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杨俊: 作品数：27 被引量：67H指数：5; 供职机构：重庆出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目重庆市科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>

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智利进口种牛乳头瘤病毒的检测与分析被引量：1: 2017年; 通过临床观察、采样、PCR检测、克隆和测序,对智利进口种牛进行了牛乳头瘤病毒(BPV)检测和基因分型。结果表明,智利进口牛的BPV总体感染率为0.4%,病毒亚型有BPV2和BPV13,其中以BPV2为主,BPV13的感染率仅为0.09%。L基因进化分析表明,BPV智利株和我国BPV的感染情况显著不同,呈现明显的地域特征,两国的BPV2 L1基因具有较高的同源性。BPV阳性牛的治疗结果显示,75%左右的阳性牛经外科剪切、抗生素治疗后愈合良好,但仍有部分牛出现新的小疣。调查结果提示:BPV感染并非全为一过性感染;BPV13亚型仍为我国外来亚型,仍需进出口检验检疫部门加强对BPV的检疫。; 王昱唐昌杰肖红波聂福平马飞杨俊陈冉越吴蕊

应用随机引物法鉴定伪劣羊肉卷中的肉种成分被引量：2: 2014年; 为鉴定市场抽检的来源不明的伪劣"羊肉卷"中的肉种成分,采用随机引物法,PCR扩增肉制品DNA,将阳性产物回收、克隆并测序,然后根据序列信息设计特异性的荧光定量引物进行再次鉴定。结果表明,获得了针对伪劣"羊肉卷"的阳性克隆,序列比对表明样品中含有北极狐或火狐肉成分,经特异性的荧光定量PCR确认样品为火狐肉。结果表明,可以应用随机引物PCR鉴定伪劣"羊肉卷"中的肉种成分。; 王昱叶自霞聂福平肖进文杨俊袁增壮王国民李应国李正国; 关键词：肉制品

孟加拉进口黄鳝中致病性嗜水气单胞菌的分离与鉴定被引量：2: 2013年; [目的]了解致病性睹水气单胞菌的存在状况和风险水平.[方法]采用分离培养、生化鉴定、序列测定和动物试验等方法,对2批孟加拉进口黄鳝进行致病性睹水气单胞菌检测.[结果]从孟加拉进口黄鳝体内分离出4株高度致病性的嗜水气单胞菌.嗜水气单胞菌对孟加拉黄鳝本身致病性不明显,但是对小鼠的致病性却高达10 000～ 100 000 CFU/ml.[结论]孟加拉进口黄鳝存在致病性睹水气单胞菌的感染,且对我国的食品和卫生安全存在一定的风险.; 王昱袁增壮聂福平肖进文杨俊李应国叶自霞李正国; 关键词：致病性嗜水气单胞菌

猪六种重要病原寡核苷酸芯片检测方法的初步建立被引量：1: 2016年; 为建立同时鉴别检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）、副猪嗜血杆菌（HPS）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪肺炎支原体（Mhp）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪瘟病毒（CSFV）这6种病原的寡核苷酸芯片方法,根据这6种病原的特异保守序列,设计了6对特异性引物和探针,建立多重PCR体系,优化杂交参数,进行方法评估。结果显示,该方法检测APP、HPS、Mhp、PCV2、PRRSV及CSFV的灵敏度分别为5.8×10^2copies/L、7.8×10^3copies/L、6.8×10^3copies/L、6.3×10^2copies/L、4.8×10^3copies/L、5.5×10^2copies/L,且与猪源伪狂犬病病毒、猪细小病毒、日本乙型脑炎病毒、猪水疱病病毒、水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病病毒、小反刍兽疫病毒及沙门菌等9种病原无交叉反应。用建立的多重PCR对186份临床样本的检测结果显示,单一感染率为18.3%（34/186）,混合感染率为5.9%（11/186）,与测序验证完全一致。该方法为多种病原的流行病学调查和临床诊断提供了一种快速、高通量的检测手段。; 保雨聂福平杨俊王昱刘亚娟王国民李贤良李应国张超刘力; 关键词：寡核苷酸芯片 HPS MHP PCV2 PRRSV CSFV

食品中3种致病菌多重PCR检测方法的建立及初步应用被引量：4: 2012年; 建立用多重聚合酶链式反应(Multiplex polymerase chain reaction,mPCR)同时检测食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生性李斯特菌的方法。以沙门氏菌的gyrB基因、单核细胞增生性李斯特菌的gyrB基因、金黄色葡萄球菌的coa基因作为目的基因,分别设计3对引物,通过优化反应体系,建立3种致病菌的多重PCR检测体系。采用单重PCR检测时,灵敏度可达0.423ng/mL(沙门氏菌)、2.5ng/mL(金黄色葡萄球菌)和0.36ng/mL(单核细胞增生性李斯特菌);而采用三重PCR检测时,灵敏度较单重PCR有所下降,分别为2.43ng/mL(沙门氏菌)、2.5ng/mL(金黄色葡萄球菌)、3.6ng/mL(单核细胞增生性李斯特菌)。初步建立能同时、快速、灵敏地检测食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生性李斯特菌的三重PCR方法。; 周蓓莉肖进文刘生峰李应国周庆聂福平王昱杨俊; 关键词：食源性致病菌食品

肺炎嗜衣原体MOMP基因的克隆与原核表达: 2014年; 克隆了肺炎嗜衣原体外膜主蛋白(major out membrane protein,MOMP)基因,并进行了原核表达。根据GenBank公布的肺炎嗜衣原体MOMP基因序列,设计克隆引物后用普通PCR方法扩增出肺炎嗜衣原体MOMP基因的完整片段,将其克隆到pMD-19T后进行测序,经序列比对正确后将此片段亚克隆到表达载体pET-32a(+)中,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达,再采用SDS-PAGE和Western-Blot检测重组蛋白的表达情况。结果表明:本研究克隆了肺炎嗜衣原体MOMP基因并在原核系统中成功表达了MOMP重组蛋白,且WesternBlot显示该重组蛋白具有免疫学活性。; 张存亮聂福平王昱杨俊李应国蔡家利; 关键词：肺炎嗜衣原体克隆原核表达

欧盟猪瘟区域化防控实践综述被引量：1: 2014年; 欧盟从20世纪80年代明确提出建设猪瘟无疫区,通过不断加强法规体系建设、强化保护区和监测区建设以及无疫区的认可等区域化的防控措施,对欧盟境内猪瘟疫情实现了较为有效的防控。本文通过介绍和解读欧盟猪瘟防控策略和相关法规,概括介述欧盟对猪瘟区域化建设的经验和做法,旨在为我国猪瘟无规定动物疫病区的建设提供借鉴。; 王昱刘环李应国聂福平杨俊李正国; 关键词：猪瘟保护区欧盟

迟缓爱德华氏菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4: 2018年; 为建立一种快速、敏感检测迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）的方法,本研究根据E.Tarda的促旋酶B亚单位基因（gyr B）保守区设计特异性引物和Taq Man探针,并优化检测反应条件,建立了E.tarda的Taq Man实时荧光PCR检测方法。结果显示,该方法仅对E.tarda的靶基因扩增呈阳性,而对创伤弧菌、福氏志贺氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、单核增生性李斯特菌、肠炎沙门菌、溶藻弧菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157、温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、霍乱弧菌等相关致病菌检测结果均为阴性,特异性良好;该方法对E.tarda检测的灵敏度为20 CFU/m L;重复性试验表明,该方法的变异系数在0.95%~2.44%之间,具有良好的重复性。本研究结果表明,建立的E.tarda Taq Man实时荧光PCR方法灵敏、快速、特异性强、重复性好,适用于E.tarda检疫、疫情监测及流行病学调查。; 杨俊聂福平李应国张欢王昱刘生峰袁飞张雷吴蕊唐昌杰陈冉越王国民; 关键词：迟缓爱德华氏菌实时荧光PCR B基因

蓝舌病、口蹄疫、小反刍兽疫和水泡性口炎多重PCR检测方法的建立被引量：5: 2015年; 为建立一种检测并鉴别蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒和水泡性口炎病毒感染的方法,针对蓝舌病病毒NS3基因、口蹄疫病毒3D基因、小反刍兽疫病毒N基因和水泡性口炎病毒N基因序列设计引物,优化反应体系和扩增条件,建立了一种同时检测4种病毒的多重PCR方法。对建立的多重PCR检测方法的特异性及敏感性进行检验,结果表明建立的多重PCR检测方法敏感性强、特异性良好,对4种病毒的最低检出限分别为PPRV 103 copies/μL、BTV 103 copies/μL、VSV 103 copies/μL和FMDV 102 copies/μL。本方法的建立对临床感染蓝舌病等4种病毒的病畜进行快速检测具有十分重要的意义。; 秦敏邹丰才杨云庆祝贺聂福平王煜杨俊叶玲玲周晓黎艾军; 关键词：蓝舌病口蹄疫小反刍兽疫水泡性口炎多重PCR

猪衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 2014年; 为了建立猪衣原体（Chlamydia suis ）实时荧光定量 PCR（real-time PCR）检测方法，根据猪衣原体（C．cuis ）的 MOMP 基因，选取高度特异保守的区域，设计实时荧光定量 PCR 引物和探针，并构建了重组质粒。结果显示，该方法建立的标准曲线方程为：Y＝-3．2147x＋41．218，线性相关系数为0．9991，扩增效率为104．6％，最低检测量为1．7＆#215;102 copies ！μL。该检测方法特异性较好，与鹦鹉热亲衣原体、流产亲衣原体、沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、牛羊亲衣原体、鼠衣原体无交叉反应。批内和批间重复试验的变异系数在0．458％～1．174％范围内，具有较好的重复性；与普通 PCR 方法相比较，该方法具有较高的检出率。建立对猪衣原体的监测和流行病学调查都具有非常重要的意义。; 袁曾壮王昱聂福平杨俊李应国肖进文王国民李贤良刘力; 关键词：猪衣原体实时荧光定量PCR

杨俊

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