刘凌云
- 作品数：28 被引量：163H指数：9
- 供职机构：上海市杨浦区中心医院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金河北省科技攻关计划河北省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用于动物实验灌注的简易设备
- 本发明提供了一种用于动物实验灌注的简易设备，涉及生物学实验器材技术领域。该设备包括针头、直管和注射器；针头包括针管、圆形挡板、针头接口；针管的头部为平头针尖，针管的尾部套设有针头接口；圆形挡板可移动地套设在针管外壁上；直...
- 张晓光单畅朱晓琼薛杰刘凌云孔玉明王凡岳蕴华
- 文献传递
- 基因法治疗老年性痴呆病的研究
- 柴锡庆苏安英孙祎敏刘凌云孔卫娜冀营光崔润丽
- 选用腺相关病毒(AAV-2)为基因治疗载体，人类缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)为治疗基因，成功构建了高滴度、高纯度的重组人类缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体rAAV-HIF-1α；rAAV-HIF-1α体外转染原代培...
- 关键词：
- 关键词：老年性痴呆病基因治疗
- Ⅱ组代谢型谷氨酸受体阻断剂对老年痴呆大鼠模型脑内nNOS及nNOS mRNA表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的阐明Ⅱ组代谢型谷氨酸受体(metabotropic glutamate receptor2/3,mGluR2/3)对老年性痴呆(AD)发病过程中一氧化氮(NO)的影响。方法应用免疫组化和原位杂交方法,观察脑室应用Ⅱ组mGluR2/3阻断剂α-甲基-(4-四唑基-苯)甘氨酸(MTPG)对脑室β-淀粉样肽(Aβ)注射所致的AD大鼠神经型一氧化氮合酶(nNOS)及其mRNA表达的影响。48只SD大鼠随机分为假手术组、痴呆组、痴呆组+MTPG组,每组16只。各组大鼠均在Morris水迷宫测试后常温饲养1w后取材观察。结果假手术组海马CA1区锥体细胞轮廓清楚,排列整齐,胞浆有较弱的nNOS表达。痴呆组nNOS表达较假手术组明显增加,同时锥体细胞数目变少,锥体神经元的轮廓、形态出现明显的损伤性改变;脑室注射mGluR2/3阻断剂MTPG,可部分阻断AD引起的nNOS表达增加,对神经元的形态也有恢复作用。原位杂交与免疫组化显示相似的变化趋势。结论mGluR2/3参与AD发病过程,NO信号通路可能发挥重要作用。
- 冯荣芳刘凌云石卫东李娜冯亚青
- 关键词：神经型一氧化氮合酶代谢型谷氨酸受体
- PKC激动剂佛波醇酯诱导大鼠伤害性感受并促进脊髓NO产生
- 目的:观察PKC激动剂PMA诱导大鼠伤害性感受作用及对脊髓NOS表达和NO生成的影响。方法:采用行为学方法观察大鼠痛反应;热甩尾法测定大鼠痛阈变化;采用NADPH-d组织化学法和硝酸还原酶法分别测定大鼠脊髓内NOS表达和...
- 郭新华李清君刘凌云李文斌任丽丽
- 关键词：蛋白激酶C佛波醇酯痛觉过敏脊髓
- 文献传递
- 重组人缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体的构建及表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建重组人缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体(rAAV-HIF-1α).并观察其在原代培养海马神经细胞中的表达。方法:构建含人类HIF-1α基因的AAV载体质粒pSNAV-HIF-1α.转染BHK21细胞并选择培养获得的G418抗性细胞,即AAV载体细胞株.以重组单纯疱疹病毒感染此细胞株获得rAAV-HIF-1α,PCR技术鉴定病毒.地高辛标记的CMV探针点杂交方法测定重组病毒滴度.SDS-PAGE电泳测定病毒纯度.Western印迹检测目的蛋白的表达。结果:PCR证实rAAV- HIF-1α内含有人HIF-1α基因序列,病毒滴度为1×10^(12)/ml.纯度大干98%,感染原代培养海马神经细胞后能够表达目的蛋白。结论:成功构建了rAAV-HIF-1α,为进一步应用该基因进行临床基因治疗提供了实验依据。
- 柴锡庆刘凌云郑龙王俊霞程桂花杨涛
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α原代培养海马腺相关病毒
- 缺氧诱导因子-1α在老年性痴呆模型鼠海马中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的观察老年性痴呆(AD)大鼠行为学、海马神经细胞凋亡率及缺氧诱导因子(HIF)-1α表达水平的变化。方法侧脑室注射Aβ25～35构建AD大鼠模型,Morris水迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力,流式细胞术检测海马神经细胞凋亡率,Western印迹技术检测大鼠海马HIF-1α蛋白的表达。结果Morris水迷宫实验结果显示AD组大鼠平均逃避潜伏期显著延长(P<0.05),流式细胞分析结果显示,AD组海马神经细胞凋亡百分率较正常对照组显著升高(P<0.05),Western印迹检测结果显示,AD组海马神经细胞HIF-1α蛋白表达水平较正常对照组显著升高(P<0.05)。结论侧脑室注射Aβ25～35成功构建AD大鼠模型并上调海马神经细胞HIF-1α水平表达。
- 刘凌云马媛媛李欣柴锡庆
- 关键词：阿尔茨海默病缺氧诱导因子-1ΑΒ-淀粉样蛋白海马
- rt-PA早期静脉溶栓治疗急性脑梗死15例被引量：6
- 2010年
- 李欣丁素菊李雯刘凌云
- 关键词：脑梗死重组组织纤溶酶原激活剂静脉溶栓
- 鞘内注射MK-801对炎性痛大鼠海马NOS表达及NO含量的影响
- 2009年
- 目的:观察鞘内给予N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对足底注射甲醛诱导的自发痛反应和海马一氧化氮合酶(NOS)表达及一氧化氮(NO)含量的影响,探讨炎性痛诱导海马NO产生增多的机制。方法:通过观察舔足反射时间反映大鼠自发痛程度;采用NADPH-d组织化学法测定大鼠海马NOS表达;硝酸还原酶法测定海马组织NO含量。结果:足底注射甲醛后动物即出现舔、咬、摇动注射侧脚掌等自发痛相关表现,预先鞘内注射MK-801可使大鼠第二时相自发痛程度显著降低,但对第一时相痛反应程度无明显影响。注射甲醛后12h时,海马CA1、CA2～3区及DG区NOS阳性细胞数目、阳性细胞染色深度均显著增加,海马组织NO含量显著增加;预先鞘内注射MK-801,可使甲醛炎性痛大鼠海马各区NOS阳性细胞数目明显减少,阳性细胞染色深度明显变浅,海马NO含量明显降低。结论:鞘内注射MK-801可逆转甲醛炎性痛诱导的海马NOS表达及NO产生的增加,表明甲醛炎性痛诱导的海马NO产生增加主要是由于伤害性信息传入所引起。
- 刘凌云李清君胡玉燕郭新华李文斌
- 关键词：海马一氧化氮MK-801
- HIF-1α基因转染对β-淀粉样蛋白25-35诱导原代培养海马神经细胞凋亡的影响被引量：9
- 2007年
- 目的构建人类缺氧诱导因子-1α(human hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因真核表达载体pSNAV-HIF-1α,并观察其对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导原代培养海马神经细胞凋亡及细胞内游离钙离子浓度的影响。方法采用基因重组技术,将pBSKhHIF1αT7原核表达载体上HIF-1α基因序列克隆至真核表达载体pSNAV2.0,磷酸钙共沉淀法介导转染pSNAV-HIF-1α,Aβ25-35诱导原代培养海马神经细胞凋亡。Western blot检测HIF-1α蛋白表达,流式细胞术分析细胞凋亡百分率,激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。结果酶切、PCR及DNA测序结果均表明成功构建了重组质粒pSNAV-HIF-1α,磷酸钙共沉淀法介导的pSNAV-HIF-1α质粒转染显著增加了海马神经细胞HIF-1α蛋白表达(P<0.05),同时可显著降低Aβ25-35诱导海马神经细胞凋亡百分率及细胞内游离钙离子浓度上调(P<0.05)。结论缺氧诱导因子-1α基因转染可能通过抑制细胞内游离钙离子浓度上调使海马神经细胞对Aβ25-35产生抗凋亡作用。
- 刘凌云柴锡庆李清君程桂花
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α原代培养海马转染
- GSTM1空白基因型和吸烟与食管癌危险性的Meta分析被引量：1
- 2006年
- 目的：对谷胱甘肽-S-转移酶M1基因空白基因型与吸烟在食管癌发生中的相互作用进行Meta分析。方法：按吸烟与否进行分层合并分析。以OR值作为每个研究结果的效应测定指标。若各研究结果之间无显著异质性则采用固定效应模型（FEM），否则使用随机效应模型（REM）进行合并，同时给出Meta分析森林图。基因-环境交互作用分析采用单纯病例分析法进行。结果：共收集国内外相关资料5篇，积累病例560例，对照743例，吸烟组合并OR为1．523（95％CI：1．099-2．109）；不吸烟组合并OR为0．933（95％CI：0．469～1．855）；单纯病例合并分析显示，GSTM1空白基因型与吸烟交互作用合并OR值为1．363（0．954～1．949）。结论：吸烟可能会增加GSTMl空白基因型个体患食管癌的危险性，即携带GSTM1空白基因型的吸烟者其患癌的危险性可能会增加，GSTM1空白基因型与吸烟之间在食管癌的发生方面可能存在一定的交互作用。
- 郭新华黄志刚刘凌云
- 关键词：基因-环境交互作用食管癌META分析
