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重组p300组蛋白乙酰转移酶结构域的表达及应用被引量：2: 2011年; 组蛋白乙酰化修饰是基因起始转录的关键步骤.p300等组蛋白乙酰转移酶(HATs)催化组蛋白和非组蛋白的乙酰化.HATs具有多种细胞功能,而且乙酰化对底物蛋白的功能改变也具有重要功能.组蛋白乙酰转移酶p300可乙酰化多种细胞内蛋白,某些病毒蛋白与p300有相互作用并促进病毒复制.因此,p300是细胞内具有广泛功能的转录激活因子.组蛋白乙酰转移酶结构域(HAT区)是p300乙酰化酶活性的最小中心功能域,在p300乙酰化底物中具有重要功能.本文重组表达了对应p300 HAT区的GST-p300 HAT蛋白,对其乙酰化酶的活性进行检测.结果证实,p300 HAT蛋白在体外可高效乙酰化组蛋白H3.随后,对体外乙酰化反应的条件进行优化.总之,本文构建了一种简单高效、非放射性体外乙酰化体系,适用于对潜在底物蛋白的乙酰化水平和机制进行分析,以及乙酰化蛋白的相关功能的研究.; 常锐谈娟王荣敏陈启民耿运琪乔文涛; 关键词：P300

牛泡沫病毒四种borf 1转录本出核速度差异分析: 牛泡沫病毒(Bovine Foamy Virus)属反转录病毒科泡沫病毒业科泡沫病毒属。该病毒基因组成分、生活周期及基因调控方式与传统的反转录病毒区别较大。它的基因转录至少需要两个启动子协同完成,其中5’LTR主要起始结...; 王维王健常锐乔文涛耿运琪陈启民; 文献传递

一株HIV-1流行株感染性克隆的构建与分析: 近年来我国HIV-1感染与AIDS发病数量呈逐年上升趋势,使国内艾滋病的防控面临着严峻考验。天津地区作为国内感染率较低的省份之一,虽然HIV-1携带者的总体数量不高,但感染群体逐渐由高危人群向普通人群扩散,MSM成为主要...; 常锐李悦程绍辉谈娟耿运琪乔文涛; 文献传递

泡沫病毒与人类免疫缺陷病毒反式激活因子乙酰化的初步研究: 乙酰化是除磷酸化之外另一种重要的蛋白翻译后修饰形式,底物蛋白的可逆乙酰化由组蛋白乙酰转移酶(HATs)和组蛋白去乙酰化酶(HDACs)催化。这两种酶可调控许多种类蛋白的乙酰化修饰,包括组蛋白、转录因子、细胞骨架和信号通路...; 常锐; 关键词：组蛋白乙酰转移酶乙酰化人类免疫缺陷病毒泡沫病毒

牛泡沫病毒反式激活因子BTas的乙酰化机制初探: 牛泡沫病毒(Bovine foamy virus,BFV)属反转录病毒科泡沫病毒亚科泡沫病毒属,其反式激活因子BTas是病毒基因表达调控的核心因子,在病毒由潜伏进入裂解循环中发挥重要作用。本文对其乙酰化调节机制进行初步研...; 常锐谈娟李悦耿运琪乔文涛; 关键词：基因表达调控乙酰化; 文献传递

牛泡沫病毒通过利用细胞NF-κB信号通路促进其转录及复制分子机制的研究: 核因子κB,即NF-κB,是细胞中一类重要转录因子,在细胞生存、发育、分化以及免疫、炎症反应过程中参与基因的表达与调控。许多病毒也进化出相应的策略调节细胞的NF-κB信号通路,由此改变相关细胞事件,保证其完成生活周期。对...; 常锐谈娟贾瑞许璇耿运琪乔文涛; 关键词：信号通路分子机制; 文献传递

牛泡沫病毒BTas蛋白乙酰化修饰初步研究: 牛泡沫病毒(Bovine Foamy Virus)属反转录病毒科泡沫病毒亚科泡沫病毒属,具有广泛的宿主范围,其在体外虽可使细胞发生强烈病变,在体内却无任何临床病症。BFV基因组在env与3’LTR之间存在若干编码调控蛋白...; 常锐; 关键词：牛泡沫病毒乙酰化修饰反转录病毒科 P300; 文献传递

利用蛋白质组学技术筛选与BIV基质蛋白MA相互作用蛋白: 2010年; 牛免疫缺陷病毒BIV的基质蛋白MA是由gag基因编码病毒结构蛋白之一,参与病毒运输包装等多种过程.通过蛋白质组学方法,寻找与MA有相互作用的宿主蛋白.通过原核表达MA-CBP融合蛋白,将其结合在几丁质上,并与细胞裂解物混合,纯化特异结合的细胞蛋白.利用双向电泳以及MALDI-TOF质谱分析,筛选到8个与MA具有相互作用的候选蛋白,功能涉及运输、氧化还原、热激反应等.进而克隆所鉴定蛋白之一的PRDX4,利用体外结合实验进一步证实其与BIV MA蛋白存在相互作用.初步建立利用蛋白质组学技术研究病毒与宿主相互作用实验方法,所得结果为了解慢病毒结构蛋白在病毒生活周期中功能提供了线索,有助于探索过氧化物酶家族蛋白在病毒感染过程中的作用及其分子机制.; 刘畅常锐李欣陈启民耿运琪乔文涛; 关键词：牛免疫缺陷病毒基质蛋白蛋白质组学

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常锐