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吕东坡
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NeurexinⅡ基因在不同胎龄大鼠胚胎肠神经系统的表达及意义
被引量:2
2015年
目的观察不同胎龄大鼠胚胎肠神经系统(enteric nervous system,ENS)中NeurexinⅡ基因的表达,探讨NeurexinⅡ基因与ENS发育的时间相关性及与肠神经元发育异常性疾病的可能关系。方法清洁级健康Wistar大鼠用随机数字表法随机分组后,单独交配受孕。麻醉后处死孕龄16d、18d和20d孕鼠及出生第1天乳鼠,手术取胚胎第16天(E16组)、18天(E18组)、20天(E20组)和出生第1天(Ep0组)大鼠近回盲部约1.0cm结肠样本,E16组、E18组、E20组、Ep0组样本数量分别为78、82、69和60个。运用免疫组织化学染色、Western-blotting及qRT-PCR实验方法检测各标本NeurexinⅡ基因在蛋白和mRNA水平的表达。结果免疫组织化学染色结果显示NeurexinⅡα蛋白主要表达于结肠肌间神经丛,在黏膜下神经丛亦有少量表达,其表达量自胚胎第16天至出生第1天,随胚胎逐渐发育表达逐渐增加。Western-blotting结果显示NeurexinⅡα蛋白相对含量在E16、E18、E20和Ep0组分别为0.054±0.009、0.106±0.020、0.215±0.013和0.280±0.030,相对表达量随胚胎发育逐渐增加,组间差异比较与两两比较,差异均有统计学意义(P〈0.05),与免疫组化结果趋势一致。qRT-PCR结果显示NeurexinⅡ基因在mRNA水平E16、E18、E20和Ep0组中相对表达分别为0.390±0.029、0.552±0.054、0.748±0.065和1.000±0.000,与蛋白水平表达趋势一致,组间差异比较与两两比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论NeurexinⅡ基因与ENS发育具有时间相关性;若其在ENS发育过程中的某一时间点出现异常,可能导致肠神经元发育异常性疾病的发生。
王东明
吕东坡
郑懿
张强业
王健
潘靖年
李爱武
关键词:
肠神经系统
基因表达
Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎肠神经系统中的表达及意义
2015年
目的研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎的肠神经系统(ENS)中的表达情况,探讨Neuroligin1基因的表达与ENS和ENS疾病之间的关系。方法取胚胎第16(E16)、18(E18)、20(E20)天和出生第一天(B1)的胚鼠肠管标本各30只,通过双重免疫荧光染色、Western blot、实时荧光定量PCR(Quantitative Real—timePCR,qRT-PCR)等实验方法,研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎ENS各个发育时期中的表达情况。结果在Wistar大鼠E16、E18、E20和B1四个ENS发育时期中:双重免疫荧光染色显示Neuroligin1基因阳性面积的平均光密度值分别为E16(0.046±0.031),E18(0.146±0.033),E20(0.233±0.034),B1(0.345±0.344),且四组之间的差别有统计学意义(F=441.614,P〈0.05);Western blot显示Neuroligin1基因的平均蛋白表达量分别为E16(0.053±0.025)、E18(0.146±0.024)、E20(0.249±0.034)、B1(0.533±0.049),且四组之间的差异有统计学意义(F=1070.296,P〈0.05);qRT-PCR显示Neuroligin1基因的mRNA相对平均浓度分别为E16(2.543±1.294)、E18(4.637±1.830)、E20(6.814±1.552)、B1(8.345±1.364),且四组之间的差异有统计学意义(F=81.440,P〈0.05),同时qRT-PCR试验中Neuroligin1基因的mRNA表达趋势与Western blot中Neuroligin1基因的蛋白表达趋势一致。结论在E16到B1这段时期内,随着Wistar大鼠ENS的发育,Neuroligin1在ENS的表达呈递增趋势;Neuroligin1在ENS的异常表达发生越早,相关疾病可能就越严重;Neuroligin1基因相关的ENS疾病可能是先天发育异常。
吕东坡
王东明
滕秀秀
王健
李爱武
郭明兴
关键词:
胚胎
肠神经系统
基因表达
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