王锦红
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HCC患者GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态研究被引量：2
- 2005年
- 目的检测人原发性肝癌(HCC)中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况,并探讨其在肝癌发生中的作用。方法以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照,以11例正常人外周血单核细胞(PBMC)DNA为阴性对照,用甲基化特异性PCR(MSP)的方法对26例肝细胞癌患者的癌、远癌组织中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态进行检测。结果在26例原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化在癌组织为88%(23/26),在远癌组织中为69%(18/26);而在11例正常人外周血单核细胞均为甲基化阴性。结论抑癌基因GSTP1基因启动子区CpG岛高甲基化可能是肝癌发生早期的分子事件,在人原发性肝癌的发生发展中具有重要的作用。
- 王锦红覃扬李波孙芝琳孙泽芳关泉林
- 关键词：GSTP1基因CPG岛甲基化
- 中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的研究被引量：6
- 2007年
- 目的研究中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的作用。方法构建含完全甲基化GSTP1启动子区的重组质粒pGL3-GSTP1prom并转染MCF-7细胞,分别用不同剂量的CDP和5-aza-C作用细胞,检测表达的萤光素酶活性。观察GSTP1启动子转录活性的变化。结果GSTP1启动子区被完全甲基化后转录活性显著降低;CDP能够逆转高甲基化状态下GSTP1基因启动子区的低转录活性且呈剂量依赖关系。结论中药成分CDP能够逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子区的低转录活性。
- 张军哲王锦红覃扬傅强
- 关键词：CDPMCF-7萤光素酶报告基因
- 人原发性肝癌中GSTP1基因启动子区甲基化状态及克隆的研究
- 原发性肝癌是世界上严重威胁人类健康的重要恶性肿瘤之一。中国人原发性肝癌的主要病因是HBV感染，其发展过程为慢性肝炎→肝硬化→肝癌。为探讨GSTP1基因启动子区甲基化与HBV感染，肝硬化和肝癌的关系，并探索GSTP1基因甲...
- 王锦红
- 关键词：GSTP1基因CPG岛甲基化启动子甲基化状态克隆
- 文献传递
- 肝癌相关基因甲基化谱研究进展
- 2004年
- 研究发现肝细胞癌的发生发展涉及到多条分子途径的基因启动子区CpG岛甲基化改变 ,基因启动子区CpG岛甲基化异常可能是一个早期分子事件 ,其发生具有基因特异性和肿瘤特异性。由此为原发性肝癌的早期诊断和疾病监测找到了新的分子标志物。现对与肝细胞癌发生相关基因甲基化的研究现状作一综述。
- 王锦红覃扬
- 关键词：甲基化CPG岛
- 5-氮-2’-脱氧胞苷诱导E-cadherin基因去甲基化及转录和表达被引量：1
- 2006年
- 背景与目的用去甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对细胞株MDA-MB-435抑癌基因E-cadherin(上皮钙粘附素,简称E-cad)表达的影响。观察DNA甲基化的可逆性,为肿瘤治疗提供新的靶点。方法在用5-Aza-CdR处理MDA-MB-435细胞株前、后分别应用甲基化特异性PCR(MSP)检测E-cad基因5’-CpG岛甲基化改变;用免疫组化(LsAB法)检测E-cad蛋白表达;用半定量RT-PCR观察E-cadmRNA的变化。结果①MDA-MB-435细胞在用药前E-cad基因甲基化PCR扩增阳性(116bp),而非甲基化PCR扩增阴性。用0.5μmol/L的5-Aza-CdR处理后发现该细胞E-cad基因甲基化PCR扩增阴性,而非甲基化PCR扩增出阳性条带(97bp)。②免疫细胞化学法检测E-cad蛋白用药前细胞未见E-cad蛋白表达。用5-Aza-CdR处理后在细胞膜可见E-cad染色阳性。③RT-PCR发现用5-Aza-CdR处理前细胞不能扩增出630bp的E-cadmRNA特异性条带;用0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L的5-Aza处理细胞后都可检测到E-cadmRNA转录,且mRNA水平与药物的浓度呈正相关。结论去甲基化药物5-Aza-CdR能有效地逆转MDA-MB-435细胞株的E-cad基因异常甲基化,诱导mRNA转录和蛋白的表达。
- 郑本波何文智王锦红何永林
- 关键词：甲基化甲基化特异性PCR基因上皮钙粘附素
- 限制性内切酶结合半巢式PCR法检测人肝癌P16抑癌基因启动子区甲基化研究被引量：2
- 2007年
- 目的建立甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法,研究原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态。方法针对P 16基因启动子区富含CpG的序列,设计3条引物,进行半巢式降落PCR扩增,检测原发性肝癌P 16基因启动子区甲基化状态;并将P 16基因启动子区340 bp片段克隆到pM D 18-T载体,E.coli JM 109扩增此质粒后经CpG甲基化酶M.S ssⅠ处理,再用Hp aⅡ酶切验证获得P 16基因启动子区甲基化阳性的质粒P 16Pm+并进行特异性和灵敏度实验。以此甲基化敏感的限制性内切酶结合半巢式降落PCR方法检测40例人原发性肝癌和3例正常人肝组织DNA样品的P 16基因启动子区甲基化状态。结果所采用的Hp aⅡ酶切后半巢式PCR方法的特异性强,灵敏度达100 fg;对40例人原发性肝癌组织DNA样品P 16基因的启动子区甲基化状态检测显示甲基化阳性率为30%(12/40),3例正常人肝组织均为阴性(0/3)。结论P 16抑癌基因启动子区甲基化可能与肝癌发生发展有关。本实验方法简便、成本低廉,并有高度的特异性与灵敏度,在大规模检查中有实际应用价值。
- 蒋磊覃扬孙芝琳孙泽芳王锦红杨鲁川
- 关键词：半巢式PCR人原发性肝癌
