吕合作
- 作品数：74 被引量：171H指数：9
- 供职机构：蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 流式细胞术检测脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群被引量：2
- 2013年
- 目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法。方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组。SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞。分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化。结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0.07±0.02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9.90±3.28)%和(4.95±0.17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0.21±0.09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18.71±0.49)%和(27.07±3.74)%,差异均有统计学意义(P<0.05～P<0.01)。结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群。
- 朱海胡建国吕合作
- 关键词：脊髓损伤流式细胞术
- 炎症小体活化对脊髓损伤局部免疫微环境的影响被引量：5
- 2018年
- 炎症小体是一种高分子量的多蛋白复合物,能够诱导细胞在炎性和应激的病理条件下死亡。脊髓损伤后,损伤局部微环境会出现多种功能不同的免疫细胞。自然条件下损伤脊髓局部微环境中的免疫细胞亚群是"阴阳"失衡的,破坏性的亚群和细胞因子占主导地位,是造成脊髓损伤病理损伤的重要机制。在中枢神经系统的损伤过程中,炎症小体发挥极为核心的作用。虽然,炎症小体的活化及其导致的IL-1β和IL-18在脊髓损伤部位均有表达,但迄今未见它们对脊髓损伤局部免疫微环境影响的报道。根据目前的研究进展,我们认为炎症小体的活化可以影响脊髓损伤局部免疫微环境,这是一个有趣的课题,但相关的研究确鲜有报道。本综述主要对四种与中枢神经系统损伤相关的炎症小体在结构、功能等方面进行阐述,对炎症小体活化与脊髓损伤免疫微环境的关系进行探讨。
- 王赛男(综述)胡建国吕合作
- 关键词：脊髓损伤中枢神经系统免疫微环境
- 纯化的结核杆菌多肽抗原刺激人γδT细胞的效应分析被引量：10
- 2004年
- 目的 :探讨从结核杆菌多肽抗原 (Mtb Ag)纯化的多肽 (C主肽 )对人新鲜外周血γδT细胞的促增殖效应以及对已活化扩增的T细胞再次刺激的激活效应。方法 :采用不同剂量的C主肽体外刺激健康人外周血PBMC ,培养 10天时经流式细胞仪检测细胞表型 ;另外以γδT细胞活化标志分子CD6 9的表达为指标 ,分析C主肽对已被Mtb Ag激活扩增 13天的γδT细胞再次刺激的激活效应。同时以MTT法检测C主肽的再刺激对已活化扩增的γδT细胞的促增殖活性。结果 :结核杆菌C主肽对人新鲜的γδT细胞具有显著扩增效应 ;当C主肽再刺激已经活化的γδT细胞时 ,可使其显著表达CD6 9分子 ,同时对γδT细胞具有显著促增殖活性。结论 :结核杆菌C主肽可能是Mtb
- 陈勇吕合作李柏青王伟张海峰
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌多肽抗原增殖活性CD69
- 单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)作为T细胞活化标志的探讨被引量：2
- 2005年
- 目的:比较、分析单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)和CD69分子在人外周血γδT和CD3+T细胞上的表达规律。方法:用抗CD3单克隆抗体(mAb)和结核杆菌抗原(MtbAg)等刺激剂分别刺激人外周血单个核细胞(PBMC),部分实验组同时使用信号转导途径阻断剂处理。用流式细胞术检测不同时相γδT和CD3+T细胞上GM1和CD69分子的表达率。结果:MtbAg刺激PBMC后0.5h,γδT细胞上即表达GM1,随着时间的推移表达水平持续升高;而CD69的表达出现在刺激后的3h,于24h达高峰,然后逐渐下降,72h明显降低,6d时已接近静止状态。抗CD3mAb刺激的CD3+T细胞上,GM1和CD69表达的规律类似于γδT细胞。PD98059和LY294002均能够阻断MtbAg刺激所致的γδT细胞上GM1的表达,PMA能够促进GM1的表达。结论:GM1可作为一种新的T细胞活化的标志,其与早期短暂表达的CD69分子有不同的表达规律。GM1的表达可能与RasErk通路、PI3K和PKC有关。
- 吕合作李柏青
- 关键词：单唾液酸四己糖神经节苷脂CD69ΓΔT细胞活化
- 218例急性白血病流式细胞术免疫表型分析被引量：3
- 2010年
- 目的研究急性白血病(AL)免疫表型特征及诊断价值。方法采用流式细胞术(FCM)对218例初诊急性白血病患者进行免疫分型。结果急性髓系白血病(AML)患者均表达两种以上髓系抗原,其中部分伴有淋系抗原(CD7)表达。急性淋系白血病(ALL)患者均表达淋系抗原,部分表达一种或两种髓系抗原。14例混合型白血病同时表达两种以上淋系和髓系抗原标志。4例慢粒急淋变既表达髓系抗原又表达淋系抗原。结论 FCM免疫分型是在细胞形态学和细胞化学染色基础上对急性白血病诊断与分型的重要补充。
- 赵皓余晾吕合作郑宏波项平
- 关键词：急性白血病免疫表型流式细胞术
- 大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体的构建与包装被引量：1
- 2015年
- 目的构建大鼠少突胶质细胞转录因子1(Olig1)的慢病毒表达载体,并进行鉴定和包装。方法采用聚合酶链反应(PCR),分别以大鼠pEGFP-N3-Olig1表达质粒和pDsRed-monomer-N1为模板,扩增获得大鼠Olig1片段和红色荧光蛋白(RFP)片段。将两者进行PCR拼接获得Olig1-RFP片段,并与pLenti6.3-MCS-DEST载体连接,构建获得pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体,并进行酶切鉴定、测序。然后,将其与包装质粒混合后共转染HEK293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒。结果通过酶切鉴定、测序,证明pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体构建成功,且能够被高效地包装为病毒颗粒。结论成功建立大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达系统,为进一步研究Olig1的生物学作用提供了实验基础。
- 席进陈月娟张楠张敬星胡建国吕合作
- 关键词：慢病毒表达载体聚合酶链反应
- Olig1过表达对大鼠神经干细胞向少突胶质细胞分化的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:Olig1基因修饰的神经干细胞(NSCs)移植治疗中枢神经脱髓鞘疾病具有重要的应用前景。本研究目的是构建大鼠olig1真核表达载体,并观察其过表达对大鼠NSCs向少突胶质细胞分化的影响。方法:采用RT-PCR,以新生大鼠脊髓RNA为模板,扩增olig1基因,定向克隆到pEGFP-N3载体中;用电穿孔方法转染pEGFP-N3-olig1表达载体至NSCs中,然后用RT-PCR鉴定olig1的表达,免疫荧光染色鉴定NSCs向少突胶质细胞的分化情况。结果:成功构建了pEGFP-N3-olig1真核表达载体,olig1在重组质粒转染的NSCs中能够高效表达。重组质粒转染的NSCs在体外诱导分化后,能够较空质粒转染的NSCs产生更多的少突胶质细胞(P<0.01)。结论:Olig1过表达能够显著促进大鼠NSCs向少突胶质细胞方向分化。
- 吕合作邹健王艳霞陆佩华
- 关键词：克隆神经干细胞
- 一种网格行走检测装置
- 本实用新型涉及动物实验装置，更具体地说，涉及一种分析大鼠行走功能的实验装置。一种网格行走检测装置，机箱内有适合大鼠直线运动的跑道，跑道的底部有网格板，网格板下方有空腔，摄像装置或电信号传感装置对应空腔；摄像装置或电信号传...
- 陆佩华徐亮徐晓明马政文吕合作
- 文献传递
- 孕妇血清铜蓝蛋白氧化酶活力的变化被引量：10
- 2000年
- 目的 :探讨孕妇血清铜蓝蛋白氧化酶活力的变化。方法 :以O Dianisidin为基质 ,采用联大茴香胺酶比色法测定87名孕妇和 6 5名健康非妊娠妇女血清铜蓝蛋白 (sCP)的活力。结果 :妊娠小于 8周的妇女与健康非妊娠妇女的sCP活力水平差异无显著性 (P >0 .0 5 )。妊娠大于 8周的妇女sCP活力均高于健康非妊娠妇女 (P <0 .0 1) ,而晚期妊娠妇女sCP活力均高于其他各组 (P <0 .0 1)。结论 :妇女妊娠 8周后sCP升高是其对妊娠期铜、铁代谢改变的一种适应 ;对一些临床疾病的鉴别诊断有参考价值。
- 吕合作胡守芬陈治文
- 关键词：血清铜蓝蛋白孕妇氧化酶
- 4-1BB在人外周血γδT细胞活化中的协同刺激作用
- 2006年
- 采用结核杆菌(Mtb)低分子多肽刺激人外周血单个核细胞,流式细胞术(FCM)检测不同活化时相γδT细胞膜表面4-1BB分子的表达;用阻断型4-1BB配体(4-1BBL)单抗阻断4-1BB/4-1BBL信号,FCM检测γδT细胞的增殖比率和细胞内产生IFN-γ的情况,同时与阻断CD28/B7-1信号相比较。结果显示,静止的γδT细胞膜表面不表达4-1BB分子,Mtb抗原刺激后6 h,4-1BB即有明显表达(29.71%),48 h达到高峰(49.79%);与未阻断组相比,阻断4-1BB/4-1BBL信号,γδT细胞的增殖效应和细胞内IFN-γ的产生均明显下降(P<0.01),与CD28/B7-1信号阻断组相比,差异无显著性(P>0.05)。提示4-1BB/4-1BBL信号同CD28/B7-1信号一样,可为γδT细胞活化提供协同刺激作用。
- 吴俊英钱峰吕合作王伟
- 关键词：4-1BBΓΔT细胞活化增殖
