李鑫雨
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：四川师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 人胰岛素原基因在大肠杆菌中的可溶性表达及分离纯化研究被引量：1
- 2016年
- 根据NCBI中的人胰岛素原基因序列及大肠杆菌密码子偏爱性设计特异引物,PCR扩增得到人胰岛素原基因,构建该基因的原核表达质粒p ET32-PI,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。对重组菌进行温度和IPTG浓度优化,发现重组菌在30℃和终浓度为0.6 mmol/L的IPTG条件下表达效果最好且没有包涵体,经SDS-PAGE和Westem blot检测,表达蛋白的相对分子质量与理论相对分子质量一致且具有胰岛素的免疫原性,证明胰岛素原基因得到了正确表达。对重组菌进行流加发酵,发酵液离心收集菌体,破菌后上清液过亲和层析柱和离子交换柱分离纯化目的蛋白,透析后的样品用肠激酶和羧肽酶酶切,利用亲和柱去除融合蛋白与His标签,最终分离胰岛素样品,利用免疫酶标法,l m L样品测得活性92μIU,证明实验所得样品具有人胰岛素活性。
- 沈加斌徐攀李鑫雨张立郑海燕雍彬
- 关键词：人胰岛素原大肠杆菌发酵分离纯化
- 光能变价离子钛对多种细菌的抑制作用被引量：8
- 2016年
- 光能变价离子钛（Titanium ion of variable valence with light energy,TIVL）对环境友好、对人畜无害,能有效减少作物的发病率及发病症状.为了解其抑菌活性,采用不同浓度的TIVL对5种细菌,大肠杆菌（Escherichia coli）、娄彻氏链霉菌（Streptomyces rochei）、根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）、成团泛菌（Pantoe aagglomerans）和茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）,进行平板抑菌试验研究.结果显示,在一定菌液浓度（2×10~3-10~4 CFU/m L）下,16mg/L的TIVL即可显著抑制这5种菌绝大部分菌落的定植和生长.TIVL浓度为4 mg/L时,即可有效抑制娄彻氏链霉菌,抑菌率达97.33%;浓度为8 mg/L时,99.15%大肠杆菌和89.16%根癌农杆菌被抑制;浓度为16 mg/L时,87.68%成团泛菌和74.06%茄科雷尔氏菌被抑制.结果表明TIVL在低浓度下即对上述5种菌有良好的抑制作用,推测TIVL具有广谱抑菌活性;本研究可为进一步研究TIVL抑菌机理及农业生产应用提供依据,为农药减施、绿色农作物产品生产提供新途径.
- 范延芬魏春梅李彩侠王蕾李鑫雨马欣荣
- 关键词：细菌抑菌活性
