刘闻闻
- 作品数:14 被引量:21H指数:3
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- 相关领域:医药卫生生物学电子电信更多>>
- NKX3.1对前列腺特异基因PCAN1表达调控机制的研究
- NKX3.1是前列腺细胞特异表达的受雄激素调控的同源盒基因。人NKX3.1基因位于染色体8p21,基因全长约4.2 kb,编码234个氨基酸,其产物在结构与功能上属于核转录因子,具有抑制前列腺上皮生长及维持分化的作用。研...
- 刘闻闻
- 关键词:启动子顺式作用元件反式作用因子
- 文献传递
- 糖皮质激素受体在小鼠单纯疱疹病毒性面瘫中的表达变化被引量:5
- 2011年
- 目的通过建立1型单纯疱疹病毒(Hsv-1)致小鼠面瘫模型,探讨糖皮质激素受体(GR)在面瘫小鼠面部运动皮层及面神经核团中的表达变化规律。方法选取89只4周龄Balb/c雌性小鼠随机分为空白对照组(n=8只)和实验组(n=81只),实验组用26G针头在右耳廓背面近耳根处皮肤连续搔刮后,将25μL HSV-1接种创面上,空白对照组不做处理。分别于面瘫后6、12、24、48、72h及7d取组织,采用蛋白质印迹法(western blot)、RT-PCR法、免疫组织化学技术方法检测小鼠中枢神经系统中糖皮质激素受体的表达变化规律。结果实验组接种HSV-1后,其中44只出现面瘫,面瘫率为54.32%。GR mRNA在面瘫早期小鼠的大脑面部运动皮层及面神经核团中表达逐渐降低,6h达最低值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。之后逐渐升高,于48h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。之后又逐渐降低,7d时已接近对照组,但其差异无统计学意义(P>0.05)。GR mRNA表达变化规律与GR蛋白表达变化相一致。免疫组织化学显示在面神经核团中可见糖皮质激素受体阳性细胞表达,并且也存在先降低后升高的变化规律。结论病毒性面瘫后糖皮质激素受体表达水平呈动态变化,提示糖皮质激素受体表达水平与面神经损伤的进展密切相关,对于临床上合理应用糖皮质激素治疗贝尔面瘫,防止激素抵抗现象具有指导意义。
- 姜振王海波李建峰韩月臣徐磊刘闻闻毛彦妍
- 关键词:受体糖皮质激素面瘫
- 人同源盒基因NKX3.1cDNA真核表达载体的构建及表达被引量:1
- 2006年
- 目的:构建人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达情况。方法:以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3.1基因全长编码片段,T/A克隆至pCR2.1载体中。经酶切、测序鉴定后,将NKX3.1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。将pcDNA3.1-NKX3.1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP细胞,RT-PCR和Western blot法检测NKX3.1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达。结果:人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体pcD-NA3.1-NKX3.1经酶切及测序鉴定正确。pcDNA3.1-NKX3.1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和West-ern blot证明在mRNA和蛋白水平均能有效表达NKX3.1。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-NKX3.1,转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP后能有效表达。
- 刘闻闻于春晓崔福爱张鹏举胡晓燕陈蔚文张建业姜安丽
- 关键词:真核表达载体基因表达转染
- 过氧亚硝酸盐对耳蜗螺旋神经节细胞的损伤作用及机制研究
- 第一部分姜黄素对过氧亚硝酸盐损伤大鼠耳蜗螺旋神经节细胞的保护作用及机制研究 实验目的:研究过氧亚硝酸盐(peroxynitrite,ONOO)对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion neuron,SG...
- 刘闻闻
- 关键词:耳蜗螺旋神经节细胞凋亡诱导因子核酸内切酶G
- 遗传性耳聋基因治疗临床指南
- 2024年
- 遗传性耳聋是一种常见的遗传性疾病,新生儿的发病率为1‰~3‰。患者终身携带致病突变,导致不可逆性耳聋,至今尚无临床可用的治疗药物。在部分遗传性耳聋动物模型中,基因治疗已被证实为潜在有效的治疗方法。国内外已开展了多项遗传性耳聋基因治疗的临床试验。其中,由东南大学附属中大医院牵头,联合国内多家医院成功开展的遗传性耳聋基因治疗临床试验,取得了显著的疗效,并积累了丰富的经验。为规范遗传性耳聋基因治疗并提供临床研究指导,全国多家医院的耳科专家讨论制定了遗传性耳聋基因治疗临床指南,内容涵盖了伦理审查、遗传性耳聋的诊断和入组标准、临床前准备、药物、疗效与安全性评估标准、术后言语康复等。本指南将为耳聋基因治疗的临床诊疗提供规范的理论和技术指导。
- 齐洁玉谈方志张李燕陆玲陆玲王洪阳刘闻闻李文妍贺祖宏刘闻闻孙珊方巧军董耀东丁小琼童步升曹现宝董耀东朱学伟童步升马璐郭敏于亚峰汪芹樊建刚张天虹于亚峰李永新樊建刚崔勇吴佩娜张宏征何双八郭维维杨见明钱晓云叶放蕾何双八曹卫杨见明钱晓云赵宇袁慧军陈晓巍孙宇杨仕明夏明王秋菊李华伟徐磊柴人杰
- 关键词:遗传性耳聋基因治疗
- 大鼠面神经损伤后神经营养因子-4的动态表达被引量:3
- 2010年
- 目的研究大鼠面神经损伤后NT-4在面神经、触须肌以及面神经核团中表达的动态变化规律。方法以30只Wistar大鼠建立面神经骨管内挤压伤模型,分别于建模后1、3、7、14、21d取大鼠面神经、触须肌、以及脑桥组织并提取总RNA和蛋白,采用RT-PCR和Western-Blot技术检测不同时段NT-4的表达变化,应用免疫组织化学方法观察其表达部位。结果正常的大鼠面神经、触须肌以及脑桥中均有少量的NT-4表达;NT-4在面神经损伤后大鼠的面神经和面神经核团中表达逐渐增高,并且于第14天达到高峰,随后下降;NT-4的表达变化趋势在mR-NA和蛋白水平一致。在触须肌中,NT-4的表达量逐渐减少,于第14天降至最低,并维持较低水平。结论面神经损伤后,NT-4在神经束和核团神经元细胞中的表达呈现出先升高后下降的动态趋势,而在面神经所支配的肌肉组织中的表达逐渐降低,提示神经组织中NT-4的表达水平和面神经损伤密切相关。
- 秦晨王海波李建峰韩月臣刘闻闻逯素梅
- 关键词:面神经神经营养因子-4
- 姜黄素对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞氧化损伤的保护作用
- 目的观察姜黄素对peroxynitrite诱导的大鼠耳蜗螺旋神经节细胞氧化损伤的保护作用,探讨可能的机制。方法培养新生大鼠耳蜗螺旋神经节细胞,peroxynitrite作用24h后,分别加入不同浓度的姜黄素或是同一有效浓...
- 刘闻闻樊兆民李建峰王海波
- 病毒性面瘫小鼠脾脏糖皮质激素受体表达的研究被引量:3
- 2012年
- 目的建立1型单纯疱疹病毒(HSV-1)致小鼠面瘫的模型,探讨糖皮质激素受体(GR)在面瘫小鼠脾脏中的表达。方法选择4周龄Balb/c雄性小鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组及实验组。实验组小鼠用搔刮法接种病毒于左耳耳郭后,对照组接种生理盐水。分别于面瘫后不同时间点取脾脏,采用real-time PCR、westernblot、免疫组织化学技术检测小鼠脾脏中糖皮质激素受体的表达变化规律。结果实验组GR mRNA及蛋白于面瘫后24 h达最低值,与生理盐水对照组及空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),之后逐渐升高,于3 d达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),之后又逐渐降低,7 d时与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学显示在实验组小鼠脾脏中可见GR阳性细胞。结论 GR在HSV-1致病毒性面瘫小鼠脾脏中的表达呈现先降低后增高,再恢复至对照水平的表达规律。提示小鼠病毒性面瘫后,脾脏中GR呈规律性的表达变化,可能在面瘫的发生发展过程中发挥一定的作用。
- 古林涛王海波李建峰韩月臣刘闻闻毛彦妍
- 关键词:糖皮质激素受体脾脏1型单纯疱疹病毒面瘫
- 外泌体在感音神经性聋中的作用研究进展
- 2023年
- 感音神经性聋是一种常见的致残性内耳疾病,由于耳蜗、听神经或听觉中枢部位产生病变引起,具有不可逆性,目前尚无法通过药物治疗。外泌体是细胞主动分泌到胞外的具有生物活性的纳米级双层脂质囊泡,包括多种特异性蛋白质、脂质和核酸,靶向作用于受体细胞,参与细胞间信息交流。研究发现,外泌体可能参与听觉细胞间物质传递及信息交流。本文综述外泌体在感音神经性聋发生发展中的作用和潜在临床应用价值的相关研究进展。
- 孟雨王雪陈放路钧泽王嫚王嫚
- 关键词:感音神经性聋外泌体生物标志物
- 人miRNA let-7a2质粒的构建及其表达被引量:1
- 2009年
- 目的构建人miRNA let-7a2真核表达质粒,检测其在肺癌细胞A549中的表达。方法以人肺腺癌A549细胞总RNA为模板,将RT-PCR扩增let-7a2的前体(pre-let7a2)序列,克隆至pSilencer4.1-CMVneo表达载体中,构建pSilencer4.1-let7a2重组质粒,转染A549细胞,采用RT-PCR法检测pre-let7a2的表达;构建let-7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR-Report-let7a2T,与pSilencer4.1-let7a2质粒共转染A549细胞,测定相对荧光素酶活性,以检测成熟let7a2在A549细胞中的表达及作用;采用MTT比色法检测pSilencer4.1-let7a2转染对A549细胞增殖的影响。结果构建的人let-7a2真核表达质粒pSilencer4.1-let7a2和let7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR-Report-let7a2T经酶切及测序鉴定正确;pSilencer4.1-let7a2质粒转染A549细胞后,RT-PCR检测pre-let7a2表达较对照组明显增强;MTT比色法显示let-7a2对A549细胞增殖有抑制作用。pSilencer4.1-let7a2质粒和pMIR-Report-let7a2T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测相对荧光素酶活性较对照组降低,显示let-7a2表达质粒转染A549细胞后,可有效表达let-7a2并转变为成熟的具有生物学活性的let-7a2。结论成功构建了人let-7a2真核表达质粒,并在肺腺癌细胞A549中有效表达。
- 关恒云张菊张鹏举陈蔚文刘闻闻于春晓胡晓燕姜安丽
- 关键词:肺肿瘤基因表达调控MIRNA