李向臣
- 作品数：126 被引量：316H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科技资源平台项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>
- 玻璃化冷冻对卵母细胞纺锤体分布的影响
- 引言纺锤体是卵母细胞的一个重要组成部分,由极间微管、染色体牵丝及区间牵丝排列组成。纺锤体对细胞质和周围环境的改变非常敏感,冷冻-解冻过程中很容易造成纺锤体的损伤。研究表明,解冻后的纺锤体组织不能维持原有的高度有序结构,在...
- 李向臣姚雅馨赵倩君浦亚斌王义鹏关伟军马月辉
- 文献传递
- 牛供体细胞的来源、血清饥饿和预激活对核移植卵体外胚胎发育的影响被引量：11
- 2003年
- 牛皮肤成纤维细胞经血清饥饿或预激活处理后获得核胞体 ,并注入去核卵母细胞内构建重组胚。检查重组胚 2 4h和 36h卵裂率以及 8d囊胚率 ,以评估供体细胞及其处理方法对体细胞核移植效果的影响。实验结果表明 :来自 3个年龄 (6、 18和 36月龄 )、 2个品系 (红安格斯肉牛和荷斯坦奶牛 )的 4头供体牛皮肤细胞重组胚的卵裂率和囊胚率均无差异。生长到完全汇合的 36月龄荷斯坦牛供体细胞血清饥饿 10～ 13d组重组胚的 36h卵裂率显著低于 0d (对照 )、 3～ 5d和 6～ 9d组 ,囊胚率显著低于 3～ 5d组 ;经 5 μmol/L离子霉素或7%乙醇预激活 5min重组胚的卵裂率和囊胚率均与对照组无差异。
- 李雪峰安志兴李煜郭继彤李向臣张涌
- 关键词：供体细胞血清饥饿体细胞核移植
- 山羊乳腺上皮细胞的分离、培养与超微结构观察被引量：37
- 2005年
- 从山羊乳腺取部分组织进行细胞培养,并通过控时消化分离纯化山羊乳腺上皮细胞,建立了山羊乳腺上皮细胞系。结果表明:用含150 U/mL I型胶原酶和100 U/mL透明质酸酶的混合液,37 ℃消化组织块4h,可得到大量的分散单细胞用于原代培养,该法是获得山羊乳腺组织单细胞的适宜方法;以含 10%胎牛血清和双抗的 RP MI1640或DEME/F12培养液为基础液,在培养液中添加氢化考的松、胰岛素样生长因子 I(IGF I)、表皮生长因子(EGF)及胰岛素 转铁蛋白 硒钠(ITS)对山羊乳腺上皮细胞的生长具有较明显的促进作用。上皮细胞显微和超微结构显示:山羊乳腺上皮细胞在体外培养过程中可形成岛屿状单层聚集和类似圆顶状的结构;传代培养到第 7 代的细胞仍增殖旺盛,细胞内有丰富的脂滴和高尔基小泡,细胞分泌活动旺盛。
- 李向臣任芳丽张涌
- 关键词：超微结构乳腺上皮细胞脂滴小泡
- 基于cytb基因探讨家绵羊和多角绵羊的系统发育被引量：17
- 2010年
- 【目的】研究中国家绵羊起源进化以及多角绵羊和普通家绵羊的亲缘关系。【方法】测定8个省区42个绵羊个体的细胞色素b基因全序列。【结果】本试验的绵羊个体可定义为40个单倍型,单倍型多样度为0.997±0.006,核苷酸多样度为0.793%。中国绵羊群体可分为4个支系(A、B、C和D),其中支系D首次在中国绵羊群体中被检测到;支系B与支系C的差异最大,分化时间大约为595±150万年。多角绵羊与家绵羊聚在一起,而与野绵羊亲缘关系较远,分属于支系A、B和D。【结论】系统发育分析表明,中国绵羊有多个母系起源或经过多次驯化,未发现盘羊、东方盘羊和亚洲摩佛伦羊与绵羊母系祖先形成相关的分子证据。
- 赵倩君关伟军乔海云孟详人韩建林李向臣何晓红浦亚斌马月辉
- 关键词：绵羊细胞色素B
- 鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养及生物学特性被引量：9
- 2013年
- 为研究鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞生物学特性,取30～50日龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞。结果显示,试验成功地分离了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,原代培养并传代至16代,免疫细胞化学染色检测卫星细胞表面特异性标志Desmin、MyoD呈阳性表达,RT-PCR检测Desmin、c-Met、Myf5、pax7呈阳性表达;绘制生长曲线,结果说明细胞具有较强增殖能力;应用流式细胞仪对细胞进行周期分析,结果显示S期细胞所占比例为8.94%;骨骼肌卫星细胞向成肌细胞诱导10d后,免疫细胞化学染色检测成肌特异性标志骨骼肌肌球蛋白呈阳性表达;骨骼肌卫星细胞向脂肪细胞诱导7d后,油红O染色呈阳性,RT-PCR检测脂肪细胞特异性标志pparγ、LPL呈阳性表达。结果表明试验成功建立了鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞的体外扩增培养体系,且该骨骼肌卫星细胞有发育形成肌管和脂肪细胞的多项分化潜能。
- 边艳超牧仁李向臣李云章关伟军
- 关键词：骨骼肌卫星细胞体外扩增增殖能力
- 精原干细胞生物学特性研究
- 2014年
- 雄性生殖干细胞,即精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs),能够自我更新,在体外一定条件下可以分化为精子,在精子发生过程中具有重要作用。SSCs是生殖细胞中唯一的干细胞,能够将遗传信息传递给下一代。文章就SSCs的起源、表面标记、分离、纯化和体外培养展开论述,并探讨了SSCs在人类医学上的应用前景和面临的问题。
- 崔鹏李向臣关伟军马月辉
- 关键词：精原干细胞纯化体外培养
- CdCl_2对牛卵母细胞体外成熟及凋亡的影响被引量：4
- 2011年
- 利用不同浓度(0,0.8,1.6,2.4μg/mL)的氯化镉(CdCl2)对处理牛卵母细胞前后对其成熟率、凋亡率、Ca2+分布、线粒体膜电位、Bcl-2与Bax的基因表达的影响,初步为重金属对雌性哺乳动物生殖细胞发育及细胞凋亡机制的进一步研究打下基础。利用0,0.8,1.6,2.4μg/mL的氯化镉(CdCl2)处理牛卵母细胞22 h,统计其凋亡率及死亡率;利用Annexin V-FITC检测牛卵母细胞的早期凋亡;分别用Fluo-3/AM和Rh123检测卵母细胞的Ca2+分布及其线粒体膜电位的变化;利用RT-PCR检测促凋亡基因Bcl-2和抑凋亡基因Bax的相对表达。经过上述处理后,0.8μg/mL处理组卵母细胞的成熟率和凋亡率与对照组相比差异不显著(P>0.05),而1.6μg/mL和2.4μg/mL处理组与对照组相比差异显著(P<0.05);随着处理浓度的增加,胞浆Ca2+的荧光强度逐渐增强,线粒体膜电位逐渐下降,bcl-2与Bax的相对比值下降。CdCl2诱导卵母细胞的凋亡呈剂量效应,可以抑制卵母细胞的成熟,促进细胞的凋亡。
- 刘涛李向臣关伟军马月辉
- 关键词：CDCL2牛卵母细胞体外成熟凋亡
- 一种诱导人成纤维细胞重编程成脂肪细胞的方法
- 本发明涉及了一种将人成纤维细胞重编程并诱导成脂肪细胞的方法，它包括：解冻复苏成纤维细胞，待细胞生长至对数期后利用5μM reversine处理人成纤维细胞4d，之后利用成脂肪细胞诱导液进行诱导，21d后可将其诱导为成脂肪...
- 李向臣何晓红胡鹏飞赵晨琼汪宇峰王军崔鹏关伟军
- 文献传递
- 牛游离脂肪酸受体1基因研究
- 2013年
- ffar-1在胰腺组织和神经系统中均有着重要作用,但其作用机制,尤其是在神经系统中的机制仍不清楚。以牛ffar-1基因为研究对象,通过生物信息学预测并分析该基因的核心启动子区域,利用5'RACR技术扩增牛ffar-1基因mRNA 5'UTR区域,同时构建牛ffar-1基因真核表达载体并在真核细胞中进行表达。生物信息学分析表明,牛ffar-1基因核心启动子属于TATA-less,Int-DPE类型;5'RACE结果将牛ffar-1基因mRNA序列向上游推进了726 bp;成功构建了牛ffar-1真核表达载体pIRES-EGFP-bffar-1,并在真核细胞中进行了表达。从启动子序列、mRNA 5'UTR及真核细胞表达3个方面对牛ffar-1基因进行了初步研究,为该基因功能及调控的相关研究提供理论和试验依据。
- 武珅浦亚斌李向臣关伟军马月辉
- 关键词：启动子真核表达
- 昆明小鼠原核胚在不同培养液中的体外发育被引量：5
- 2003年
- 目的 优化昆明小鼠原核胚胎体外培养系统 ,提高胚胎发育率。方法 小鼠经超排获得原核期胚胎 ,制备小鼠输卵管上皮共培养系统 ,使用M16、CZB和KSOM培养液进行体外培养 ,并对体内和体外发育的囊胚细胞计数。结果 在KSOM和CZB中添加胎牛血清能显著提高胚胎囊胚发育率 (14 71%对 85 71% ;6 4 5 %对10 81% ) ;输卵管上皮共培养可以提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率 ,同时提高胚胎质量和同步发育 ,小鼠胚胎在KSOMFBS中囊胚发育率达 85 19% ,显著高于CZB和M16。结论 在小鼠输卵管上皮共培养条件下 ,KSOMFBS能够很好支持昆明小鼠原核期胚胎体外发育。
- 安志兴李雪峰李向臣王强王超张涌
- 关键词：体外培养小鼠原核胚体外发育
