于德华
- 作品数：2 被引量：14H指数：2
- 供职机构：青岛海洋大学海洋生命学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 1种致病性鳗弧菌胞外蛋白酶的分离纯化及性质被引量：11
- 2002年
- 从山东省莱州海区自然发病的花鲈 (Lateolobraxjapanicus)体内分离到 1株致病性鳗弧菌 ,经硫酸铵盐析、DEAE SepharoseFastFlow和Sephadex G10 0凝胶层析等方法从其培养液中分离纯化了 1种胞外蛋白酶。用SDS PAGE电泳测得蛋白质的分子量为 36 7kD ,酶的最适温度为 5 0℃ ,对热不稳定 ,70℃ 15min完全失去活力 ;最适pH为 7 0 ;1mmol/L的PMSF对酶活性无影响 ,部分金属离子如Cu2 + 、Fe2 + 、Fe3 + 、Zn2 + 对酶活力有抑制作用 ,而Ca2 + 对酶有一定程度的激活作用 ,1mmol/LEDTA能完全抑制酶的活性 ,表明该酶是
- 陈吉祥刘霜李筠王祥红杜宗军于德华纪伟尚徐怀恕
- 关键词：鳗弧菌胞外蛋白酶分离纯化理化性质
- 致病性鳗弧菌金属蛋白酶基因克隆及序列分析被引量：8
- 2002年
- 从我国山东沿海发病的鲈鱼 (Lateolabraxjaponicus)分离到一株致病性鳗弧菌(Vibrioanguillarum)W 1 ,该菌的胞外蛋白酶活性为 42 2 6u/ml,部分纯化的胞外蛋白酶对海水养殖大菱鲆鱼有一定的毒性。应用PCR扩增 ,从鳗弧菌W 1染色体DNA扩增出一条长约 1 .92 5kb的特异性PCR产物 ,DNA序列分析表明 :克隆的片段含有完整的金属蛋白酶基因阅读框 ,编码 61 1个氨基酸残基的蛋白质 ,该金属蛋白酶基因与一株致病性鳗弧菌蛋白酶基因的核苷酸及氨基酸序列同源性为 1 0 0 % ,而与解蛋白弧菌 (V .proteolyticus)、创伤弧菌(V .vulnificus)、霍乱弧菌(V .cholerae)、斑点气单胞菌 (Aeromonaspunctata)、嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)的氨基酸序列同源性分别为 73 %、70 %、69%、5 3 %、5 1 %。
- 陈吉祥李筠王祥红杜宗军于德华纪伟尚徐怀恕
- 关键词：鳗弧菌金属蛋白酶毒性基因序列细菌病
