汪学龙
- 作品数：169 被引量：561H指数：13
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 皖南山区肺吸虫中间宿主感染情况调查被引量：1
- 1999年
- 皖南休宁县原是肺吸虫病重流行区,近二十年,随着经济、文化迅速发展,大力开展健康教育,当地居民的生活习惯、饮食卫生习惯、自然生态环境都已发生较大变化。今年暑期,我们深入该地区调查肺吸虫中间宿主感染情况,并观察高温、冷冻等物理因素对囊蚴活力之影响。结果如下。
- 王维汪学龙王志成杜继双孙华峰朱有超
- 关键词：中间宿主肺吸虫病流行区自然生态环境自然疫源地
- 转化生长因子β1 RⅡ和白细胞介素13 Rα2在血吸虫病肝纤维化中的作用被引量：4
- 2013年
- 血吸虫病肝纤维化是由被激活的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)生成大量的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在肝组织间质中过度沉积所致。研究发现,细胞因子网络紊乱是导致血吸虫病肝纤维化发生发展最根本的原因。转化生长因子β1(TGF-β1)和白细胞介素13(IL-13)都通过肝星状细胞膜上特异性受体来介导纤维化的发生。本文就上述因子作用的诱饵受体TGF-β1 RⅡ(TGF-β1 typeⅡreceptor)和IL-13 Rα2(IL-13 receptorα2)在血吸虫病肝纤维化中的作用进行综述。
- 周超群王永阳汪学龙
- 关键词：转化生长因子Β1肝纤维化血吸虫病
- 弓形虫膜表面抗原SAG1基因的原核表达及重组蛋白的免疫诊断价值
- 2011年
- 目的 探讨重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因的表达产物-原核表达蛋白（rSAG1）用于弓形虫病的免疫诊断价值.方法 用异丙基-B-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导大肠埃希菌重组质粒pET28a-SAG1（pET28a-SAG1/BL21）表达,纯化重组pET28a-SAG1/BL21弓形虫膜表面抗原SAG1基因表达产物;用弓形虫缓殖子感染的鼠血清、正常鼠血清和10例弓形虫患者血清为一抗,基因表达产物rSAG1用免疫印迹法进行鉴定,比较rSAG1在弓形虫病免疫诊断中的价值.结果 纯化重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因后获得了相对分子质量约38.5×103的表达产物rSAG1;表面抗原SAG1可被弓形虫缓殖子感染的鼠血清所识别;10例弓形虫患者血清在免疫印迹诊断中,有4例出现了弓形虫膜表面抗原SAG1基因表达产物rSAG1.结论 rSAG1具备一定的弓形虫病的免疫诊断价值.
- 王朝兰汤冬生姚湧汪学龙王业梅
- 关键词：弓形虫重组蛋白免疫诊断
- 日本血吸虫信号转导分子14-3-3蛋白epsilon亚型基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2002年
- 目的 克隆日本血吸虫 14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型的编码基因 ,以研究其在血吸虫信号传导及其在免疫预防的作用。方法 以日本血吸虫成虫总 RNA为模板逆转录合成 c DNA链 ,设计合成引物 ,用 PCR法扩增14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型基因编码序列 ,将其克隆入 p GEM- T载体 ,并用双酶切和以质粒为模板的 PCR进行鉴定。结果 RT- PCR扩增出一条约 75 3bp大小的特异性条带 ,重组质粒的双酶切和以质粒为模板的 PCR均获得了一条与 RT- PCR扩增出大小相同条带 ,序列测定结果表明其具有 75 3bp的开放阅读框 ,并具蛋白激酶、酪氨酸激酶磷酸化位点。结论 成功构建了日本血吸虫 14 - 3- 3蛋白 epsilon亚型重组 p GEM- T克隆载体 ,为进一步的研究提供了条件。
- 汪学龙沈继龙蒋作君
- 关键词：信号转导分子日本血吸虫基因克隆
- 弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响
- 2019年
- 目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入ROP16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检测蜕膜细胞凋亡率的变化,并用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果提取的小鼠子宫基质细胞纯度为95%以上,在体外诱导蜕膜化后,PRL mRNA的表达随时间延长而显著升高(P<0.05),在诱导的蜕膜细胞中过表达ROP16Ⅰ/Ⅲ,相比于对照组,蜕膜细胞的凋亡率降低(P<0.01),凋亡蛋白Bax表达降低,Bcl-2蛋白表达上调。结论弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白会抑制蜕膜细胞的凋亡,可能会影响蜕膜细胞增殖与凋亡的平衡,从而影响胚胎的植入。
- 金郁计永胜姚湧汪学龙
- 关键词：弓形虫蜕膜化凋亡
- 神经元细胞信号传导蛋白质14-3-3ζ编码基因的扩增和克隆被引量：1
- 2001年
- 目的 克隆神经元信号传导蛋白质 14 3 3ζ编码基因 ,以研究其在人神经退行性病变中的诊断价值、细胞信号传导过程中的作用及对细胞分裂、细胞凋亡的影响。方法 提取人脑胶质瘤细胞总mRNA ,以其为模板逆转录合成cD NA第一链 ,设计合成引物 ,用PCR扩增 14 3 3ζ基因编码序列 ,将其插入 pGEM T载体 ,并用双酶切和以质粒为模板的PCR进行鉴定。结果 RT PCR扩增出一条约 75 0bp大小的特异性条带 ,重组质粒的双酶切和以质粒为模板的PCR获得了一条与RT PCR大小相同的条带。经DNA测序证明所克隆的DNA片段与GenBank收录序列一致。结论 信号传导蛋白质 14 3 3ζ重组 pGEM T克隆载体的成功构建 ,为进一步研究提供了条件。
- 祖莹沈继龙汪学龙
- 关键词：遗传学CJD编码基因基因扩增
- 增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建和表达被引量：14
- 2005年
- 目的 构建增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein, EGFP)编码基因的真核表达载体 pcDNA3.1(+) GFP,并观察其在Hep 2细胞中的表达情况。 方法 据已知的EGFP基因序列,设计合成 1 对引物,并引入Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ酶切位点。应用PCR技术,从含有 EGFP的 pAdTrack CMV中扩增 EGFP编码基因。通过 TA连接将其克隆入pGEM T easy载体,经PCR及限制性内切酶鉴定后,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,转化Esche richia coli DH5α感受态细胞,于Amp+ LB平板上筛选阳性克隆。重组子经 Hind Ⅲ和EcoRⅤ双酶切、PCR鉴定,将该载体转染人喉癌细胞 Hep 2 后 48 h观察 EGFP表达情况。 结果 成功构建了含 EGFP 编码基因的真核表达载体pcDNA3.1(+) GFP,并成功转染Hep 2细胞,在倒置荧光显微镜下呈现绿色光。 结论 获得可产生绿色荧光的 EG FP,能方便地用作报告基因和筛选标记。
- 李小月何金生沈继龙宋蔚汪学龙胡元生
- 关键词：绿色荧光蛋白真核表达
- 日本血吸虫磷酸丙糖异构酶编码基因的克隆与序列测定
- 2004年
- 目的 克隆和鉴定日本血吸虫磷酸丙糖异构酶 (SjT PI)编码基因 ,为寻找血吸虫病的候选疫苗联合应用打基础。方法 设计合成引物 ,抽提日本血吸虫成虫总RNA ,用RT PCR法从中扩增出SjTPI基因编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体 ,用双酶切、以重组质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定。结果 RT PCR法从成虫总RNA中扩增出大小为 75 9bpSjTPI基因编码序列 ,重组质粒 pGEM SjT PI经双酶切、PCR扩增 ,均可获得一条与RT PCR产物一致的DNA片段 ,序列测定结果表明具有一个长度为 75 9bp的完整开放阅读框 ,与日本血吸虫 (菲律宾株 )和曼氏血吸虫磷酸丙糖异构酶核苷酸序列有高度同源性 (分别为 99%和88% )。结论 该实验成功地克隆了SjTPI编码基因 ,为进一步研究提供了条件。
- 汪学龙沈继龙姚涌江宝玲蒋作君
- 关键词：日本血吸虫磷酸丙糖异构酶基因编码基因克隆基因序列
- Beclin1基因真核表达载体的构建、鉴定及在真核细胞内的表达被引量：1
- 2015年
- 目的构建Beclin1真核表达载体,检测该基因在真核细胞内的表达,为进一步研究其在弓形虫感染致病中的作用打下基础。方法 PCR扩增目的基因Beclin1后插入到真核表达载体pEGFP中,双酶切鉴定并进行序列测定;通过脂质体介导的方法用重组质粒转染293T细胞,再以Western blot方法检测该基因编码蛋白在真核细胞内的表达。结果 PCR扩增出目的基因Beclin1片段,大小为1 353bp,与预期值一致。构建了pEGFP-Beclin1真核表达载体,经双酶切鉴定插入片段大小正确;DNA测序后与GenBank中的Beclin1基因序列比对,同源性为100%;Western blot检测该蛋白在真核细胞内表达。结论成功构建了pEGFP-Beclin1真核表达载体,该基因编码蛋白可以在真核细胞内表达,为进一步研究该基因在弓形虫感染致病中的作用打下了基础。
- 王正印汪靓婧洪丽荣王铭邱增玉汪学龙
- 关键词：真核表达载体
- Mago nashi:一个日本血吸虫性别决定基因的发现与鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的 运用免疫学方法筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )童虫cDNA文库 ,寻找血吸虫新基因 ,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Magonashi样蛋白基因。方法 用混合的血吸虫感染者血清免疫学筛选日本血吸虫童虫cDNA文库 ,随机挑取阳性重组克隆进行测序 ,以获得血吸虫基因 ,并通过BLAST程序进行比较及同源性分析 ,根据分析结果设计合成引物 ,用PCR法扩增出日本血吸虫Magonashi样蛋白基因 (SiM)编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体和 pBKCMV载体 ,用双酶切、以质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定。结果 本研究共挑取 7个阳性克隆 ,通过测序获得了 5个有表达序列标签(ExpressedSequenceTag .EST)价值的序列 ,并进行了同源性分析 ;用PCR法扩增出大小为 4 4 1bpSjM开放阅读框 ,重组质粒pGEM SjM和 pBKCMV SjM经双酶切均可获得一条为PCR产物一致的DNA片段。 结论 本实验获得了 5个有EST价值的序列 ,并成功地克隆了其中SjM编码基因。
- 汪学龙沈继龙沈际佳蒋作君
- 关键词：日本血吸虫CDNA文库免疫学筛选基因克隆
