黄志成
- 作品数：40 被引量：107H指数：6
- 供职机构：杭州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：杭州市科技发展计划项目浙江省医药卫生科学研究基金杭州市医药卫生科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不含霍乱毒素基因的霍乱弧菌噬菌体CTXΦ基因组的多样性
- 产毒型霍乱弧菌可引起烈性肠道传染病,能导致全球性的大流行,霍乱毒素(CT)是主要致病因子,近来研究表明,CT是由CTX中上携带的ctxAB所编码的。霍乱弧菌的溶原性丝状噬菌体 CTXΦ基因组被人为地分为两部:4．6kb的...
- 濮小英潘劲草孟东梅叶榕黄志成
- 关键词：CTX基因组
- 文献传递
- 某幼儿园一起脑炎疫情流行病学及病原研究被引量：11
- 2014年
- 目的查明杭州某县市一家幼儿园无菌性脑炎疫情的流行病学特征及病原。方法通过查阅幼儿园晨检、因病缺课记录；某医院发热门诊就诊记录和现场个案调查展开流行病学调查。采集患儿粪便、血清标本先通过荧光FIT—PCR和ELISA方法初筛，然后选肠道病毒通用阳性标本进行病毒分离、培养；通过逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）鉴定上述培养物，并扩增埃可病毒9型（简称ECHO-9）VP1区全长基因和序列测定，利用生物信息学软件对序列进行分析，构建基因进化树。结果该幼儿园共累计报告病例18例，发热、头痛、呕吐为主要症状。从采集的7份样本中分离到ECHO阳性毒株2株，VP1基因全序列测定结果显示其与ECHO-9代表株核苷酸和氨基酸的相似性最高，分别为73．5％～93．6％、85．4％-97．0％。结论引起此次疫情的病原为ECHO-9。进化树分析表明与近年来已报道的ECHO-9相比有一定的亲缘关系。
- 邱晓枫谢立黄志成杨旭辉王婧潘劲草
- 关键词：病毒性脑炎VP1基因
- 大肠埃希菌LEE毒力岛的临床流行病学调查被引量：12
- 2001年
- [目的 ]了解携 L EE毒力岛大肠埃希菌在杭州不同人群中的流行状况。 [方法 ]应用 PCR技术检测不同临床来源的大肠埃希菌菌株的 L EE毒力岛 ,并对检出的 intimin基因 3'端部分以 PCR法和限制性酶切分析法进一步分型。[结果 ]在杭州市区 2周岁以下的腹泻婴幼儿中 ,携 L EE毒力岛的大肠埃希菌的检出率高达 2 0 .0 % ,而在 2岁以上的腹泻人群中检出率仅为 3.0 %。检获的大肠埃希菌 L EE毒力岛的 intimin基因以 β型为主 (占 45 .0 % ) ,并有 2 0 .0 %不能按本文 PCR方法分型。限制酶切分析表明 ,β型可进一步分为 2个亚型 ,本文分离菌株的 γ型 intimin基因与 EHEC O15 7∶H7933株的 γ型 intimin基因酶切图谱差异较大。检获的携 L EE毒力岛的大肠埃希菌菌株中 ,仅有 1/ 5能用国内目前的致泻性大肠埃希菌诊断血清确定 O抗原。 [结论 ]携 L EE毒力岛大肠埃希菌为杭州市致婴幼儿腹泻的主要细菌性病原。L EE毒力岛的检测应成为 EPEC的诊断和流行病学调查主要手段。
- 潘劲草孟冬梅黄志成斯国静祝水芬姚怀芳王衡施世锋
- 关键词：大肠埃希菌流行病学婴幼儿腹泻
- 双位点RT-PCR和改良实时RT-PCR检测SARS冠状病毒
- 本文对3例杭州市SARS临床确诊病人、4例肄似病人和27例医学观察病人咽拭子标本进行巢式逆转录聚合酶链反应检测SARSCoV核酸,对阳性扩增产物进行核酸序列测定;并应用常规实时RT-PCR技术及改良的实时RT-PCR技术...
- 叶榕潘劲草黄志成王衡汪皓秋韦东芳许珂闻洪根陈康凯
- 关键词：非典型性肺炎冠状病毒核酸序列咽拭子标本
- 文献传递
- 市售含对二氯苯防蛀剂对大鼠吸入毒性的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究含对二氯苯防蛀剂对大鼠的吸入毒性。方法急性吸入毒性选用60只大鼠(SD),随机分为6组,每组10只,雌雄各半,组距按1.5倍设计剂量系列。亚急性吸入毒性选用大鼠(SD)随机分组,每组10只,雌雄各半。用静式呼吸道染毒法,分别设700、1 400、2 400 mg/m3剂量染毒,2 h/d染毒,阴性对照为空柜。观察动物行为状态,每实验组末次染毒24 h后进行血液检测,处死动物,取其肝、肾、脾、肺、心脏称重,计算脏体系数,并取相应的组织制备病理切片。结果大鼠急性吸入毒性LC50为8 858 mg/m3。血液检测差异无统计学意义;高剂量组肝肾重量增加;病理切片肝细胞浊肿,肾小管上皮细胞肿胀。结论中、高剂量染毒组对大鼠有一定的毒性影响。
- 寇宇夏勇于新芬项华黄志成
- 关键词：吸入毒性病理
- 杆状病毒和分批补料发酵联用高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D
- 2011年
- 目的利用Bac-to-Bac表达系统和分批补料式培养技术在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中高效表达重组单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2 gD2)。方法 以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因,利用Bac-to-Bac表达系统构建含目的基因的重组杆状病毒。同时采用分批补料式培养技术高密度培养Sf9细胞实现重组gD2蛋白的高效表达。构建豚鼠生殖器疱疹模型,研究重组HSV-2 gD2蛋白的免疫活性。结果在一个5 L生物反应器内,在15 mmol/L葡萄糖、0.4 g/L谷氨酰胺以及45%溶解氧的培养条件下,重组gD2蛋白的产量高达192 mg/L。此外,纯化后的重组gD2免疫能显著降低豚鼠生殖器疱疹模型的外阴皮损症状。结论 重组HSV-2 gD2蛋白利用杆状病毒和分批补料发酵联用得到高效表达,并表现出良好的免疫原性,为发展HSV-2疫苗奠定了基础。
- 刘涛董惠钧黄志成郑伟祝水芬
- 关键词：昆虫杆状病毒表达系统糖蛋白D分批补料发酵
- SARS防制对策及应急技术应用被引量：1
- 2003年
- 项海青施世锋黄诚孝倪晓平程彬黄志成潘劲草邓晶王建华
- 关键词：SARS防制对策应急技术非典型肺炎
- 单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白在杆状病毒昆虫表达体系中的表达及其免疫效应研究
- 刘涛黄志成刘继峰祝水芬郑伟
- 该项目为杭州市科技局重点专病专科项目(资助课题编号：20080333Q29)。单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)是引起人类生殖器疱疹(genitalherpes，GH)的主要病因，GH90%的病原体为HSV-2。GH近年来发...
- 关键词：
- 关键词：杆状病毒免疫效应
- 埃可病毒9型VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2015年
- 目的原核表达并纯化埃可病毒9型(ECHO9)VP1蛋白,免疫兔子制备多克隆抗体,鉴定重组蛋白的免疫活性,为ECHO9血清学检测试剂和疫苗研究提供依据。方法 PCR方法扩增VP1基因,构建原核表达质粒p ET28a-VP1并转化到大肠杆菌(E.coli BL21),诱导表达并纯化VP1重组蛋白,免疫兔子制备抗VP1多克隆抗体,ELISA检测抗VP1抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性。病毒中和试验鉴定抗体中和ECHO9病毒的能力。结果 VP1重组蛋白在大肠杆菌BL21中高效表达,制备的抗VP1抗体效价为1∶105。Western blot检测结果显示,抗VP1多克隆抗体可以识别原核表达的VP1蛋白。中和试验显示抗体对ECHO9病毒有中和作用,其效价为1∶10。结论本研究成功原核表达了ECHO9的VP1蛋白并制备出抗VP1多克隆抗体,有助于ECHO9的临床诊断、疫苗开发和分子病毒学研究。
- 邱晓枫黄志成张国忠濮小英潘劲草王咪咪
- 关键词：病毒性脑炎VP1基因多克隆抗体
- 聚合酶链反应检测与鉴定人流行性感冒病毒被引量：1
- 2002年
- 目的 建立一个快速、简单、敏感、特异的实验室检测流感病毒的方法。方法 采用RT-PCR、复合RT-PCR方法和HI试验对流行性感冒病毒的参考株（甲1、甲3和乙型各两株）和分离毒株（甲1型1株、甲3型3株）以及可疑流感患者的喉嗽液标本进行检测。结果 采用RT-PCR方法和复合RT-PCR方法均能检测甲1、甲3、乙型的流感病毒参考株和分离毒株,且能根据扩增物的分子量鉴定出其型别与亚型,其结果与HI法完全相符。复合RT-PCR方法从3例可疑流感患者的喉嗽液标本中检测到阳性结果1例,结果同传统鸡胚分离、HI分型方法相同。结论本文建立的RT-PCR或复合RT-PCR方法可应用于常见流感病毒的快速检测及初步分型,复合RT-PCR方法具更高的工作效率。
- 黄志成潘劲草闻洪根王明法
- 关键词：流行性感冒病毒血凝抑制试验
