王春梅 作品数:73 被引量:98 H指数:5 供职机构: 东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 黑龙江省高等教育教学改革工程项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 文化科学 更多>>
Bta-miR-142-3p对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响 被引量:3 2015年 为研究Bta-mi R-142-3P对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的调节作用,采用脂质体转染技术改变Bta-mi R-142-3P在奶牛乳腺上皮细胞中的表达量,甘油三酯酶法测定试剂盒、Lacto-se/D-Glucose(Rapid)Assay Kit、western blotting技术、流式细胞仪检测mi R-142-3p对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响。结果显示Bta-mi R-142-3p沉寂后,细胞周期发生改变,β-酪蛋白表达增加,甘油三酯分泌增加,乳糖分泌量未见明显改变。研究表明,Bta-mi R-142-3P可通过抑制奶牛乳腺上皮细胞的增殖能力影响泌乳功能。 于蕾 王春梅 崔英俊 林叶 张莉 曲波 高学军 李庆章关键词:奶牛乳腺上皮细胞 泌乳功能 GSK3β通过mTOR/S6K1途径对奶牛乳腺上皮细胞泌乳及增殖的调控 <正>近些年,研究人员发现AKT/PI_3K下游的mTOR信号途径不仅可以调节细胞生长及增殖,而且营养素和激素可通过mTOR信号途径调节乳蛋白合成;类固醇调控单元结合蛋白(sterol regulatory elemen... 张霞 崔英俊 林叶 张莉 张娜 王春梅 李庆章 高学军关键词:奶牛乳腺上皮细胞 文献传递 Pten基因对奶牛乳腺上皮细胞泌乳的调节功能 2016年 该研究以泌乳中期的奶牛乳腺上皮细胞为模型,探索Pten基因的表达与奶牛乳腺发育和泌乳之间的关系,目的在于揭示Pten基因在奶牛乳腺中的调节作用,为动物乳腺发育和泌乳调节机制的研究提供基础资料。该研究以中国荷斯坦奶牛作为实验动物,应用荧光定量q RT-PCR、Westernblotting和免疫组织化学技术,对奶牛不同发育阶段及不同乳品质的乳腺组织中Pten m RNA和蛋白质的相对表达量进行检测;以体外培养的泌乳中期奶牛乳腺上皮细胞为研究对象,构建重组质粒p GCMV-PtenIRES-EGFP,对细胞进行瞬时转染,进行Pten基因过表达实验;应用RNA干扰的方法用Pten si RNA瞬时转染细胞,进行Pten基因抑制实验。分别用相关试剂盒检测Pten基因过表达和抑制之后细胞?-酪蛋白、甘油三酯以及乳糖分泌的情况,为了检测Pten基因对奶牛乳腺上皮细胞活力和增殖能力的影响,分别应用CASY-TT细胞分析仪和流式细胞仪检测细胞活性和细胞周期,采用荧光定量q RT-PCR和Western blotting技术,在m RNA和蛋白水平检测与泌乳相关的信号通路基因的表达变化;同时,添加外源性催乳素和葡萄糖培养细胞,检测培养液上清中?-酪蛋白、甘油三酯和乳糖的浓度,以及Pten基因的表达量变化,从而探索Pten基因在催乳素诱导的葡萄糖转化生成乳糖过程中的作用。研究结果表明,泌乳期Pten基因表达量显著低于干乳期。与泌乳期低乳品质奶牛乳腺相比,泌乳期高乳品质的奶牛乳腺组织中Pten m RNA和蛋白表达水平分别降低了30%和40%;Pten基因过表达可抑制奶牛乳腺上皮细胞的活力、增殖能力以及?-酪蛋白、甘油三酯和乳糖的分泌量(<0.05),使奶牛乳腺上皮细胞中MAPK、Cyclin D1、AKT、m TOR、S6K1、STAT5、SREBP1、PPAR?、PRLR、GLUT1的表达下调(<0.05),并上调4EBP1的表达水平(<0.05);Pten基因抑制实验表现出相反的结果;而Pten基因的过表达和抑制对ELF5的� 王卓然 王春梅 王杰 李庆章 高学军关键词:奶牛乳腺 发育 泌乳 PTEN miR-138对小鼠乳腺发育及泌乳功能的影响 2014年 microRNAs(miRNAs)在各种类型细胞增殖、分化和凋亡中发挥了重要作用。miR-138参与乳腺发育周期过程中细胞增殖分化的调控。试验以小鼠为动物模型,尾静脉注射miR-138基因抑制剂,应用幼鼠体重称重法,检测miR-138抑制后乳腺泌乳量变化;应用电子显微镜等技术观测乳腺组织形态变化,抑制miR-138后,小鼠乳腺上皮细胞增加,乳汁分泌量增加;抑制miR-138后,观察小鼠乳腺组织超微结构可发现,乳腺细胞的代谢活动增强;收集尾静脉注射miR-138抑制剂的小鼠乳汁,检测发现其乳糖、乳中酪蛋白含量均有所增高。研究认为,miR-138可刺激乳腺上皮细胞增殖,增加乳腺发育泌乳过程中乳的分泌,并且调控乳汁中重要成分含量。 李丹 王杰 谢雪娇 李庆章 王春梅关键词:乳腺发育 泌乳 lncRNA在奶牛乳腺乳品质调控中的作用 lncRNA(long noncoding RNA)正在逐渐成为发育过程中的关键调控者,lncRNAs调控基因表达中发挥主导作用,与其严格的时空表达模式相结合,表明它们可能在发育过程中起到一个显著地调控作用。 王学辉 夏安婷 崔英俊 张莉 林叶 高学军 李庆章 王春梅关键词:泌乳 层粘连蛋白对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白表达的调控 被引量:1 2019年 激素或生长因子调控依赖于整联蛋白介导的细胞-细胞外基质相互作用,层粘连蛋白及其细胞表面特异受体整联蛋白β1亚基是小鼠泌乳分化的必要条件,但它们参与奶牛泌乳分化调控的作用机制尚待阐明。本研究以LN作为培养底物,体外培养泌乳期奶牛乳腺上皮细胞,添加催乳复合物诱导BMECs的乳蛋白表达,并对整联蛋白的β1亚基进行了组织和细胞定位,实验结果显示,添加LN能在蛋白水平增加整联蛋白β1亚基表达,同时对催乳复合物诱导乳铁蛋白和β-酪蛋白表达也有促进作用,因此,上调整联蛋白β1表达来增强BMECs对催乳素的应答可能是LN促进泌乳分化的一种作用方式。 王春梅 门晶晶 李璐 张娜 王保胜 赵锋关键词:泌乳 层粘连蛋白 整联蛋白 细胞分化 奶牛乳腺上皮细胞E-cadherin/Beta-catenin的定位及表达 奶牛乳腺是乳汁合成及分泌的重要器官,乳腺的发育和泌乳功能调控与细胞结合和连接关系密切,其中钙粘连蛋白(E-cadherin)作为细胞连接和信号转导中的重要因子,在乳腺发育及泌乳过程中发挥一定的作用。本研究以荷斯坦奶牛为实... 童津津 曲波 高学军 王春梅 张莉 林叶 李庆章关键词:牛乳腺上皮细胞 王不留行 文献传递 脂肪酸与PPARγ基因互作对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪合成的调节作用及机理 <正>乳脂肪是牛奶的主要营养成分,可以为人类提供营养和能量,然而我国牛奶中乳脂肪的含量普遍偏低,因此提高乳产量及乳脂肪含量成为我们亟待解决的问题。本课题对奶牛乳腺上皮细胞(I)CMECs)添加乙酸钠、β-羟基丁酸钠、乙酸... 刘莉莉 崔英俊 高学军 王春梅 张莉 林叶 张娜 李庆章关键词:乳脂肪 奶牛乳腺上皮细胞 基因互作 文献传递 miR-129-5p调节小鼠乳腺上皮细胞内Igf-1的表达 被引量:4 2011年 MicroRNAs(miRNAs)是一类大约22个核苷酸的非编码RNA.它能通过调控生长因子表达,引发肿瘤形成、细胞增殖和组织器官发育.本文通过构建miR-129-5p靶基因序列的双荧光素酶报告载体分析了miR-129-5p与靶基因之间的关系,应用脂质体转染技术和实时荧光定量技术观察了miR-129-5p在小鼠乳腺上皮细胞中的表达量及其变化,通过CASY细胞活力仪检测转染后的细胞增殖与活力变化,采用Western印迹方法检Igf-1的变化.结果表明:miR-129-5p在小鼠乳腺青春期表达最高,成功构建了Igf-1基因3'UTR荧光素酶报告载体,miR-129-5p抑制其荧光素酶活性(P<0.01),转染抑制子后miR-129-5p表达降低(P<0.01),胰岛素样生长因子(Igf-1)表达增强(P<0.05),细胞增殖和活力增强(P<0.01),结果提示:miR-129-5p可能通过抑制靶基因蛋白Igf-1的表达,进而抑制小鼠乳腺上皮细胞增殖和活力. 丁巍 李庆章 王春梅 李晔 崔巍 冯丽关键词:乳腺上皮细胞 氨基酸与STAT5A基因互作对奶牛乳腺上皮细胞泌乳的调节作用及机理 <正>奶牛的氨基酸需要量是动物营养研究领域一直争论的话题,建立理想蛋白质氨基酸模式指导日粮配制,已经成为乳业生产者和研究者的共同追求。随着奶牛分子营养学的发展,运用分子营养学手段,揭示营养素与功能基因的互作关系,阐明其对... 王立娜 林叶 王春梅 赵锋 张莉 崔英俊 高学军 李庆章关键词:奶牛乳腺上皮细胞 理想氨基酸模式 氨基酸 基因互作 文献传递