管惟滨
- 作品数：36 被引量：41H指数：4
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- 银染法观察胶体金标记的恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白与人红细胞的结合作用被引量：2
- 1996年
- 恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白－１，又称Ｐ１９５，与人红细胞膜具有结合作用，这种结合是裂殖子识别红细胞的基础。为了确定Ｐ１９５蛋白与人红细胞的结合位点，我们在大肠杆菌中分８段表达了Ｐ１９５蛋白。各段表达蛋白经过提纯与复性后，用胶体金标记。标记后的各段蛋白分别与人红细胞共孵育。然后将此红细胞加入到银显影液中。结果发现，红细胞在与一段Ｐ１９５蛋白（Ｍ６，氨基酸序列为３８４－５９５）共孵育并加入到银显影液中后，红细胞表面出现黑色银沉淀。而红细胞在与其它各段Ｐ１９５蛋白进行同样操作后，红细胞表面没有出现黑色银沉淀。这表明经胶体金标记后的Ｍ６与人红细胞具有结合作用。Ｍ６所对应的区域可能就是Ｐ１９５蛋白的红细胞结合区域。
- 方军戚丽君钱锋何斌管惟滨
- 关键词：恶性疟原虫胶体金疟原虫
- 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2000年
- 目的：克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白２全基因，并在大肠杆菌中进行表达。方法：采用ＰＣＲ扩增恶性疟原虫ＦＣＣ－１／ＨＮ株ＭＳＰ２基因，克隆插入ｐＵＣ１９，并重组人表达质粒载体中，转化大肠杆菌，诱导重组质粒ｐＢＫ－ＣＭＶ／ｍｓｐ２表达ＭＳＰ２蛋白抗原，对表达产物进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｗｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定。结果：ＰＣＲ扩增出８２４ｂｐＤＮＡ片段。
- 陈志辉管惟滨吴少廷缪为民焦炳华
- 关键词：恶性疟原虫基因克隆大肠杆菌
- 含恶性疟原虫基因片段的重组减毒鼠伤寒杆菌的免疫效果被引量：2
- 2000年
- 减毒鼠伤寒杆菌可被用作外源抗原基因经口导入宿主免疫系统的载体,能有效地激发起宿主针对该外源抗原的免疫应答反应.恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(merozoite surfaceprotein 1,MSP1)是恶性疟原虫红内期的重要候选抗原.我们已成功地将克隆有恶性疟原虫MSP1第1号基因片段(M1)的pQE质粒导入了减毒鼠伤寒杆菌x4064株中,构建成x4064(pQEM1)重组菌,测定了其在小鼠体内的稳定性.本文就X4064(pQEM1)重组菌接种小鼠后所激发的针对M1蛋白的免疫应答进行了初步的检测.
- 钱锋管惟滨方军蒋春雷
- 关键词：减毒鼠伤寒杆菌恶性疟原虫免疫
- 疟原虫与青蒿素--试论抗疟药复合组方的要点
- 管惟滨
- 抗恶性疟原虫Fcc7801/HN株单克隆抗体的制备
- 1992年
- 用海南省恶性疟原虫Fcc7801/HN株抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经3次克隆化,获得4株(C6,H6,B6,2H6)分泌抗恶性疟原虫红内期单克隆抗体的杂交瘤细胞株。其中C6,B62株单克隆抗体(McAb)有显著的抑制恶性疟原虫体外生长的作用,免疫印迹法检测它们均能识别分子量为71kD的疟原虫抗原,提示此抗原具有免疫保护作用。4株McAb能与恶性疟原虫Fcc-1/HN,Fcc7802/HN、Fcc8703/JS以及伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫发生交叉免疫荧光反应,说明这些疟原虫之间存在着共同的抗原决定簇,这为疟疾免疫学研究和血清诊断学提供了有利条件。
- 蒋春雷管惟滨王笑利孔宪涛
- 关键词：恶性疟原虫单克隆抗体免疫学
- 用胶体金标记法观察P195蛋白与人红细胞特异性结合区域
- 1997年
- 目的：寻找恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白Ｐ１９５中的红细胞结合位点，为设计疫苗阻断裂殖子入侵人红细胞提供实验依据。方法：在大肠杆菌中分８段表达Ｐ１９５蛋白，用镍亲和层析柱分离这些蛋白。各段蛋白经复性后用胶体金标记。标记后的蛋白与人红细胞共孵育，经固定、切片后在电镜下观察。同时将各段蛋白加入到体外培养的人恶性疟原虫的培养基上清中，观察各段蛋白对裂殖子入侵红细胞的影响。结果：Ｐ１９５蛋白中的一段，即Ｍ６（氨基酸序列３８４～５９５）具有红细胞结合作用。Ｍ６的胶体金复合物不能与经胰酶和神经氨酸酶处理过的红细胞发生结合。Ｍ６还能抑制裂殖子入侵红细胞。结论：Ｐ１９５的一段区域（Ｍ６）具有唾液酸残基依赖性红细胞结合作用，它可能是恶性疟原虫裂殖子识别人红细胞的“标志”。
- 方军何斌管惟滨
- 关键词：恶性疟原虫胶体金红细胞疟原虫
- PCR扩增环子孢子蛋白基因3' 端片段用于检测恶性疟原虫的初步研究被引量：2
- 1997年
- 目的 :建立 PCR检测恶性疟原虫的新方法。方法 :作者采用自行设计并合成的一对恶性疟原虫特异引物 ,经 PCR扩增环子孢子蛋白 ( CSP)基因 3 端保守区序列 2 4 5bp片段 ,观察了它的特异性、敏感性和稳定性。结果 :1从 4株培养的恶性疟原虫和 2例恶性疟患者血样中均扩增出约 2 4 5bp的 DNA目的片段 ,用业已鉴定的 CSP基因序列作模板再行扩增证实其为恶性疟原虫CSP基因片段 ;2对间日疟原虫、利什曼原虫、弓形虫和健康人血样进行 PCR反应 ,均未见扩增条带 ;3本检测系统可检出恶性疟原虫感染血样中 0 .18个原虫所含的 DNA模板 ;4采用不同方法制备模板及不同反应方式均能获得满意结果 ;结论 :PCR扩增恶性疟原虫 CSP基因 3 端片段用于恶性疟原虫检测具有灵敏、高度特异且稳定性好等优点。
- 陈志辉吴少廷管惟滨高世同林敏
- 关键词：恶性疟原虫聚合酶链反应
- 伯氏疟原虫的浓集和纯化被引量：2
- 1991年
- 在进行疟原虫生物化学、免疫学及分子生物学研究时,疟原虫样品中宿主成分的污染常会影响实验结果。因此需要分离纯净的疟原虫作为实验材料。分离的方法有聚蔗糖、泛影葡胺及明胶溶液法。近年认为Percoll溶液是首选的分离介质,然而该液昂贵,需进口。
- 缪为民许传亮管惟滨
- 关键词：伯氏疟原虫浓集纯化
- 恶性疟原虫红内期抗原差异分析
- 1991年
- 选用一组抗恶性疟原虫红内期裂殖体抗原gp195的单克隆抗体,分析海南省、江苏省恶性疟原虫分离株gp195的抗原差异。间接荧光抗体试验表明,6个恶性疟原虫分离株的gp195抗原既合共同性抗原决定簇,也含特异性抗原决定簇。根据原虫对该组单抗的反应差异,可划分为两个主要的gp195血清型。恶性疟原虫FCC_(8705)/JS为Ⅰ型;FCC/HN为Ⅱ型,FCC_(7802)/HN、FCC_(8702)/HN为Ⅱ_2型; FCC_(7801)/HN、FCC_(8701)/HN为Ⅰ+Ⅱ混合型。免疫印迹法显示,恶性疟原虫FCC_(8705)/JS、FCC_1/HN、FCC_(8702)/HN、FCC_(7801)/HN gp195分子量分别为210kD_8、200kD_a、200kD_a、198kD_a。其中江苏FCC_(8705)/JS的gp195分子量高于其它三个海南分离株。作者对gp195抗原差异的规律及其对疟疾疫苗研究的影响作了讨论。
- 缪为民管惟滨潘卫庆
- 关键词：疟原虫裂殖体
- 磺化标记的DNA探针用于检测恶性疟感染的评价
- 1993年
- 采用非同位素磺化修饰法(sulfomodification),标记恶性疟原虫DNA重组质粒片段pPF14。用此探针,以斑点杂交试验检测恶性疟原虫感染,并和常规血片法进行比较。结果显示:对于体外培养的恶性疟原虫,该法可检出25 pg纯化的DNA,或0.001％的原虫率。探针和人白细胞、鼠伯氏疟原虫、约氏疟原虫DNA均无交叉反应。对179份云南省西双版纳自治州疟疾病人血样进行检测,探针法结果和血片法有较好的相关性,探针法检测恶性疟的符合率为92.5％(99/107),和间日疟的交叉反应率为1.39％(1/72),和48例正常人血无一交叉反应。
- 缪为民管惟滨徐晓春周元昌陆德如董蓓华陈蕊雯
- 关键词：DNA探针疟疾
