公共文化服务平台

葛林: 作品数：29 被引量：30H指数：3; 供职机构：天津医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

合作作者

重组原核质粒GST-hTudor-SN-SN（1～4）的构建及表达: 2010年; 目的将人类Tudor-SN（tudor staphylococcal nuelease）蛋白SN（1～4）基因片段分别定向连入pGEX-4T-1质粒,使Tudor-SN蛋白sN各功能片段与（;＂蛋白在大肠埃希菌BL21细胞内融合表达.方法以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切法将目的片段连接纠pGEX-4T-1载体卜,再将构建成功的GST-hTudor-SN-SN（1～4）重组质粒转化人大肠埃希菌BL-21内,IPTG诱导表达后再以考马斯亮蓝染色法检测GST融合蛋白的表达.结果以单/双酶切和基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,考马斯亮监染色法观察到GST融合蛋白的正确表达.结论重组原核GST.hTudor-SN-SN（1-4）质粒成功构建和表达.; 苏超朱梦瑜高星杰王鑫廷张桂敏付晓葛林杨洁; 关键词：PGEX-4T-1 重组质粒融合蛋白

脂蛋白脂肪酶基因突变的研究被引量：9: 2004年; 目的:筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变,并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法:对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析,电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点,引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果:在高甘油三酯血症人群中,检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子,1例外显子5Pro207→Leu突变杂合子,在全部样品中检出1例Ser447→stop突变纯合子,50例Ser447→stop杂合子。结论:天津地区人群中存在着LPL基因突变,除Ser447→stop外,内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关,可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。; 赵郁穆云翔杨宇虹刘新宇葛林解用虹; 关键词：高甘油三酯血症杂合子 LPL 剪接 PCR产物

hnRNP A1的增强型绿色荧光标记及细胞应激定位分析: 2014年; 目的构建包含有核不均一核糖核蛋白(hnRNP)A1蛋白编码区序列的真核表达质粒pEGFP-C1-hnRNP A1,并对增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的hnRNP A1蛋白进行细胞应激共定位分析。方法提取HeLa细胞总RNA,以针对hnRNPA1-3′非翻译区的特异性片段为反转录引物,反转录出包含hnRNP A1编码区序列的cDNA,并以其为模板,降落PCR法扩增出带EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切位点的目的基因,利用双酶切法分别酶切目的基因片段和线性pEGFP-C1,在T4-DNA连接酶的催化下将两者连接构建成pEGFP-C1-hnRNP A1重组质粒,然后将重组质粒转染入HeLa细胞内,以激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP-hnRNP A1的荧光表达情况,Western印迹法检测EGFP与hnRNP A1的融合表达情况,最后进行细胞原位杂交及细胞免疫荧光检测在氧化应激状态下EGFP-hnRNP A1蛋白与poly(A)+mRNA(应激颗粒的标记成分)及DPC1a(加工体的标记蛋白)的应激共定位。结果以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误,激光共聚焦荧光显微镜观察和Western印迹结果检测到绿色荧光融合蛋白的表达;EGFP-hnRNP A1蛋白与poly(A)+mRNA呈现共定位,但与DPC1a无共定位关系。结论重组pEGFP-C1-hnRNPA1质粒成功构建并表达,应激状态下EGFP标记的hnRNPA1参与应激颗粒的构成。; 高星杰宋娟葛林付雪孙晓明张纬何津岩姚智杨洁; 关键词：绿色荧光蛋白质类 HNRNP PEGFP-C1

人类p100蛋白与G3BP蛋白之间的结合与功能研究: 目的：p100蛋白是一种多功能蛋白,是基因转录和pre-mRNA剪接加工的双重调控因子,由4个重复的葡萄球菌核酸酶同源性结构域SN片段和随后的Tudor-SN (TSN)结构域构成。本课题小组在前期的工作中利用p100蛋...; 葛林; 关键词：P100 G3BP 蛋白质相互作用; 文献传递

G3BP与p100蛋白间的结合研究: G3BP(Ras-GTPase Activating Protein SH3 Domain Binding Protein)是一种广泛地存在于细胞胞浆中的蛋白质,可以与GAP(the Ras-GTPase-activat...; 葛林姚智杨洁; 文献传递

脂蛋白脂酶基因突变Pro207Leu致高乳糜微粒血症被引量：2: 2004年; 以PCR SSCP和DNA测序确定 1例 17岁女孩的脂蛋白脂酶 (LPL)基因为杂合子突变(Pro2 0 7Leu) 。; 穆云翔赵郁杨宇虹葛林刘新宇解用虹; 关键词：脂蛋白脂酶基因突变

PS-1基因外显子5～9的突变研究: 2007年; 目的:筛查PS-1基因外显子5～9的突变,了解PS-1基因突变在中国人群中的分布情况及在中国人群阿尔茨海默病(AD)发病中可能产生的影响。方法:利用PCR-SSCP分析技术对120例正常体检人群PS-1基因外显子5～9进行突变筛查。结果:在这5个外显子中未发现任何突变,但在内含子9中第16位核苷酸处发现一种基因多态性位点,T/G基因型频率为65.8%,T/T基因型的频率为34.2%,未发现G/G基因型;等位基因T的频率为67.1%,等位基因G的频率为32.9%。结论:PS-1基因外显子5～9的突变频率较低,可能不是中国人群AD的主要危险因素;内含子9多态性与AD之间的关系还需进一步研究证实。; 孙晓明葛林解用虹; 关键词：阿尔茨海默病突变

重组pEGFP—hSnu 114质粒的构建及表达: 2009年; 目的将hSnu114基因定向连人pEGFP质粒GFP的下游，使hSnu114蛋白可与绿色荧光蛋白在真核细胞内融合表达。从而为进一步研究hSnu114蛋白的功能奠定实验基础。方法本实验已经构建tr1E57R／T—hSnu114和pcDNA3．1（-）-hSnu114重组质粒，想要构建pEGFP—hSnu114重组质粒，需通过引入SalⅠ酶切位点，调整N端起始密码子与绿色荧光蛋白（green fluorescence protein，GFP）基因之间的序列，使其不破坏读码框，融合蛋白正确表达。PCR扩增出hSnu114的第一部份（SalⅠ～MunⅠ基因序列），从hSnu114-peDNA3．1（-）重组质粒回收hSnu114的第二部分（MunI～BamHI片段），定向克隆至T／A载体，构建hSnu114全长（SalI～BamHI）pTZ57R／T重组质粒。采用SalI和BamHI双酶切方法，从重组质粒中获得hSnu114全长，将该基因片段连接入pEGFP质粒。将构建成功的pEGFP—hSnu114质粒，转染人HeLa细胞，荧光显微镜下可观察绿色荧光蛋白表达。进行Western印迹检测。结果①hSnu114Sal1～MunI目的片段获取。②将该pEGFP—hSnu114质粒进行双酶切鉴定可见hSnu114全长片段。③转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。④Western印迹可检测到pEGFP—hSnu114融合蛋白：结论①hSnu114全长成功载入pEGFP质粒。②hSnu114蛋白可与绿色荧光蛋白在真核细胞中融合表达。; 李晓冬方建飞东莉洁葛林何津岩杨洁; 关键词：重组质粒融合蛋白

重组质粒pEGFP—C1-STAT6的构建及在HeLa细胞中表达: 2009年; 目的构建以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein，EGFP）为报告基因的重组质粒pEGFP—C1-STAT6．观察其在HeLa细胞中的表达。方法以重组质粒pCLNEO—STAT6为模板，PCR法扩增出目的基因，将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP—C1上，构建重组质粒pEGFP—C1-STAT6，脂质体法转染HeLa细胞，western印迹检测融合蛋白的表达，并在荧光显微镜下观察融合蛋白的定位和分布。结果成功构建质粒pEGFP—C1—STAT6，并在HeLa细胞中实现表达；Western印迹检测到融合蛋白EGFP—STAT6；在荧光显微镜下观察到绿色的融合蛋白表达和定位。结论重组质粒pEGFP—C1-STAT6构建成功，可用于标记STAT6蛋白，为进一步研究STAT6在信号转导中的作用机制奠定基础。; 方建飞李晓冬何津岩葛林杨洁; 关键词：增强型绿色荧光蛋白 STAT6 重组质粒

天津市部分高校高知人群血脂水平的分析被引量：2: 2003年; 目的 :了解天津市部分高级知识分子的血脂状况并为进一步的防治工作提供依据。方法 :测定380名相关人员的血甘油三酯 (TG)和血总胆固醇 (TC)水平 ,并与正常参考标准进行比较分析。结果 :(1)该市部分高级知识分子的血脂水平(TG:1.80±1.12mmol/L,TC:5.46±0.94mmol/L)高于血脂异常防治对策小组推荐的正常参考标准(TG<1.7mmol/L,TC<5.2mmol/L)。(2)只有28.7%(109人)两项指标都在合适水平;TG和TC超过正常参考标准的人员分别达总体的42.6%和60.8 %。结论:该市部分高级知识分子的血脂水平令人堪忧。; 葛林王金和赵郁步天栩程佩兰解用虹; 关键词：血脂总胆固醇甘油三酯

葛林

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

葛林

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈