、弱毒疫苗、核酸疫苗和亚单位疫苗等多种具有潜力的候选疫苗。笔者系统总结了SVA检测方法及疫苗研发的最新进展,以期为SVA感染的防控提供参考依据。; 王迁迁于永乐李月华董雅琴尼博刘拂晓; 关键词：疫苗

2021年我国部分省份猪圆环病毒2型流行病学调查和基因分析: 2023年; 为了解2021年我国猪圆环病毒2型(PCV2)流行情况,本试验于7个地区16个省采集1685份组织样品,采用实时荧光定量PCR检测方法检测PCV2,对其中45份阳性样品进行全基因组序列扩增和遗传演化分析。结果显示,被检样品PCV2总阳性率为9.85%(166/1685),场总阳性率为32.71%(35/107);各地区样品阳性率介于4.29%~19.00%,东北地区样品阳性率最高;各地区场阳性率介于6.90%~60.00%,华中地区场阳性率最高。PCV2a、PCV2b和PCV2d亚型分离毒株占比分别为31.11%、4.44%和64.44%,其中PCV2d亚型为优势流行株,未发现PCV2e和PCV2c亚型。有24株PCV2分离毒株的Cap蛋白在C末端有1个赖氨酸(K)延伸,另有1株PCV2分离毒株的Cap蛋白在C末端有1个蛋氨酸(M)延伸。结果表明,2021年我国PCV2感染范围广,污染程度高,且正在不断发生遗传变异,需要持续跟踪监测PCV2的流行情况,以便及时制定有效的防控措施。; 黄正波崔进张慧尼博刘爽刘爽董雅琴魏荣董雅琴吴发兴; 关键词：猪圆环病毒2型流行病学调查基因序列分析

牛冠状病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：3: 2022年; 为了建立一种敏感、特异的牛冠状病毒(BCoV)实时荧光定量RT-PCR检测方法,试验利用GenBank中BCoV参考毒株N基因序列,设计引物及小沟结合物(MGB)探针,建立实时荧光定量RT-PCR方法,对方法的特异性、灵敏度和稳定性进行检验。利用建立的方法对采集自7个省份31个发病牛场的925份临床样本进行检测,并用基于BCoV N基因的普通RT-PCR结合测序的方法对部分阳性样品进行验证。结果表明:建立的实时荧光定量RT-PCR方法的扩增体系为上下游引物(10μmol/L)各1μL,探针(10μmol/L)0.8μL,2×One Step RT-PCR BufferⅢ10μL,Ex Taq HS(5 U/μL)0.4μL,Prime Script RT Enzyme MixⅡ0.4μL,总RNA 2μL,ddH_(2)O 4.4μL;扩增程序为,42℃5 min;95℃10 s;95℃5 s,55℃35 s,40个循环。标准曲线方程为y=40.979-3.512x,可信度(R^(2))为0.999,扩增效率(E)为92.6%,最低检测限为48 copies/μL,重复性变异系数(CV)不超过0.82%。31个发病牛场BCoV阳性场占比为64.52%(20/31),其中腹泻症状阳性场占比为54.55%(12/22),呼吸道症状阳性场占比为65.22%(15/23);阳性样品经基于BCoV N基因的普通RT-PCR方法验证,测序正确。说明建立的BCoV实时荧光定量RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,能检测出临床样本中的BCoV核酸,可应用于BCoV感染的诊断、监测与流行病学调查。; 高辉李晓成刘莹袁野张欣怡尼博张慧段纲董雅琴魏荣; 关键词：牛冠状病毒实时荧光定量RT-PCR 流行病学调查

猪圆环病毒2型实时荧光RAA检测方法的建立及初步应用被引量：2: 2023年; 根据猪圆环病毒2型(PCV2)Rep基因序列,设计引物及探针,建立了PCV2实时荧光重组酶介导等温扩增(recombinase-aid amplification, RAA)检测方法。该方法能在40℃恒温条件下20 min内对病原进行快速检测,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪传染性胃肠炎病毒、繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒3型和口蹄疫病毒均无交叉反应;对病毒核酸的最低检测限为21.2 copies/μL。用荧光PCR检测方法与建立的荧光RAA检测方法对66份临床样品进行检测,两种方法符合率为90.09%。结果表明,建立的PCV2实时荧光RAA方法适用于PCV2的快速检测。; 崔进费佳宇张锋张慧尼博董雅琴房琳琳沙洲马喆魏荣; 关键词：猪圆环病毒2型

A型塞内卡病毒序列元件与蛋白功能研究进展: 2024年; A型塞内卡病毒(SVA)是一种引起猪水疱性疾病的新发病毒。该病毒是小RNA病毒科、塞内卡病毒属的唯一成员。SVA基因组为单股、正链、不分节段的线性RNA,其中间为较长的编码区,共编码4种结构蛋白和8种非结构蛋白;两端分别为5′和3′非编码区,在病毒复制、启动蛋白表达以及影响病毒毒力等过程中起到了重要的作用。SVA的结构蛋白为VP1、VP2、VP3和VP4,主要参与病毒衣壳的形成;非结构蛋白则与病毒复制和免疫逃逸密切相关。作为一种新发病原体,关于SVA分子机制的研究尚未深入。本文系统地总结了SVA基因组结构和功能的研究进展,为SVA的深入研究,尤其是抗病毒制剂的研制提供参考依据。; 南福龙孟海蓝李紫薇沙洲尼博刘拂晓; 关键词：基因蛋白

2020年河南省牛群结核病感染情况调查: 2022年; 2020年,以规模牛场为调查对象,对来自168个场群的9295头活牛进行牛型结核菌素皮内变态反应试验,并按动物种类、存栏量规模和不同区域对结果进行分析,以期了解河南省牛群结核病感染情况。试验结果显示:河南省牛群结核病平均场群阳性率为9.52%,平均个体阳性率为0.79%;肉牛群体中未检出结核阳性个体,奶牛群体中结核场群阳性率和个体阳性率分别为10.74%和0.88%;存栏量≤500头的规模奶牛场场群阳性率和个体阳性率均为最高,分别为13.75%和1.30%,且个体阳性率和场群阳性率均随存栏量的上升呈下降趋势;豫西和豫北地区有结核阳性牛只检出,尤其是豫西地区,奶牛结核病感染情况较为严重,豫东、豫南和豫中地区无结核阳性个体检出。河南省牛群结核病感染具有明显的群间和空间分布特征,可依据其流行特征,针对不同种群和区域采取相应的防控和净化措施。; 赵胜杰尼博盛敏; 关键词：结核病

木犀草素四甲醚在制备抗猪塞内卡病毒的制剂中的应用: 本发明提供木犀草素四甲醚的一种用途，是用于制备预防和/或治疗SVA感染的制品；本发明再一个方面还提供一种用于预防和/或治疗SVA感染的制品，所述的制品中包含有药理有效浓度的木犀草素四甲醚。本发明提供了木犀草素四甲醚在制备...; 尼博蒙英雯沙洲李月华郑辉迟田英崔进房琳琳张慧董雅琴戈胜强刘爽魏荣

2021年~2022年我国猪盖塔病毒流行情况调查及其E2基因序列遗传变异分析: 2024年; 为了解2021年~2022年我国猪盖塔病毒(GETV)的流行现状和遗传变异情况,本研究对我国16个省份采集2512份临床样品,采用荧光定量RT-PCR方法进行GETV的检测,按照省份和地区进行GETV流行病学调查分析;采用RT-PCR方法对部分GETV阳性样品经PCR扩增E2基因并连接至p MD18-T载体并测序,利用DNAStar软件分析E2基因及其编码氨基酸序列与GETV参考株相应序列的同源性及其氨基酸变异情况;利用MEGA6.0软件构建E2基因的进化树,分析GETV的基因型及遗传进化关系。结果显示,7个省份猪群样品中均检测出GETV阳性样品,阳性率为3.34%(84/2512)。其中,陕西省和黑龙江省为首次在猪中检测到GETV。不同生长阶段猪中,仔猪GETV的检出率最高,达9.52%。同源性分析显示,获得的32个猪源GETV E2基因序列之间的同源性为98.3%~100%,与马来西亚GETV MM2021株相应基因序列的同源性为94.4%~94.9%。氨基酸序列变异分析显示,与参考株相比,本研究测序的E2蛋白有9个氨基酸位点只出现于猪源GETV。遗传演化分析显示,32个GETV株均属于III亚群,与III亚群内早期中国M1株、韩国QIAG9301株、日本Kochi等病毒株相比,本研究鉴定的GETV形成了新的进化分支。本研究揭示了我国当前猪群中GETV的感染现状及流行株的遗传变异情况,为该病毒的分子生物学研究和相关疫病防控策略的制定提供基础数据和参考依据。; 吴语晗董雅琴崔进张慧顾丛丛刘爽房琳琳沙洲郑辉尼博魏荣段纲张锋; 关键词：盖塔病毒 E2基因流行病学调查遗传进化分析

不同肥大细胞对布鲁菌S2株的模式识别与活化效应研究: <正>为探讨肥大细胞对猪布鲁菌S2株的模式识别与活化效应,分别用布鲁菌S2株感染骨源肥大细胞(BMMC,属于黏膜性肥大细胞)或经不同抑制剂预处理的腹腔肥大细胞(PMC,属于结缔组织型肥大细胞),收集不同时间的上清液,用E...; 曹志然尼博闫伟娇王蓓戎瑞雪丁家波张雷芳王燕毛开荣范伟兴王家鑫; 关键词：肥大细胞甘露糖受体; 文献传递

木犀草素四甲醚在制备抗猪塞内卡病毒的制剂中的应用: 本发明提供木犀草素四甲醚的一种用途，是用于制备预防和/或治疗SVA感染的制品；本发明再一个方面还提供一种用于预防和/或治疗SVA感染的制品，所述的制品中包含有药理有效浓度的木犀草素四甲醚。本发明提供了木犀草素四甲醚在制备...; 尼博蒙英雯沙洲李月华郑辉迟田英崔进房琳琳张慧董雅琴戈胜强刘爽魏荣

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