雷明军
- 作品数：58 被引量：50H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 弓形虫RH株SAG2基因片段的克隆、表达、纯化与鉴定
- 目的克隆弓形虫RH株膜表面抗原2(SAG2)编码基因,构建原核重组表达质粒PET23a-SAG2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达及纯化SAG2蛋白。方法PCR扩增503bp的SAG2编码基因目的片段,胶回收纯化...
- 雷明军吴少庭戴五星潘晖榕林绮萍温见翔黄达娜高世同张仁利
- 关键词：弓形虫克隆基因表达纯化免疫印迹
- 文献传递
- SARS冠状病毒S蛋白DNA疫苗的构建及其免疫效果研究
- 目的构建 SARS 冠状病毒棘突糖蛋白（S 蛋白）的两个片段 S1和 S2的真核表达质粒 pVAC -S1和 pVAC-S2,检测它们在哺乳动物细胞中的表达,并观察它们在小鼠中诱导的体液和细胞免疫应答。方法采用 PCR ...
- 秦莉王西明雷明军潘晖榕屈伸吴少庭袁仕善黄达娜高世同张仁利林绮萍温见翔
- 关键词：SARS冠状病毒
- 文献传递
- 弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究
- 目的用 pVAC-GRA4真核表达重组质粒免疫小鼠,观察其诱导的免疫应答及对弓形虫感染的保护性用。方法大量制备 pVAC-GRA4真核表达重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫 BALB/c 小鼠三次,以 pVAC 空质粒及...
- 吴少庭高世同张仁利黄达娜袁仕善林绮萍翁亚彪雷明军潘晖榕秦莉温见翔
- 关键词：弓形虫DNA免疫
- 文献传递
- SARS病毒N蛋白真核表达质粒的构建及其诱导的体液免疫应答
- 2004年
- 构建SARS病毒核衣壳蛋白(N)的真核表达质粒,并研究其在小鼠体内诱导的体液免疫应答.采用PCR方法体外扩增SARS病毒N蛋白基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-N重组质粒;大量制备该重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠三次,间接ELISA法测定免疫鼠IgG抗体效价.成功构建了重组表达质粒pVAC-N,免疫小鼠后可诱导产生出特异性的IgG抗体.构建的真核表达质粒pVAC-N能诱导小鼠产生特异性抗体,为SARS疫苗的进一步研究打下基础. ……
- 林绮萍吴少庭翁亚彪袁仕善高世同秦莉雷明军潘晖榕张仁利黄达娜温见翔
- SARS冠状病毒M蛋白全长基因的克隆、表达与纯化
- 2004年
- 克隆SARS冠状病毒M蛋白基因编码序列,构建原核重组表达质粒PET23a-M,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达、纯化.表达产物用WesternBlot检测其抗原性.RT-PCR扩增M编码基因目的片段,胶回收纯化,插入克隆载体pMD-18T载体并转化大肠杆菌DH5α.……
- 雷明军吴少庭戴五星秦莉潘晖榕袁仕善黄达娜高世同张仁利林绮萍
- SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达
- 2004年
- 构建SARS冠状病毒棘突蛋白部分序列2(S2)的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况.采用逆转录聚合酶链式反应技术从SARS冠状病毒基因组中扩增出编码S蛋白的第2170到2814位碱基的基因片段,克隆至pMD18-T载体,PCR筛选阳性克隆并测序.用限制性内切酶消化后,目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌JM109,PCR和双酶切鉴定转化菌落.将阳性菌落经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达.RT-PCR扩增出S2特异片段,经测序与GenBank比对存在1处碱基突变.S2基因片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2构建成重组表达质粒,并在JM109中表达了S2融合蛋白.成功构建了SARS冠状病毒S2的重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达了S2融合蛋白.……
- 秦莉吴少庭王西明袁仕善雷明军潘辉榕黄达娜高世同张仁利屈伸
- 弓形虫致密颗粒蛋白4的原核细胞表达与纯化被引量：5
- 2005年
- 目的构建弓形虫致密颗粒蛋白4(GRA4)的pET原核细胞表达系统,并对其表达产物进行纯化及其免疫学活性测定。方法利用PCR扩增弓形虫GRA4基因片段,定向亚克隆入原核细胞表达载体pET-23a(+),转化大肠埃希菌(E.coliBL21 DE3),以组氨酸结合柱亲和层析法纯化表达产物,并对其进行抗原活性分析。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其特异性抗体滴度。结果成功构建了弓形虫pET-GRA4原核细胞表达系统,其表达产物相对分子质量(Mr)约为40 000,主要以包涵体形式存在,纯化后的重组蛋白能被人工感染弓形虫RH株速殖子的兔血清识别。免疫小鼠后可诱导产生高滴度的特异性IgG抗体。结论利用pET原核细胞表达系统成功表达和纯化了弓形虫GRA4重组蛋白,该蛋白具有一定的免疫学活性。
- 林绮萍吴少庭翁亚彪雷明军潘晖榕袁仕善温见翔秦莉黄达娜张仁利高世同
- 关键词：弓形虫原核细胞基因表达蛋白纯化
- 弓形虫SAG2/GST融合蛋白在E.coli中的表达条件的研究与纯化
- 目的提高弓形虫SAG2/GST融合蛋白在在E.coli中的表达水平并纯化。方法对诱导温度、诱导物浓度与诱导时间等条件与目的蛋白在细菌裂解上清中的表达量的关系进行了研究。在表达条件优化后,大量制备目的蛋白利用Glutath...
- 雷明军吴少庭戴五星龙彩虹潘晖榕袁仕善黄达娜林绮萍
- 文献传递
- 弓形虫有效抗原表位的筛选及其对小鼠免疫保护性的研究
- 目的利用噬菌体随机肽库技术筛选弓形虫抗原的有效表位,并探讨其免疫保护效果。方法用纯化的弓形虫免疫兔血清IgG对噬菌体12肽库进行三轮筛选,对获得的目的噬菌体用间接ELISA和Dot-ELISA检测其特异性,并对其中的某些...
- 林绮萍吴少庭翁亚彪袁仕善温见翔张仁利高世同黄达娜雷明军潘晖榕秦莉
- 关键词：弓形虫抗原表位噬菌体随机肽库免疫筛选免疫保护
- 文献传递
- 弓形虫表面抗原SAG1 DNA疫苗的构建被引量：4
- 2004年
- 目的 构建真核重组表达质粒 pVAX1-SAG1,并探讨其诱导的体液免疫应答。 方法 采用多聚酶链反应技术 ,从弓形虫RH株基因组DNA中扩增截短型的SAG1基因片断 ,并克隆至载体pMD18-T ,经菌落PCR鉴定和测序分析后 ,亚克隆至真核表达载体 pVAX1,构建重组真核表达质粒pVAX1-SAG1,并予菌落PCR和双酶切鉴定。以此为疫苗候选分子免疫小鼠 ,检测其诱导产生的抗体。结果 PCR扩增出SAG1基因的截短型片段 ,其大小约 780bp ;测序的阳性TA克隆除两处发生同义突变外 ,其余序列与原序列一致 ;TA克隆的插入片段被亚克隆到真核表达载体 pVAX1,构建了重组表达质粒pVAX1-SAG1;该质粒诱导小鼠产生了抗弓形虫抗原的抗体。 结论 成功构建了弓形虫表面抗原SAG1的DNA疫苗。
- 黄达娜吴少庭袁仕善高世同张仁利雷明军潘晖榕林琦萍秦莉
- 关键词：弓形虫表面抗原SAG1DNA疫苗多聚酶链反应技术
