吴剑宏
- 作品数：47 被引量：223H指数：8
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 腹腔镜胃癌术后早期肠套叠一例
- 2015年
- 病人：女性，35岁。因“胃窦腺癌”于2013年12月23日在全身麻醉下行腹腔镜辅助根治性远端胃切除术（Billroth II），术中留置胃管及鼻肠营养管，且鼻肠营养管过吻合口约30cm。术后第3天肛门排气，第6天始诉上腹部胀痛，伴恶心不适，能间断排少量稀便，胃管每日引流出胆汁样胃液200～400ml，经原留置胃管予以胃肠减压、抑酸抑分泌等对症治疗。术后第9天胃管引流液增多至700ml，行上消化道碘水造影示：输出袢梗阻（梗阻点距吻合口约15cm），考虑肠粘连可能，继续胃肠减压等保守治疗，同时经鼻肠营养管每日给予肠内营养混悬液（百普力）1000ml泵入，病人可间断排便。
- 江旭林刘鹭胡俊波吴剑宏
- 关键词：术后早期肠套叠鼻肠营养管肠内营养混悬液留置胃管胃癌
- 胃肠间质瘤治疗的疾病进展和治疗策略（附385例分析）被引量：1
- 2015年
- 目的了解胃肠间质瘤治疗的疾病进展特点及相应治疗结果。方法回顾性分析于2004年9月至2013年12月之间纳入胃肠间质瘤援助项目数据库的病人共385例，重点收集肿瘤基本情况、初始治疗、疾病进展、再次治疗策略、基因突变、疗效评估等信息，进行统计比较分析疾病进展的影响因素及治疗效果差异。结果胃肠间质瘤有较高的疾病进展率，疾病进展率受危险度、肿瘤部位、是否破裂、基因突变类型影响较大（P均〈0.05）。不同治疗策略临床获益率不同。结论个体化、精细化的治疗策略对于胃肠间质瘤疾病进展后的治疗十分重要，应积极推荐所有胃肠问质瘤病人进行基因突变检测。
- 吴剑宏江旭林来森艳徐丰刘鹭童宜欣罗学来高纯胡俊波
- 关键词：胃肠间质瘤疾病进展基因突变
- FuGENE6介导雌激素受体质粒HEGO5转染不同乳腺癌细胞株后受体的表达
- 2004年
- 背景及目的:基因转染技术是研究乳腺癌细胞雌激素受体(estrogenreceptor,ER)的表达及其作用机制的重要手段。本研究检测不同人类乳腺癌细胞株以FuGENE6试剂为载体进行转染时的转染效率,以及ER质粒HEGO5转染后ER的表达情况。方法:不同乳腺癌细胞株先用pEGFP-N1质粒转染,流式细胞术(flowcytometry,FCM)对转染效率进行测定。将转染效率高的细胞株分别再用HEGO5转染,用FCM和Westernblot方法对ER的表达情况进行检测。结果:乳腺癌细胞株MM-231、MM330、MM134Ⅵ、MM175Ⅶ、MM157、MM361、MM436、MM453、UaCC812、UaCC893、BT-549、BT-20、HBL-100、Hs578t、MCF-7、T-47d、ZR-75-1的转染效率存在很大差异。细胞株HBL-100重复性转染实验的变异系数为5.1。几种转染效率较高的细胞株MCF-7、HBL-100、Hs578t、MM436、MM453和BT-20用HEGO5转染后,ER阳性的表达率介于12.9%～54.8%之间,与pEGFP-N1的转染效率相当;不同细胞ER的FCM和Westernblot检测结果一致。此外,ER的表达具有一定的细胞周期特异性。结论:FuGENE6试剂介导乳腺癌细胞进行转染时重复性好、结果稳定。HEGO5转染后ER的表达情况可分别用Westernblot和FCM进行定性、定量检测。
- 陶德定江敏冯永东吴剑宏龚建平
- 关键词：转染效率乳腺癌细胞株雌激素受体质粒EGFP介导
- 痔手术严重并发症19例被引量：3
- 2017年
- 目的痔手术后的严重并发症预防及治疗。方法对2010年6月至2016年6月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治及院外会诊19例痔手术后的严重并发症病人进行回顾性分析。结果 19例痔手术后严重并发症病人,包括5例吻合口裂开,4例直肠穿孔,6例术后大出血(其中2例合并血友病),4例肛门狭窄,均获治愈。结论痔手术虽然相对简单,但术后并发症并不少见,增加对疾病的理解,及时和恰当的处理可以避免病症的加剧甚至生命危险。
- 黄丹魏欣吴剑宏罗学来邹游杨传永曹志新
- 关键词：痔上黏膜环形切除术吻合口瘘直肠穿孔
- 空、结肠黏膜细胞增殖过程中主要细胞周期蛋白表达规律的研究被引量：7
- 2005年
- 目的研究正常空、结肠黏膜细胞增殖过程中的人类主要细胞周期蛋白Cyclins表达特征和变化规律。方法应用细胞免疫组织化学流式细胞术检测30例正常空、结肠黏膜不同层面、不同增殖阶段细胞主要细胞周期蛋白CyclinD1、E、A、B1及Ki-67的表达,以共聚焦显微镜观察证实检测结果。结果不同增殖阶段肠黏膜细胞Cyclins表达阳性率及相对表达水平不同,从底部→中间层→表层肠黏膜细胞增殖活性(以Ki-67为增殖指标)呈下降趋势,Cyclins(CyclinE、B1为主)表达阳性率及水平呈高→低→无的变化,差异有统计学意义(P<0.01);Cyclins表达与肠黏膜细胞增殖活性呈正相关(P<0.05);CyclinD1、A仅表达于底层增殖细胞,表层完全分化细胞不表达Cy-clins。结论正常空、结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins(以CyclinE、B1为主)呈高→低→无的规律性变化,参与细胞增殖的调控,其表达呈衰减变化与肠黏膜细胞有限增殖和定向分化有关。
- 李伟华吴剑宏高纯钟以胜龚建平
- 关键词：细胞周期蛋白增殖过程CYCLINS细胞免疫组织化学结肠黏膜微镜观察
- 0.45%乳酸钠溶液在十二指肠残端瘘中的应用分析被引量：2
- 2007年
- 史俊涛吴剑宏童宜欣高纯胡俊波龚建平
- 关键词：乳酸钠十二指肠残端瘘
- 卵巢癌多细胞球体对紫杉醇耐药及其机制的探讨被引量：9
- 2003年
- 背景和目的:多细胞球体(multicellularspheroids,MCS)对传统细胞毒化疗药物的敏感性明显低于单层细胞。本实验旨在探讨卵巢癌MCS耐药的分子机制。方法:以单层细胞为对照,以三维培养方法获得的人卵巢癌A2780MSC和CAOV3MCS为模型,采用台盼蓝拒染法比较紫杉醇对单层细胞和MCS生长的抑制作用,流式细胞仪比较单层细胞和MCS细胞周期的分布和细胞凋亡率;采用流式细胞仪、蛋白质免疫印迹法、激光共聚焦显微镜检测单层细胞及MCS的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达及亚细胞分布;采用RT-PCR法检测mdr1mRNA表达水平。结果:(1)不同浓度的紫杉醇(0.2、2.0、10.0、20.0μmol/L)作用后,MCS细胞生长抑制率明显低于单层细胞(PA2780=0.003,PCAOV3=0.015);经20.0μmol/L的紫杉醇作用后,单层细胞的细胞凋亡率明显高于MCS,差异有统计学意义(PA2780=0.034,PCAOV3=0.032)。(2)流式细胞仪、蛋白质免疫印迹法、激光共聚焦显微镜检测提示P-gp在单层细胞中不表达,在MCS中表达明显升高(P均<0.05);RT-PCR证实MCS中有mdr1mRNA表达,而单层细胞中未检出其表达。(3)流式细胞仪检测提示将单层细胞培养成MCS时,G0/G1期细胞比率增加,S期和G2/M期细胞比率降低(P均<0.05)。结论:卵巢癌MCS对紫杉醇化疗耐药性增加,其高表达P-gp。
- 邢辉高庆蕾杨晓葵李静高纯吴剑宏卢运萍马丁
- 关键词：卵巢癌多细胞球体紫杉醇耐药机制
- 多种流式细胞术分选凋亡细胞后共聚焦显微镜分析被引量：1
- 2005年
- 目的建立一种分析方法证实流式细胞术对细胞凋亡分析的准确性。方法在流式细胞仪上利用Sub G1法、TdT法、AnnexinⅤ法和API法4种不同的凋亡细胞分析方法,对羟基喜树碱(CAM)诱导的急性T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)进行流式细胞术分析并同时分选出不同时相的凋亡和非凋亡细胞,再经激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)进行形态学分析。结果①流式细胞术分选后共聚焦显微镜分析技术(PSC)能同时、准确地鉴别不同细胞周期时相的凋亡细胞和非凋亡细胞。②PSC技术能对同一群细胞内的凋亡细胞和坏死细胞进行形态学鉴别。③PSC技术证实了流式细胞术在细胞凋亡研究中的准确性。结论PSC技术结合了流式细胞术和LSCM的优点,更客观、准确地分析凋亡细胞,同时对细胞周期特异性的细胞凋亡有独到的优势,发展了细胞凋亡的分析方法。
- 高纯吴剑宏冯永东申漫里陶德定龚建平
- 关键词：细胞凋亡流式细胞术激光扫描共聚焦显微镜
- 一种新的双向电泳蛋白样品制备方法被引量：2
- 2006年
- 目的探讨双向凝胶电泳(2-DE)样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例,采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组,并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-D PAGE图谱的比较分析,发现采用8 mol/L Urea,2 mol/L Thiourea,4%CHAPS,1%NP-40,4%TritonX-100,65 mmol/L DTT,0.5 mmol/L PMSF,0.5%pharmalyte 3-10,能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品,从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。
- 李小兰谢大兴肖徽吴剑宏姚静冯永东陶德定刘双又胡俊波龚建平
- 关键词：蛋白质组双向电泳固相PH梯度MOLT-4细胞
- 胰胆管合流异常患者胆汁对人胆管癌细胞生长的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 研究胰胆管合流异常患者胆汁对人胆管癌细胞生长的影响 ,探讨胰胆管合流异常与胆管癌发生和发展的关系。方法 应用四唑氮蓝 (MTT)比色法检测胰胆管合流异常患者胆汁对人胆管癌细胞 QBC939增殖的影响 ,应用流式细胞仪 (FCM)测定细胞周期和细胞凋亡 ,采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测前列腺素 E2 (PGE2 )比例。结果 胰胆管合流异常患者胆汁与正常对照组胆汁比较明显促进胆管癌细胞 QBC939的增殖 (P<0 .0 1) ,这种促癌活性可被 COX- 2选择性抑制剂 celecoxib拮抗。细胞周期分析用胰胆管合流异常患者胆汁处理 2 4 h的 QBC939细胞增殖指数显著上升 (P<0 .0 1) ,S期细胞比例为 32 .2 4± 1.33% ,比正常对照组 (10 .5 6± 1.4 7% )明显增高 (P<0 .0 5 ) ,G0 / G1期细胞比例为 4 9.72 %± 4 .13% ,比正常对照组 (74 .81± 5 .10 % )明显降低 (P<0 .0 4 2 ) ,但胰胆管合流异常患者胆汁对 QBC939细胞凋亡率无明显影响 (P=0 .882 )。结论 胰胆管合流异常患者胆汁具有潜在的促癌活性 ,这种促癌活性依赖 COX- 2和 PGE2
- 吴高松吴剑宏罗先文邹声泉
- 关键词：胆汁胰胆管合流异常环氧合酶-2胆道肿瘤COX-2选择性抑制剂
