王非 作品数:22 被引量:119 H指数:6 供职机构: 安徽省动物疫病预防与控制中心 更多>> 发文基金: 安徽省科技攻关计划 国家科技支撑计划 安徽省科技厅十五攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
屠宰生猪多重耐药沙门菌I类整合子与耐药基因的检测 被引量:10 2008年 目的了解屠宰生猪沙门菌分离株多重耐药与I类整合子及耐药基因的携带关系。方法采用K-B纸片法对屠宰生猪78株沙门菌分离菌株进行22种抗生素敏感试验;应用PCR技术对沙门菌分离菌株进行I类整合子及耐药基因检测。结果78株沙门菌分离株中有41株(52.56%)对2种以上抗生素耐药,属于多重耐药株,强力霉素-四环素-卡那霉素-氯霉素是主要多重耐药谱;41株多重耐药菌中有19株(46.34%)携带I类整合子,tetB、aph(3)-IIa和Flor基因分别检出最高。结论沙门菌多重耐药性与整合子的携带之间关系密切,耐药表型测定结果与耐药基因检测结果一致。 李郁 焦新安 魏建忠 王桂军 张玮 王非关键词:屠宰生猪 多重耐药 沙门菌 耐药基因 Ⅰ型鸭病毒性肝炎RT-PCR检测方法研究 被引量:6 2007年 根据Ⅰ型鸭病毒性肝炎ZJ/06强毒株的测序结果,在其基因组3D基因区设计合成一对可扩增238 bp的特异性引物,成功的建立了检测DHV-Ⅰ的RT-PCR方法,并确定了其特异性与敏感性,对DHV-Ⅰ分离毒株和临床病料进行RT-PCR检测均得到阳性扩增结果,而作为阴性对照的常见4种鸭病病原:鸭瘟病毒、鸭产蛋综合症病毒、鸭副粘病毒、鸭里默氏杆菌均未扩增到任何片断。利用BHK-21细胞、SPF鸡胚对DHV-Ⅰ临床病料进行病毒分离鉴定,结果表明建立的DHV-Ⅰ的RT-PCR检测方法具有快速、特异、敏感的特点。 华炯钢 王非 刘光清 倪征 云涛 余斌 梁华丽 李双茂关键词:鸭病毒性肝炎病毒 RT-PCR 安徽省部分规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学调查 被引量:3 2009年 在安徽部分地区采集了14个猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)免疫猪场和13个非PRRS免疫猪场不同猪群血清样品743份,应用ELISA方法检测PRRSV抗体。结果显示,未免疫猪场PRRSV抗体平均阳性率为31.17%,猪场阳性率为76.92%;免疫PRRS猪场抗体平均阳性率为62.99%。通过SPSS3.0软件数据分析表明,PRRS免疫猪场与未免疫猪场PRRS抗体阳性率差异极显著(P<0.01),提示安徽省规模猪场存在PRRSV隐性感染。 王非 占松鹤 刘华 王军 何长生 曹晋蓉 朱良强关键词:规模化猪场 猪繁殖与呼吸综合征 血清学调查 2003年-2007年安徽省犬狂犬病流行病学调查报告 被引量:7 2009年 为了摸清近几年安徽省犬狂犬病发病率上升的原因,对2003年-2007年全省犬狂犬病进行了流行病学调查。结果表明,犬狂犬病流行高峰期集中在夏秋季,流行区域主要集中在江淮之间地区。犬饲养量增加,犬狂犬病免疫率不高,病原学和抗体监测工作开展不全面,是近年来安徽省犬狂犬病发病率上升的主要原因。 陈静 朱良强 刘华 占松鹤 洪功飞 郑举 何长生 王非 王军关键词:狂犬病 流行病学 猪繁殖与呼吸综合征病毒安徽株的分离与鉴定 被引量:3 2009年 从安徽地区的发病猪场的病料中,分离到3株致Marc-145细胞病变的病毒(命名为AH1、AH2、AH3),负染电镜观察结果可见直径约50 nm的有囊膜的球形病毒粒子,细胞超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为40~80 nm。理化特性研究结果表明,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、温度(56℃)敏感;间接免疫荧光试验结果显示,分离株与美洲型PRRS阳性血清反应,发出强特异性荧光;对分离毒株Nsp2基因序列分析发现:安徽分离毒株Nsp2基因存在两处共90个碱基缺失现象,与JXA1 PRRSV变异株亲缘性最近。初步鉴定该分离株为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。 朱良强 王非 占松鹤 何长生 王爱萍 姚雪静 王立 刘华 王军 沈艳关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验 被引量:16 2008年 使用猪O型口蹄疫合成肽疫苗与猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫30-40日龄商品猪,免疫采用正向间接血凝试验、液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14d、28d、35d、42d、56d及二次免疫后7d、14d、28d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%-100%。与注射高效灭活苗组比较表明:合成肽疫苗临床使用的安全性较高,免疫抗体合格率明显优于猪O型口蹄疫高效灭活苗。 占松鹤 朱良强 刘华 何长生 江定丰 王军 王非 郑举 潘鑫关键词:口蹄疫 合成肽疫苗 免疫抗体 猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定 被引量:5 2009年 采集临床疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病料,经处理后进行细胞培养、电镜观察、半数细胞感染量测定、间接免疫荧光试验、动物回归试验以及RT—PCR检测,分离到1株病毒。分离株在Marc.145细胞上连续4代后出现特异性细胞病变;电镜观察到直径50~80nm的病毒粒子,有囊膜;TCID50为10^-4.7/0.1mL;与美洲型PRRSV阳性血清进行间接免疫荧光试验可见特征性荧光;RT—PCR检测结果为阳性;回归40日龄血清阴性仔猪可出现PRRSV感染的典型临床症状和病理变化,并且可检测到血清中的特异性抗体。结果表明分离株为PRRSV,命名为PRRSV—SCH07。 杨德康 王桂军 李郁 朱良强 王非 孙裴 秦爱建 魏建忠关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 鸡ILV、IBV、NDV和AIV多重RT-PCR检测方法的初步建立 被引量:5 2007年 初步建立了鸡传染性喉气管炎(IL)、鸡传染性支气管炎(IB)、新城疫(ND)和禽流感(AI)的多重RT- PCR鉴别诊断方法,并对其特异性和敏感性进行了检测。结果表明,所设计的4对引物可对同一样品中的ILV、IBV、NDV和AIV进行特异性扩增,所扩增的目的片断的长度分别为620 bp(ILV)、445 bp(IBV)、344 bp(NDV)和240 bp (AIV);建立的RT-PCR检测方法能够检测出10 pg AIV、1 ng NDV和10 ng IBV的RNA及100 pg ILV的DNA,说明该检测方法特异性强,敏感性较高。本研究所建立的多重RT-PCR方法可用于上述鸡4种病毒性呼吸道疾病的快速鉴别诊断,在临床诊断和流行病学调查方面具有较好的应用前景。 王非 蒋建一 华炯刚 母安雄 云涛 王桂军 魏建忠 刘光清关键词:鸡传染性支气管炎 鸡新城疫 禽流感 致病性沙门菌的耐药表型分析及其耐药基因检测 被引量:3 2008年 采用K-B法测定自雏鸡分离的致病性沙门菌对四环素等20种抗生素的耐药情况,并应用PCR方法检测相应的耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、tetE和tetG。结果显示,受试4株菌株全部对四环素、强力霉素高度耐受,在染色体上均有tetA基因存在,其中3株在质粒上还存在tetB基因,耐药表型与耐药基因的检测结果完全相符。表明tetA和tetB基因是决定本试验中临床分离沙门菌株对四环素类抗菌药物耐药的主要原因。 李郁 魏建忠 张玮 王强 谢玉洁 王非关键词:沙门菌 耐药表型 耐药基因 不同来源PRRS灭活疫苗(NVCD-JXA1株)对仔猪免疫效果比较 被引量:2 2008年 [目的]研究PRRSV灭活疫苗(NVDC-JXA1株)的免疫效果。[方法]选择3个厂家生产的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(NVDC-JXA1株),对28~90日龄仔猪进行免疫,观察免疫应激反应,监测抗体变化。[结果]不同厂家生产的疫苗免疫仔猪后,免疫副反应均较小,无过敏症状出现。南京天邦、内蒙金宇疫苗分别在免疫后14、90d检测到抗体,浙江易邦疫苗在免疫后14、60d检测到抗体。抗体维持时间为15~30d。同一厂家生产的疫苗免疫相同日龄仔猪,正常剂量、加倍剂量处理的抗体阳性率差异不明显。不同免疫日龄仔猪,抗体检出阳性率不同,55日龄以上仔猪的抗体产生早,抗体阳性率高。[结论]该研究为安徽地区猪蓝耳病疫苗的选择提供了参考。 占松鹤 朱良强 何长生 江定丰 刘华 郑举 王非 王军关键词:灭活疫苗 仔猪 抗体 免疫效果