张雪娇
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：河北大学医学部更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CH2b对RA模型小鼠的Th1/Th2、Th17/Treg免疫平衡紊乱的影响被引量：7
- 2017年
- 目的 探讨前期合成的含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂CH2b对类风湿关节炎（RA）模型小鼠的Th1/Th2、Th17/Treg免疫失衡的影响.方法 应用免疫调节剂CH2b对混合肽段诱导的RA模型小鼠进行干预,以α-GalCer作为阳性对照,CBA法检测各组小鼠各期血清中细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α、IL-6的水平变化;小鼠Th1、Th2、Th17亚群分析试剂盒检测Th1/Th2/Th17亚群比例;PCR法检测各组肝组织中T-bet mRNA、GATA-3 mRNA、ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达水平.结果 （1）与健康对照组相比,模型组小鼠血清中IFN-γ、IL-6、TNF-α水平在造模第8天开始上升,第14天升高至最高峰后逐渐下降,IL-6、TNF-α水平在第14天时上升显著（P＆lt;0.05）,IL-4水平变化无统计学意义（P＆gt;0.05）.与模型组相比,α-GalCer、CH2b组IFN-γ、IL-6、TNF-α水平从造模第8天开始逐渐下降直至炎症逐渐缓解,IL-6、TNF-α水平在第14天时显著降低（P＆lt;0.05）,IL-4水平在第14天升高.（2）造模第8天,与健康对照组相比,模型组Th1/Th17亚群比率显著增多（P＆lt;0.05）,Th2亚群比率减少;与模型组相比,α-Galcer、CH2b组Th1亚群比率减少,Th2亚群比率显著增多（P＆lt;0.05）.造模第14天,与健康对照组相比,模型组Th1/Th2/Th17亚群比率均显著增多（P＆lt;0.05）;与模型组相比,α-Galcer、CH2b组Th1/Th2/Th17细胞亚群均减少,且Th2细胞亚群显著减少（P＆lt;0.05）.（3）造模的第14天,与健康对照组相比,模型组T-bet mRNA、ROR-γt mRNA表达增强,GATA-3 mRNA表达减弱,且T-bet mRNA表达显著增强（P＆lt;0.05）;与模型组相比,α-GalCer组、CH2b组GATA-3 mRNA、Foxp3 mRNA的表达增强,T-bet mRNA的表达减弱,且GATA-3 mRNA的表达显著增强（P＆lt;0.05）,T-bet mRNA的表达显著降低（P＆lt;0.05）;与健康对照组比较,模型组T-bet mRNA与GATA-3 mRNA,ROR-γt mRNA与Foxp3 mRNA相对表达量的比值均增大;相比于模型组,α-GalCer组、CH2b组T-bet mRNA与GATA-3 mRNA
- 陈冬志王园园张雪娇刘嘉琳杨飞尹晓琳孟明侯明辉
- 关键词：免疫调节剂类风湿关节炎TH1/TH2TH1/TH2
- 葡萄糖-6-磷酸异构酶混合肽段诱导的DBA/1小鼠类风湿性关节炎模型的建立被引量：5
- 2016年
- 目的:利用葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)单一肽段及混合多肽片段免疫DBA/1小鼠,建立类风湿性关节炎(RA)模型,分析其主要评价指标及特点,为探讨RA的免疫机制及治疗提供新的理想动物模型。方法:h GPI325-339、h GPI469-483多肽片段和h GPI325-339单一肽段分别与完全弗氏佐剂充分乳化后,于小鼠尾根部皮下注射进行造模,并从体重变化、足踝关节症状评分、足踝关节病理改变、外周血及脾组织CD4+T细胞的表达、外周血i NKT细胞比例以及血清TNF-α和IL-6水平等方面进行模型鉴定及分析。结果:模型小鼠在造模第8天,后爪最先出现红肿,逐渐加重累及四肢,第14天红肿达到高峰,足踝肿胀,行动不利,此后开始逐渐缓解;组织形态学观察发现足踝关节有炎症细胞浸润,以单核细胞与淋巴细胞为主,浆细胞少量出现,混合肽段的炎症状况明显强于单肽片段。与健康对照组和单肽片段模型组相比,混合肽段模型组体重增长缓慢;外周血、脾脏CD4^+T细胞数量明显增多;炎症高峰期外周血i NKT细胞比例下降明显(P<0.05),血清中TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论:混合GPI肽段诱导的RA模型小鼠在免疫学特征,特别是i NKT细胞免疫病理方面与RA患者尤为接近,可作为RA免疫机制研究和治疗的良好工具。
- 张雪娇刘嘉琳杨飞娄永富王强陈冬志孟明
- 关键词：葡萄糖-6-磷酸异构酶类风湿性关节炎INKT细胞
- 不同溶剂对多肽类抗原乳化效果的影响
- 2015年
- 目的探究多肽类抗原在与弗氏完全佐剂乳化过程中不同的抗原溶剂(无菌水和PBS缓冲溶液)对乳化效果的影响。方法利用三通管连接双注射器的人工乳化器推拉法进行抗原乳化,采用滴水实验检测乳化效果。结果以无菌水作为溶剂,乳化时间较长,乳化程度易于人工控制;以PBS缓冲液作为溶剂,会在极短时间即形成稳定的"油包水"乳剂,但容易乳化过度。结论多肽类抗原乳化过程中,不同抗原溶剂对乳化效果的影响有较大差异。
- 娄永富张雪娇刘嘉琳王荣爱刘绍川孟明
- 关键词：弗氏完全佐剂乳化效果
- 疾病模型构建新时代——CRISPR/Cas基因编辑技术被引量：1
- 2016年
- 在医学研究中,根据疾病构建模型一直是极其重要的。模型的构建对研究疾病的发生与治疗有着极为重要的意义。随着科学技术的发展,对在疾病模型构建中所应用的基因编辑技术的要求不断提高,CRISPR/Cas基因编辑技术应运而生。CRISPR/Cas是存在于细菌和古细菌中的一种免疫机制,通过人工改造CRISPR/Cas,可以使其成为一种新的基因编辑技术。相较于传统编辑方法,CRISPR/Cas系统更简单高效,易于操作,构建疾病模型成本低、耗时短,因此成为当今广泛研究和应用的方法。就CRISPR/Cas系统的基本构成、作用原理、技术方法与当前应用进行综述,并对该技术的前景进行展望,希望对有关领域的研究者有所帮助。
- 杨飞张雪娇段斐娄永富孟明
- 关键词：疾病模型
- 免疫调节剂CH2b对葡萄糖-6-磷酸异构酶混合肽段诱导的类风湿性关节炎小鼠的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探究前期合成的含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂CH2b对葡萄糖-6-磷酸异构酶(Glucose-6-phosphate isomerase,GPI)混合肽段诱导的类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)小鼠发病的影响。方法:h GPI325-339、h GPI469-483多肽片段与完全弗氏佐剂充分乳化后,于DBA/1小鼠尾根部多点皮下注射,并用百日咳毒素加强免疫。然后分别用α-半乳糖神经酰胺(α-Gal Cer)和CH2b对模型小鼠进行干预,监测各组小鼠体重变化和足踝关节肿胀变化情况,关节组织苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察炎细胞浸润情况,流式细胞技术(Fluorescence-activated cell sorting,FACS)检测全血中i NKT细胞频率变化,微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric bead array,CBA)检测血清中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-4、IFN-γ水平。结果:与GPI混合肽段诱导的模型组相比,α-Gal Cer和免疫调节剂CH2b均可显著改善模型小鼠的体重增长缓慢、关节肿胀情况(P<0.05);炎性细胞浸润减少;且二者均可以显著提高RA小鼠体内i NKT细胞的频率,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);α-Gal Cer、CH2b组可以降低模型小鼠炎症高峰期TNF-α、IL-6、IFN-γ水平,两组结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:免疫调节剂CH2b通过激活i NKT细胞影响炎性细胞因子的分泌,缓解GPI混合肽段诱导的关节炎。
- 刘嘉琳张雪娇杨飞娄永富孟明陈冬志
- 关键词：Α-GALCER葡萄糖-6-磷酸异构酶INKT细胞
- 用于钙信号研究的小鼠心室肌细胞急性分离的优化被引量：1
- 2016年
- 目的建立一种可快速获取生理状态良好的用于钙信号研究的小鼠心室肌细胞的方法,同时比较两种细胞保存液对心室肌细胞钙信号的影响。方法取成年小鼠心脏,用改进的Langendorff心脏灌流系统行主动脉逆行灌流,利用酶联合法消化,取得心室肌细胞置于两种不同的细胞保存液中,在显微镜下观察并检测其状态。采用共聚焦显微镜观测细胞内钙信号,记录钙火花。结果该方法可以在较短的时间内得到65%以上的长杆状心室肌细胞,细胞能够正常存活12~24 h,并且可以立即用于钙火花观测实验研究。比较两种保存液,细胞保存液A中富含高钾离子,细胞保存液B中含有正常的胞外钙离子浓度,观察到的钙火花细胞保存液B中比A液的频率高、幅度大,在达峰时间上比A液的时间短。结论通过严格控制各项实验条件,能够成功得到存活率高、纯度高、耐钙的可用于钙火花观测的小鼠心室肌细胞。细胞保存液中的钾离子含量少,并有适量的钙离子有助于观测钙火花的发生。
- 管倩楠段斐吴银玲王玉娟张雪娇
- 关键词：心室肌细胞钙火花心血管疾病
- 含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂对RA患者iNKT细胞免疫调节功能的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:研究新型合成的含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂(CH1b)对活动期RA患者iNKT细胞免疫调节功能的影响。方法:从RA患者外周血中分离得到单个核淋巴细胞(PBMC),α-Galcer和IL-2体外刺激扩增后,经磁珠分选(MACS)得到纯化的iNKT细胞,分成对照组(IL-2)、α-Galcer组(IL-2+α-Galcer)、CH1b组(IL-2+CH1b)。采用MTT法测定各组RA患者iNKT细胞增殖率;MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine kit检测各组RA患者iNKT细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的水平;采用RT-PCR方法检测各组RA患者iNKT细胞中IFN-γmRNA和IL-4 mRNA的表达水平。结果:与对照组和α-Galcer组相比,CH1b组iNKT细胞增殖率明显增加(P<0.05);与对照组相比,α-Galcer组IFN-γ和IL-4分泌水平明显增加(P<0.05),CH1b组IFN-γ和IL-4的分泌量也明显增加,IFN-γ/IL-4明显降低(P<0.05);与对照组相比,α-Galcer组IFN-γmRNA与IL-4 mRNA表达均明显增高,CH1b组IFN-γmRNA表达差异不明显,IL-4 mRNA的表达明显增高。结论:新型合成的免疫调节剂(CH1b)可促进活动期RA患者活化的iNKT细胞增殖,并促进IL-4的分泌,上调IL-4 mRNA的表达,诱导iNKT细胞向Th2方向分化,对恢复RA病人体内免疫平衡具有重要意义。
- 孟明张雪娇瓮沛杉许鸣华陈丹侯明辉陈冬志
- 关键词：类风湿关节炎INKT细胞免疫调节剂IFN-Γ/IL-4
